Zanieczyszczenia procesowe i produktowe
W procesie produkcji mAb występuje lub powstaje wiele zanieczyszczeń, w tym zanieczyszczenia procesowe lub produktowe, które mogą zniweczyć program rozwoju bioterapii. Na szczęście mamy wieloletnie doświadczenie w przeprowadzaniu testów zarówno w środowiskach badawczo-rozwojowych, jak i GMP, wspierając wymagania dotyczące danych na każdym etapie cyklu rozwoju. Dzięki najnowocześniejszemu oprzyrządowaniu i krótkim czasom realizacji zapewniamy wiarygodne wyniki, które popychają Twój projekt do przodu.
Ocena zanieczyszczeń procesowych
Aby zaspokoić potrzeby w zakresie testowania następujących zanieczyszczeń procesowych, oferujemy rodziny testów obejmujące zanieczyszczenia procesowe, białka i DNA komórek gospodarza oraz dodatki procesowe.
Zanieczyszczenia komórek gospodarza:Podczas produkcji mAb, zanieczyszczenia procesowe mogą pochodzić z komórek gospodarza używanych do ekspresji leku. Zanieczyszczenia białkami komórek gospodarza (HCP), obecne na poziomie ppm w bioterapiach, stanowią poważne ryzyko immunogenności, ponieważ mogą wywołać nieprzewidywalną odpowiedź immunologiczną u pacjentów. Ich złożony i zróżnicowany charakter sprawia, że są trudne do wykrycia lub monitorowania. Przy kryteriach akceptacji dla pozostałości DNA gospodarza zwykle ustalonych na bardzo niskim poziomie (często ≤1,0 pg DNA na mg substancji leczniczej), kluczowe znaczenie mają skuteczne techniki usuwania i czułe metody wykrywania.
Dodatki produkcyjne: Podczas opracowywania i produkcji mAb należy monitorować szeroką gamę dodatków produkcyjnych. Należą do nich detergenty, białko A, odczynniki do transfekcji, antybiotyki, środki przeciwpieniące i czynniki wzrostu.
Bateria drobnoustrojów:Wiele mAb jest produkowanych w organizmach drobnoustrojów, aby skorzystać z szybkiego tempa wzrostu i wysokiej wydajności, co sprawia, że ważne jest monitorowanie i kontrolowanie obecności zanieczyszczeń mikrobiologicznych. Składnik ściany komórkowej bakterii Gram-ujemnych, zwany endotoksyną, wywołuje reakcje od gorączki i dreszczy po śmiertelny wstrząs septyczny. Usunięcie jej z mAb jest nie tylko krytyczne, ale i wymagane przepisami. Testowanie obciążenia biologicznego powinno być stosowane w całym procesie produkcji mAb, a testowanie sterylności jest również ważne dla informowania o integralności produkcji mAb.
Ocena zanieczyszczeń produktu
Aby zaspokoić potrzeby testowania następujących zanieczyszczeń produktu, nasze rodziny testów zanieczyszczeń produktu są zorganizowane zgodnie z wariantami wielkości, wariantami ładunku lub mikrobiologią (żywotne lub nieżywotne).
Rozkład ładunku: Występujące w wyniku modyfikacji potranslacyjnych (PTM) podczas procesu produkcyjnego lub z powodu modyfikacji chemicznych podczas oczyszczania i przechowywania, warianty ładunku mogą mieć znaczący wpływ na aktywność biologiczną i farmakokinetykę mAb. Analiza wariantów ładunku jest wymogiem regulacyjnym dla mAb, przy użyciu technik, które obejmują chromatografię kationowymienną (CEX) i kapilarne ogniskowanie izoelektryczne (cIEF).
Rozkład wielkości: Początkowy materiał produkcyjny często zawiera warianty wielkości, takie jak agregaty, fragmenty i biomolekuły wykazujące dodatkowe łańcuchy lekkie. Ponieważ mogą one potencjalnie wpływać na immunogenność i siłę działania, ważne jest monitorowanie ich obecności. Chromatografia wykluczania (SEC) jest najczęściej stosowaną metodą oceny rozkładu wielkości, podczas gdy techniki takie jak dynamiczne rozpraszanie światła (DLS) i elektroforeza kapilarna w żelu dodecylosiarczanu sodu (CE-SDS) są również bardzo pouczające.
Analiza masy cząsteczkowej:Masa cząsteczkowa jest głównym wskaźnikiem tożsamości mAb, na którą wpływa charakter łańcuchów lekkich i ciężkich, a także PTM. Masa cząsteczkowa mAb może być również badana poprzez deglikozylację łańcuchów ciężkich w celu usunięcia jednego z głównych źródeł heterogeniczności białka.
Mapowanie sekwencji: Powszechnie stosowana technika mapowania sekwencji w celu określenia tożsamości mAb, mapowanie peptydów waha się od generowania map peptydów pojedynczego enzymu do bardziej złożonych analiz, takich jak akwizycja zależna od danych (DDA) metod dysocjacji aktywowanej kolizyjnie (CAD). Informacje te można rozszerzyć za pomocą sekwencjonowania N- lub C-końcowego lub spektrometrii ruchliwości jonów.
Analiza modyfikacji:Zrozumienie i kontrolowanie wszelkich modyfikacji, które występują podczas procesu produkcyjnego, pomaga wygenerować spójny produkt mAb. Na przykład mapowanie N-glikanu może informować o stabilności, bioaktywności i immunogenności mAb, podczas gdy kwantyfikacja kwasu sialowego jest kluczem do zapobiegania nadmiernej sialilacji. Rozsądne jest również wykonanie mapowania dwusiarczków, ponieważ wiadomo, że redukcja dwusiarczków wywołana produkcją powoduje niską wydajność podczas zbioru mAb.
Testowanie właściwości fizycznych:Wiele różnych właściwości fizycznych mAb wymaga testowania podczas produkcji. Obejmują one pH, stężenie i osmolalność, z których wszystkie są niezbędne do wytworzenia spójnego produktu leczniczego.
Aby omówić swoje potrzeby w zakresie testowania zanieczyszczeń i zrobić kolejny krok w kierunku zabezpieczenia przyszłości swojej bioterapii, wypełnij poniższy formularz.
Powiązane materiały wideo
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?