DNALIG-RO

T4 DNAリガーゼ

solution, from Escherichia coli(NM 989), suitable for activity assay

• 別名: DNAリガーゼ、T4
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54
• Specific activity: ~3000 units/mg protein
• Biological source: Escherichia coli (NM 989)
• Recombinant: expressed in E. coli

特性

• biological source: Escherichia coli (NM 989)
• recombinant: expressed in E. coli
• description: recombinant form of the enzyme from T4 phage
• form: solution
• specific activity: ~3000 units/mg protein
• packaging: pkg of 100 U (10481220001 [1 U/μl]), pkg of 500 U (10716359001 [1 U/μl]), pkg of 500 U (10799009001 [5 U/μl])
• manufacturer/tradename: Roche
• parameter: 4-22 °C optimum reaction temp.
• technique(s): activity assay: suitable
• optimum pH: 7.2-7.8
• storage temp.: −20°C

詳細

General description

T4 DNAリガーゼは、二本鎖DNAの隣接する3′-ヒドロキシル末端と5′-リン酸末端の間で、ホスホジエステル結合の形成を触媒します。二本鎖DNA中の一本鎖のニックも、T4 DNAリガーゼによって連結されます。

内容
T4 DNAリガーゼ、ATPを含有する10倍濃度のライゲーションバッファーとともに提供します。

Application

粘着末端DNA断片および平滑末端DNA断片のライゲーション。

Biochem/physiol Actions

熱失活: 酵素を加熱 (65℃、10分間) すると不活性化されます。

Preparation Note

活性化因子: Mg²⁺ (10mM)、DTT
希釈標準溶液: 酵素の希釈には、保存用緩衝液の成分を含む緩衝液を使用することをロシュは推奨しています。20 mMトリス塩酸、60 mM KCl、1 mM EDTA、5 mM ジチオエリスリトール、50%グリセロール (v/v)、pH 7.5 (4℃)。

Analysis Note

品質

現行の品質管理手順に従い、デオキシリボヌクレアーゼおよびエキソヌクレアーゼが存在していないことを試験済みです。

Other Notes

T4 DNAリガーゼの1単位は、+37 °Cにおいて20分間に、1 nmolの³²Pを、ピロリン酸からNorit吸収性物質に変換する酵素活性量です。1単位は、エキソヌクレアーゼIII抵抗性アッセイで測定される0.2単位に相当します。希釈用緩衝液: 50 mMトリス塩酸、10 mMジチオエリトリトール、ウシ血清アルブミン、500μg/ml、pH 7.6 (+25℃)。

体積活性：1 x 10³ U/ml; 5 x 10³ U/ml

生命科学研究用途に限ります。診断措置において使用しないでください。

安全性情報

• 保管分類: 12 - Non Combustible Liquids
• 一体何が起きているの？: WGK 1
• 引火点 (F): does not flash
• 引火点（°C）: does not flash