HWGCRISPR

Sigma Whole Human Genome Lentiviral CRISPR Pool（シグマヒト全ゲノムレンチウイルスCRISPRプール）

• UNSPSCコード: 41106609
• NACRES: NA.51

特性

• 包装: pkg of 8x25 μL (vials)
• 品質水準: 200
• 濃度: 5x10⁸ VP/ml (via p24 assay)
• アプリケーション: CRISPR
• 輸送温度: dry ice
• 保管温度: −70°C

詳細

詳細

CRISPR（クラスター化された規則的な間隔の短い頻発生の繰り返し）は、DNAの反復配列です。これらは単一の転写産物として転写され、のちに短い反復配列に分割されます。

アプリケーション

機能ゲノミクス／スクリーニング／標的バリデーション

生物化学的／生理学的作用

CRISPR Whole Genome Lentiviral Poolsの検出力を利用して、ヒトゲノムのあらゆる遺伝子のノックアウトとスクリーニングを行います。Sigma Whole Human Genome Lentiviral CRISPR Poolは、p24を介して5 x 10⁸ウイルス粒子/mLの最小力価での8 x 25 uLアリコートで200 uLとして提供されます。

特徴および利点

• CRISPRヌクレアーゼを使用してタンパク質コード遺伝子をノックアウトすることにより、その機能を評価します
• ロボット工学や特別な設備なしで卓上でヒト全ゲノム（16,000以上の遺伝子）を効率的にスクリーニングしてください
• 以前のサブプール（Gecko v2）2つの構成から、プールあたり23,000クローンで8つのサブプール（合計184,000クローン）に柔軟性が向上しています
• 遺伝子あたり以前の6 gRNAから、遺伝子あたり10 gRNAにgRNAカバレッジが拡張（Gecko v2）
• 数多くの一体型濃縮および枯渇コントロールにより、研究者はプールされたスクリーニング実験の成功を確信をもって評価できます
• 2 Vector System（プールはgRNAのみ、Cas9は別売り）
• 最適化の容易性：Gecko v2と同じベクターシステムを利用するので、両方の系に対して最適化を1つにすることができます
• オフターゲティングを最小化：厳格なgRNA設計とタイリングルール

調製ノート

Puro死滅曲線および1 mLあたりのCFU（コロニー形成単位）の測定。
ライブラリー規模のスクリーニングを実施する前に、2つの予備実験を行う必要があります。(1) 標的細胞種のピューロマイシンに対する感受性を明らかにする（死滅曲線）、および (2) コロニー形成アッセイ（CFU/mLで測定）を完了することにより、目的の細胞種におけるレンチウイルスの機能的力価を明らかにする。 MOI（感染多重度）の計算は、CFUの値に基づく必要があります。 異なる細胞種は形質導入効率が異なり、異なるレンチウイルス構成体（コンストラクト）は同じように挙動しません。そのため、目的のプール実験を実施する前に、コントロールレンチウイルスCRISPRクローン（シグマから入手可能）を用いて実験条件を最適化することが不可欠です。

その他情報

本製品は、R&Dにのみ使用でき、薬剤、家庭用、または他の用途には使用できません。危険性と安全な取扱い方法に関しては、化学物質安全データシートを参照してください。産生されたレンチウイルス形質導入粒子には複製能力がありませんが、実験室での取扱いでは、リスクグループレベル2（RGL-2）の微生物として扱うことを推奨します。実験室での取扱いと廃棄物の汚染除去については、公開されているすべてのRGL-2ガイドラインに従ってください。

法的情報

CRISPR使用許諾契約

レンチウイルスおよびWPREライセンス合意書

安全性情報

• 保管分類コード: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 3
• 引火点(°F): Not applicable
• 引火点(℃): Not applicable