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詳細
ジゴキシゲニン-11-dUTP、アルカリ安定は、1 mMのテトラリチウム塩溶液として提供されます。
アプリケーション
ジゴキシゲニン-11-dUTP、アルカリ安定は、
蛍光in situハイブリダイゼーション(FISH)および[1][2]ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)のプローブを標識するために使用されています。[3]
注:このヌクレオチドを+15~+25℃で0.1~0.5 NaOHにさらすと、DIG部分が結合したまま残ります。したがって、アルカリ処理への暴露に耐える必要があるDIG-標識化DNAに使用するのに最適です。一方、アルカリ変性によって取り除くことができるDIG-標識プローブを作製しようとするとき(例えば、ブロットの除去中または再探査中)は、このアルカリに安定な調製物を使用しないでください。その代わりに、DIG-11-dUTPのアルカリ不安定フォームを使用してください。
蛍光in situハイブリダイゼーション(FISH)および[1][2]ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)のプローブを標識するために使用されています。[3]
注:このヌクレオチドを+15~+25℃で0.1~0.5 NaOHにさらすと、DIG部分が結合したまま残ります。したがって、アルカリ処理への暴露に耐える必要があるDIG-標識化DNAに使用するのに最適です。一方、アルカリ変性によって取り除くことができるDIG-標識プローブを作製しようとするとき(例えば、ブロットの除去中または再探査中)は、このアルカリに安定な調製物を使用しないでください。その代わりに、DIG-11-dUTPのアルカリ不安定フォームを使用してください。
生物化学的/生理学的作用
ジゴキシゲニン(DIG)-11-デオキシウリジン三リン酸(dUTP)が35%、デオキシチミジン三リン酸(dTTP)が65%の比率でランダムプライマー法またはニックトランスレーション法によりDNA標識反応を行うと、dTTPがDIG-11-dUTPに置換されます。Taq DNAポリメラーゼなどによるポリメラーゼ連鎖反応(PCR)、ターミナルトランスフェラーゼによる3′-テーリング、トランスクリプターまたはM-MuLV逆転写酵素などによるcDNA合成でも、dTTPがDIG-11-dUTPに置き換わって標識されます。これはDNAポリメラーゼ、Taq DNAポリメラーゼ、ターミナルトランスフェラーゼおよび逆転写酵素の基質として理想的です。
特徴および利点
ジゴキシゲニンは、アルカリ耐性のエーテル結合によってデオキシウリジン三りん酸と結合します。
アルカリ耐性があります。:この調製物は、0.1~0.5M NaOHの存在下+15~+25°Cで安定です。
アルカリ耐性があります。:この調製物は、0.1~0.5M NaOHの存在下+15~+25°Cで安定です。
品質
代表的な分析:少なくとも85% DIG-11-dUTP (HPLC、面積%)。
RPLで試験した機能。
RPLで試験した機能。
調製ノート
標準溶液: 弊社は、dATP、dCTP、dGTP、dTTP (各10 mM)を含むデオキシヌクレオチド混合物を調製することを推奨します。(例えば、100 μlのヌクレオチド混合物を調製するには、10 μlのdATP、dCTP、dGTP、dTTP (それぞれ)を60 μlのPCRグレードの水に加えます)。
保管条件(標準溶液):15~25°Cで4週間以内に約5%が分解することがあります。
保管条件(標準溶液):15~25°Cで4週間以内に約5%が分解することがあります。
その他情報
生命科学研究用途に限ります。診断措置において使用しないでください。
保管分類コード
12 - Non Combustible Liquids
WGK
nwg
引火点(°F)
does not flash
引火点(℃)
does not flash
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