Wszystkie zdjęcia(5)
Kluczowe dokumenty
04823125001
Roche
Zestaw wysokiej czystości FFPE RNA Micro Kit
kit of for 50 isolations
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
41105500
NACRES:
NA.55
Polecane produkty
producent / nazwa handlowa
Roche
opakowanie
kit of for 50 isolations
Opis ogólny
Niska do średniej przepustowość izolacji całkowitego RNA z wolnych skrawków tkanek FFPE w skali mikro.
Zastosowanie
Zestaw High Pure FFPE RNA Micro Kit izoluje całkowity RNA z utrwalonych w formalinie, zatopionych w parafinie (FFPE) próbek tkanek do bezpośredniego użycia w:
- Jakościowej RT-PCR
- Względna kwantyfikacja mRNA za pomocą systemów PCR w czasie rzeczywistym, takich jak system LightCycler® 480
- RT-PCR z wyświetlaniem różnicowym
- Synteza cDNA
- Przedłużanie primerów
Cechy i korzyści
Kwasy nukleinowe wiążą się z powierzchnią włókna szklanego w obecności soli chaotropowej (guanidyny HCl). Pozwala to rurce filtracyjnej High Pure na specyficzne unieruchomienie kwasów nukleinowych (zarówno DNA, jak i RNA), podczas gdy są one wolne od zanieczyszczeń. W przypadku izolacji RNA warunki wiązania można zoptymalizować, aby zapewnić unieruchomienie całego RNA.
Rozkład wielkości: Typowy rozmiar RNA wyizolowanego z tkanki utrwalonej formaliną wynosi od 150 do 1500 zasad. Jednak grubość przekroju, rodzaj tkanki, wiek próbki i zastosowany protokół utrwalania mogą wpływać na wydajność i jakość wyizolowanego RNA.
Pojemność: Mikrofiltry High Pure mieszczą do 500 μl próbki.
Materiał próbki: 1 - 10 μm wycinki z utrwalonej formaliną, zatopionej w parafinie (FFPE) tkanki (np. z okrężnicy, piersi, wątroby, nerek, śledziony ssaków).
Rozkład wielkości: Typowy rozmiar RNA wyizolowanego z tkanki utrwalonej formaliną wynosi od 150 do 1500 zasad. Jednak grubość przekroju, rodzaj tkanki, wiek próbki i zastosowany protokół utrwalania mogą wpływać na wydajność i jakość wyizolowanego RNA.
Pojemność: Mikrofiltry High Pure mieszczą do 500 μl próbki.
Materiał próbki: 1 - 10 μm wycinki z utrwalonej formaliną, zatopionej w parafinie (FFPE) tkanki (np. z okrężnicy, piersi, wątroby, nerek, śledziony ssaków).
Zestaw High Pure FFPE RNA Micro Kit izoluje całkowity RNA z utrwalonych w formalinie, zatopionych w parafinie (FFPE) próbek tkanek do bezpośredniego użycia w RT-PCR.
- Usprawnia i upraszcza izolację RNA (nawet małych fragmentów RNA) z tkanek FFPE.
- Uzyskanie wysoce skoncentrowanego, gotowego do użycia eluatu i doskonałego odzysku RNA (>80%).
- Izolacja RNA wolnego od DNA do wykorzystania w jakościowej i ilościowej reakcji RT-PCR.
- Zminimalizuj straty RNA dzięki zestawowi, który usuwa zanieczyszczenia bez wytrącania lub innych etapów obróbki, które degradują RNA.
- Generowanie wysokiej jakości matrycowego RNA, które wykazuje doskonałą wydajność i liniowość w RT-PCR.
Komponenty
- Tissue Lysis Buffer
- Proteinase K, recombinant, PCR Grade
- Binding Buffer
- Wash Buffer I
- Wash Buffer II
- DNase I, recombinant, lyophilized
- DNase Incubation Buffer
- Elution Buffer
- High Pure Micro Filter Tubes
- Collection Tubes
Jakość
Formalin-fixed, paraffin-embedded tissue sections are homogenized by overnight Proteinase K digestion and purified as described. RNA yield is determined by measuring the optical density at 260 nm.
The RNA eluate and specific primers for the ß2M gene are used in one-step RT-PCR. In the following PCR on the LightCycler® 2.0 Instrument (accomplished using the LightCycler® RNA Amplification Kit SYBR Green I and specific primers for β2M), the expected amplification signal is obtained at a Cp-value less than 24.
Absence of contaminating genomic DNA is examined by PCR on a LightCycler® 2.0 Instrument without a reverse transcriptase step; no amplification product is obtained.
The RNA eluate and specific primers for the ß2M gene are used in one-step RT-PCR. In the following PCR on the LightCycler® 2.0 Instrument (accomplished using the LightCycler® RNA Amplification Kit SYBR Green I and specific primers for β2M), the expected amplification signal is obtained at a Cp-value less than 24.
Absence of contaminating genomic DNA is examined by PCR on a LightCycler® 2.0 Instrument without a reverse transcriptase step; no amplification product is obtained.
Uwaga dotycząca przygotowania
Aby przygotować skrawki tkanek do izolacji RNA, odczynniki utrwalające muszą zostać usunięte z próbek; po odparafinowaniu skrawki są gotowe do przetworzenia za pomocą zestawu High Pure FFPE RNA Micro Kit. Pozbawione parafiny próbki tkanek są rozbijane i homogenizowane podczas inkubacji z proteinazą K i solą chaotropową (guanidyna HCl). Homogenat jest następnie nakładany na włókninę z włókna szklanego w probówce High Pure Micro Filter Tube.
W warunkach buforowych stosowanych w procedurze wszystkie kwasy nukleinowe wiążą się specyficznie z włókniną z włókna szklanego, podczas gdy substancje zanieczyszczające (sole, białka i inne zanieczyszczenia tkanek) nie. DNA w preparacie jest trawione DNazą I bezpośrednio na filtrze. Krótkie etapy płukania i wirowania z łatwością usuwają strawione fragmenty DNA i inne substancje zanieczyszczające. Pozostały oczyszczony RNA jest następnie eluowany w małej objętości buforu o niskiej zawartości soli.
W warunkach buforowych stosowanych w procedurze wszystkie kwasy nukleinowe wiążą się specyficznie z włókniną z włókna szklanego, podczas gdy substancje zanieczyszczające (sole, białka i inne zanieczyszczenia tkanek) nie. DNA w preparacie jest trawione DNazą I bezpośrednio na filtrze. Krótkie etapy płukania i wirowania z łatwością usuwają strawione fragmenty DNA i inne substancje zanieczyszczające. Pozostały oczyszczony RNA jest następnie eluowany w małej objętości buforu o niskiej zawartości soli.
Komentarz do analizy
Typowy odzysk RNA
Materiał wyjściowy i ilość: 1 - 10 μm wycinki FFPE, okrężnica, pierś, wątroba, nerka, śledziona ssaków
Wydajność/Odzyskiwanie: 1,5 - 3,5 μg/5 μm wycinka
Wymagany czas: 60 minut bez 3-godzinnej inkubacji
Liczba reakcji: 50/1-10 μm sekcji
Materiał wyjściowy i ilość: 1 - 10 μm wycinki FFPE, okrężnica, pierś, wątroba, nerka, śledziona ssaków
Wydajność/Odzyskiwanie: 1,5 - 3,5 μg/5 μm wycinka
Wymagany czas: 60 minut bez 3-godzinnej inkubacji
Liczba reakcji: 50/1-10 μm sekcji
Informacje prawne
LightCycler is a registered trademark of Roche
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Hasło ostrzegawcze
Danger
Zwroty wskazujące rodzaj zagrożenia
Zwroty wskazujące środki ostrożności
Klasyfikacja zagrożeń
Acute Tox. 4 Dermal - Acute Tox. 4 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3 - Eye Dam. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Corr. 1C - Skin Sens. 1 - STOT SE 3
Organy docelowe
Respiratory system
Zagrożenia dodatkowe
Kod klasy składowania
13 - Non Combustible Solids
Klasa zagrożenia wodnego (WGK)
WGK 2
Temperatura zapłonu (°F)
does not flash
Temperatura zapłonu (°C)
does not flash
Wybierz jedną z najnowszych wersji:
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
David S Shames et al.
Clinical cancer research : an official journal of the American Association for Cancer Research, 19(24), 6912-6923 (2013-10-08)
We sought to identify predictive biomarkers for a novel nicotinamide phosphoribosyltransferase (NAMPT) inhibitor. We use a NAMPT inhibitor, GNE-617, to evaluate nicotinic acid rescue status in a panel of more than 400 cancer cell lines. Using correlative analysis and RNA
Inês Pires da Silva et al.
Clinical cancer research : an official journal of the American Association for Cancer Research, 25(4), 1272-1279 (2019-01-12)
BRAF V600E and V600K melanomas have distinct clinicopathologic features, and V600K appear to be less responsive to BRAFi±MEKi. We investigated mechanisms for this and explored whether genotype affects response to immunotherapy. Pretreatment formalin-fixed paraffin-embedded tumors from patients treated with BRAFi±MEKi
Manik Garg et al.
Nature communications, 12(1), 1137-1137 (2021-02-20)
Adjuvant systemic therapies are now routinely used following resection of stage III melanoma, however accurate prognostic information is needed to better stratify patients. We use differential expression analyses of primary tumours from 204 RNA-sequenced melanomas within a large adjuvant trial
George P Christophi et al.
Inflammatory bowel diseases, 18(12), 2342-2356 (2012-04-03)
Cytokine signaling pathways play a central role in the pathogenesis of inflammatory bowel disease (IBD). Ulcerative colitis (UC) and Crohn's disease (CD) have unique as well as overlapping phenotypes, susceptibility genes, and gene expression profiles. This study aimed to delineate
Isabella Wimmer et al.
Scientific reports, 8(1), 6351-6351 (2018-04-22)
Formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) tissues are valuable resources commonly used in pathology. However, formalin fixation modifies nucleic acids challenging the isolation of high-quality RNA for genetic profiling. Here, we assessed feasibility and reliability of microarray studies analysing transcriptome data from fresh
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej
