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一般描述
可从培养细胞、组织(包括啮齿动物尾巴)以及新鲜的全血或白血细胞之中分离高纯度的基因组DNA。该试剂盒将硅胶膜技术的优势与微量离心形式结合在一起,同时无需采用昂贵的树脂、乙醇沉淀,以及诸如苯酚和氯仿等有害化学成分。
起始材料首先使用含有离液盐的溶液进行裂解,以确保大分子彻底变性。之后加入乙醇,当裂解物离心通过微量离心管时DNA会结合在硅胶膜上。在洗涤去除污染物后,将DNA放在200 μL的Tris-EDTA溶液中洗脱。预期的基因组DNA得率很大程度上取决于所用的起始材料用量及类型。通过本试剂盒纯化所得的DNA的A260/A280比率介于1.6-1.9之间,最大长度可达50 kb。
纯化所得的基因组DNA可直接用于限制性酶切、PCR、Southern印迹、测序反应等下游应用。
应用
- 限制性内切酶酶切
- PCR
- Southern印迹
- 测序反应
- 克隆
- 连接
特点和优势
- 预期得率:25 μg / 2 x 106个培养细胞;30 μg / 25 mg组织
- 洗脱体积:200 - 400 μl
- 所需时间:细胞裂解后20分钟
- A260/A280比率:1.6 - 1.9
- 是否需要机械式均质化:否
原理
其他说明
法律信息
警示用语:
Danger
危险分类
Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 2 - Eye Dam. 1 - Met. Corr. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
靶器官
Respiratory system
储存分类代码
8A - Combustible corrosive hazardous materials
闪点(°F)
483.8 °F
闪点(°C)
251 °C
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实验方案
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