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詳細
Rapid DNA Ligation Kitには、ライゲーションに必要なすべての試薬が含まれています。追加の試薬や添加物は必要ありません。本キットは、+15～+25℃でDNAを平滑末端または粘着末端のいずれかと迅速に連結することができます。反応液中のDNA濃度に応じて、ライゲーション産物は環状（DNA濃度が低い場合）またはコンカテマー（DNA濃度が高い場合）のいずれかになります。連結DNAは、形質転換実験における直接使用に適しています。
注：ライゲーション後、High Pure® PCR Product Purification Kitと組み合わせてエレクトロポレーションを行うことができます。
注：ライゲーション後、High Pure® PCR Product Purification Kitと組み合わせてエレクトロポレーションを行うことができます。
特異性
平滑末端または粘着末端のいずれかを有するDNA（≤200 ng）。
熱失活：65℃で10分間（T4リガーゼ）
T4リガーゼの不活性化は、ライゲーション反応混合物を形質転換アッセイ以外の実験に使用する場合にのみ必要です。
注：形質転換前にライゲーション反応混合物が熱不活性化されると、形質転換コロニーの数が劇的に減少します（>20倍）。
スター活性： スター活性も避けるべきです。スター活性を起こしやすい酵素で二重消化を行う場合は、Roche Restriction Enzyme Poster（またはRoche Applied Science Catalog）を参照して、所定の酵素の組合せに最適な緩衝液を選択してください。できる限り、ダブルダイジェスト（二重断片化）にはBuffer H（緩衝液H）を使用してください。
熱失活：65℃で10分間（T4リガーゼ）
T4リガーゼの不活性化は、ライゲーション反応混合物を形質転換アッセイ以外の実験に使用する場合にのみ必要です。
注：形質転換前にライゲーション反応混合物が熱不活性化されると、形質転換コロニーの数が劇的に減少します（>20倍）。
スター活性： スター活性も避けるべきです。スター活性を起こしやすい酵素で二重消化を行う場合は、Roche Restriction Enzyme Poster（またはRoche Applied Science Catalog）を参照して、所定の酵素の組合せに最適な緩衝液を選択してください。できる限り、ダブルダイジェスト（二重断片化）にはBuffer H（緩衝液H）を使用してください。
アプリケーション
Rapid DNA Ligation Kitは、例えば以下のことのために、粘着末端または平滑末端いずれかのDNA断片を共有結合します。
- プラスミドまたはファージベクターへのクローニング。
- プラスミドまたは他のDNAへのリンカー追加。
- 直鎖状DNAの再環状化。
特徴および利点
- 迅速：ライゲーションはわずか5分間しかかかりません。
- 簡便：ライゲーションは、+15℃～+25℃で実施します。
- 簡単：キットには、必要な緩衝液と酵素がすべて含まれています。
- 柔軟性： キットは、すべての一般的なライゲーション反応に使用できます。
- 信頼性： 手順がシンプルで試薬はすぐに使えるため、正確度（真度）と再現性を確保できます。
包装
3種のコンポーネントを含む1キット。
調製ノート
インキュベーション時間：5分間
ライゲーションされるDNAのモル比：標準的なライゲーション反応で、挿入DNAに対するベクターDNAのモル比は通常1：3です。しかし、適切と考えられる場合は、その他の比を使用する場合があります。例えば：
2本のDNAの長さが大きく異なる場合、1：1または1：2の比を検討します。
2本のDNAの末端が平滑な場合は、1：5の比を検討します。
ライゲーションされるDNAのモル比：標準的なライゲーション反応で、挿入DNAに対するベクターDNAのモル比は通常1：3です。しかし、適切と考えられる場合は、その他の比を使用する場合があります。例えば：
2本のDNAの長さが大きく異なる場合、1：1または1：2の比を検討します。
2本のDNAの末端が平滑な場合は、1：5の比を検討します。
その他情報
新しいRapid DNA Dephos & Ligation Kitには、Rapid DNA Ligation Kitのすべての試薬と当社の新しいrAPidアルカリホスファターゼが含まれています。
法的情報
High Pure is a registered trademark of Roche
キットの構成要素のみ
製品番号
詳細
- Dilution Buffer 5x concentrated
- T4 DNA Ligation Buffer 2x concentrated
- T4 DNA Ligase 5 U/μl
保管分類コード
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
引火点(°F)
does not flash
引火点(℃)
does not flash
試験成績書（COA）
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書（COA） を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
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プロトコル
平滑末端または粘着末端のいずれかを有するDNAを連結します。反応濃度によって、連結産物は環状または鎖状のいずれかになるため、形質転換の実験での直接使用に適しています。
Rapid DNA Ligation Kit Protocol
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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