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輸送温度
wet ice
保管温度
−20°C
詳細
詳細な情報につきましては、TargeTron™のホ-ムペ-ジ: www.sigma-aldrich.com/targetronをご覧ください。
TargeTron Gene Knockout Systemは、グル-プIIイントロンの挿入により細菌の遺伝子を迅速かつ特異的に破壊する目的に適した試薬とプロトコ-ルのセットです。この方法は、グル-プIIイントロンのレトロホ-ミング能力を利用しています。簡単なPCR工程により、宿主ゲノム特異的な挿入用のTargeTron グル-プIIイントロンを作成します。この技術は、原核生物の遺伝子工学、システム生物学、および機能的ゲノミクスなどの手法に使用されています。
既存のノックアウト法に比べると、TargeTron システムは、迅速かつ簡便で強力です。この方法の手順としては、シグマ社のウェブサイト (www.sigma-aldrich.com/targetronaccess)上で、高い確証を得たTargeTronアルゴリズムに標的遺伝子配列を入力し、作成した1個以上のプライマ-セットを使用してPCRを介してTargeTronイントロン鋳型に変異を導入し、pACD4K-C直鎖状ベクタ-に断片をライゲ-ションし、宿主を形質転換し、遺伝子破壊を誘導し、カナマイシン耐性(活性化マ-カ-を挿入)による選択を行い、所望のノックアウトをスクリ-ニングします。
TargeTron システムを用いる遺伝子のノックアウトは、大腸菌、黄色ブドウ球菌、ウェルシュ菌、Shigella flexneri、ネズミチフス菌、およびLactococcus lactis等の幅広い細菌株で実証済みです。他の生物で使用できるように、このシステムを変更することも可能です。
各TargeTronキットには、既定の回数使用できる(3回分または10回分)アクセスカ-ドおよびパスワ-ドが含まれています。パスワ-ドを使用すると、高い確証を得たTargeTron アルゴリズムにアクセスできます。TargeTron アルゴリズムは、イントロンの最適挿入部位を予測し、予測部位に挿入されるイントロンを変異させるプライマ-を設計します。所望の挿入部位を一箇所または複数選択したら、必要なオリゴを発注し、本キットを用いて実験操作を開始します。3EA(3回分キット)は、デザイン構築3回、反応12回分です。10EA(10回分キット)は、デザイン構築10回、反応40回分です。
TargeTron Gene Knockout Systemは、グル-プIIイントロンの挿入により細菌の遺伝子を迅速かつ特異的に破壊する目的に適した試薬とプロトコ-ルのセットです。この方法は、グル-プIIイントロンのレトロホ-ミング能力を利用しています。簡単なPCR工程により、宿主ゲノム特異的な挿入用のTargeTron グル-プIIイントロンを作成します。この技術は、原核生物の遺伝子工学、システム生物学、および機能的ゲノミクスなどの手法に使用されています。
既存のノックアウト法に比べると、TargeTron システムは、迅速かつ簡便で強力です。この方法の手順としては、シグマ社のウェブサイト (www.sigma-aldrich.com/targetronaccess)上で、高い確証を得たTargeTronアルゴリズムに標的遺伝子配列を入力し、作成した1個以上のプライマ-セットを使用してPCRを介してTargeTronイントロン鋳型に変異を導入し、pACD4K-C直鎖状ベクタ-に断片をライゲ-ションし、宿主を形質転換し、遺伝子破壊を誘導し、カナマイシン耐性(活性化マ-カ-を挿入)による選択を行い、所望のノックアウトをスクリ-ニングします。
TargeTron システムを用いる遺伝子のノックアウトは、大腸菌、黄色ブドウ球菌、ウェルシュ菌、Shigella flexneri、ネズミチフス菌、およびLactococcus lactis等の幅広い細菌株で実証済みです。他の生物で使用できるように、このシステムを変更することも可能です。
各TargeTronキットには、既定の回数使用できる(3回分または10回分)アクセスカ-ドおよびパスワ-ドが含まれています。パスワ-ドを使用すると、高い確証を得たTargeTron アルゴリズムにアクセスできます。TargeTron アルゴリズムは、イントロンの最適挿入部位を予測し、予測部位に挿入されるイントロンを変異させるプライマ-を設計します。所望の挿入部位を一箇所または複数選択したら、必要なオリゴを発注し、本キットを用いて実験操作を開始します。3EA(3回分キット)は、デザイン構築3回、反応12回分です。10EA(10回分キット)は、デザイン構築10回、反応40回分です。
アプリケーション
TargeTron™ Gene Knockout System has been used to carry out site-directed mutation of genes within human monocyte-derived macrophages. It has also been used to disrupt the nuclease gene, nuc, in Staphylococcus aureus.
特徴および利点
選択的かつ永続的な遺伝子の破壊を実現します。
簡単で合理的なプロトコルです。ノックアウトを3日以内に実現します。
最小規模のスクリ-ニングで突然変異株を分離できます。
標的挿入の成功率は90%以上です。
特別な宿主細胞の操作や宿主由来因子を必要としません。
簡単で合理的なプロトコルです。ノックアウトを3日以内に実現します。
最小規模のスクリ-ニングで突然変異株を分離できます。
標的挿入の成功率は90%以上です。
特別な宿主細胞の操作や宿主由来因子を必要としません。
構成
System User Manual
TargeTron Access card (password for on-line target site selection)
Intron PCR Template
EBS Universal Primer
LacZ Control Primers
pACD4K-C Linear Vector (20 ng/μl)
JumpStart™ REDTaq® ReadyMix®
HindIII 20 U/μL
BsrGI 10 U/μL
10× Restriction Enzyme Buffer
TargeTron Access card (password for on-line target site selection)
Intron PCR Template
EBS Universal Primer
LacZ Control Primers
pACD4K-C Linear Vector (20 ng/μl)
JumpStart™ REDTaq® ReadyMix®
HindIII 20 U/μL
BsrGI 10 U/μL
10× Restriction Enzyme Buffer
その他情報
TargeTron Gene Knockout Systemの動画は、www.sigma-aldrich.com/targetronanimationでご覧いただけます。
法的情報
JumpStart is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
REDTaq is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
TargeTron is a trademark of InGex, LLC
推奨
製品番号
詳細
価格
保管分類コード
10 - Combustible liquids
引火点(°F)
Not applicable
引火点(℃)
Not applicable
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
毒物及び劇物取締法
キットコンポーネントの情報を参照してください
PRTR
キットコンポーネントの情報を参照してください
消防法
キットコンポーネントの情報を参照してください
労働安全衛生法名称等を表示すべき危険物及び有害物
キットコンポーネントの情報を参照してください
労働安全衛生法名称等を通知すべき危険物及び有害物
キットコンポーネントの情報を参照してください
カルタヘナ法
キットコンポーネントの情報を参照してください
Jan Code
キットコンポーネントの情報を参照してください
試験成績書（COA）
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M Chelsea Lane et al.
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ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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