Ioncserélő SPE-módszertan

Nem poláris mintamátrix/mozgófázis-környezet

Az ioncserélő SPE-módszerhez, hogy a szorbens és a minta között poláris retenció jöjjön létre, az analitot nem poláris minta- vagy mobilfázis-környezetben kell az SPE-berendezésbe juttatni. Ezért a normál fázisú SPE-ben alkalmazható tipikus mintamátrixok közé tartoznak a szerves oldószerrel hígított szénhidrogén vagy zsíros olajok, hexán, izooktán, klórozott oldószerek, THF, dietil-éter és etil-acetát.

A legtöbb szerves analit mutat bizonyos poláris funkcionalitást, amely kihasználható a normál fázisú elválasztáshoz. Mivel sok molekula mutat poláris funkcionalitást, az egyes kölcsönhatások különböző szintű szelektivitást biztosíthatnak, ami nagyon hasonló szerkezetű vegyületek nagymértékben szelektív elválasztását teszi lehetővé.

Normálfázisú SPE
Megmaradási mechanizmus:	Poláris kölcsönhatások Hidrogénkötés, π-π, dipól-dipól és indukált dipól-dipól
Mintamátrix:	Nem poláris minták Szilárd anyagok szerves kivonata Nagyon nem poláris oldószerek /li> zsíros olajok, szénhidrogének
Analit jellemzői:	Poláris funkcionalitásokat mutató analitok Hidroxilcsoportok, karbonylok, aminok, kettős kötések Heteroatomok (O, N, S, P) Rezonanciatulajdonságokkal rendelkező funkciós csoportok
Elválasztási séma:	Polárisabb oldószerrel vagy oldattal megbontott poláris kölcsönhatások Acetonitril, metanol, izopropanol Puffer/oldószer vagy oldószer/oldószer keverékek kombinációi
Gyakori alkalmazások:	Talajok és iszapok szerves kivonatainak tisztítása Kőolajszénhidrogének frakcionálása Frakcionálás /li> PCB-k transzformátorolajban Kozmetikumokban lévő vegyületek izolálása

Az alapvető lépések

1. Minta előkezelés A folyékony mintákat először nem poláros oldószerrel, például hexánnal vagy klórozott oldószerrel kell extrahálni vagy hígítani. A talaj-, üledék- és egyéb szilárd mintákat először nem poláris oldószerrel extraháljuk (Soxhlet vagy szonikáció), és SPE-tisztítás előtt koncentráljuk. A mintában lévő vizes maradványok csökkenthetik a normál fázisú visszatartást. Szükség lehet a szerves kivonat további szárítására nátrium-szulfáttal vagy magnézium-szulfáttal az SPE előtt.
   
   
2. Kondicionálás/egyensúlyozás Kondicionálás és egyensúlyozás 2-3 csőnyi, a minta előkezeléséből származó, a minta mátrixához hasonló vagy azzal azonos nem poláris oldószerrel.
   
   
   
3. Mintatöltés Vigye fel a mintát (az 1. lépésből) egyenletes és csökkentett áramlási sebességgel (~1-2 csepp/másodperc) az optimális visszatartás biztosítása érdekében. A vegyületeknek nem poláros oldószernek (pl. hexán) kell lenniük az optimális retenció érdekében. Vegye figyelembe, hogy a normál fázisú SPE-ben gyakran használnak elúciós oldószerként metanolt és acetonitrilt, és ezek gyakran nem segítik elő a vegyületek visszatartását a minta betöltése során.
   
   
4. Mosás A minta interferenciái gyakran a minta betöltése során együttesen visszatartódnak az érdeklődésre számot tartó vegyületekkel. A mosási lépés szükséges az interferenciák elúciójához anélkül, hogy az érdekes vegyületek idő előtti elúciója megtörténne. Normál fázisú SPE-nél a mosás során 1-2 csőtérfogatnyi oldószer használható a minta előkezeléséhez és kondicionálásához használt oldószerből.
   
   
   
5. Elúció A poláris kölcsönhatásokat egy olyan oldószerrel vagy oldószer/puffer keverékkel zavarja meg, amely polárisabb, mint a minta és a mosóoldatok. A tipikus elúciós oldószerek közé tartoznak a vízzel keverhető szerves oldószerek, mint például az aceton, acetonitril, metanol és izopropanol. Az egyre polárosabb oldószerekkel (vagy oldószer-keverékekkel) egymás után történő eluálás több vegyületosztály frakcionálását is lehetővé teszi. Segítségért lásd a "Gyakori normálfázisú oldószerek" táblázatot.
   
   
6. Eluátum utókezelés A normálfázisú SPE-t gyakran GC-analízis követi, ezért az injektálás előtt illékony mintamátrixot igényel. Használjon nátrium-szulfátot vagy magnéziummintát a maradék nedvesség eltávolításához. Az SPE eluátum további koncentrálása is szükséges lehet az elemzés előtt.

Gyakori normálfázisú oldószerek

lvent	Elutrop (e°) vagy elúciós erősség szilícium-dioxidon	Támogatja a normál fázisú visszatartást / elúciót
Hexán	0.00	Megmaradás
Isooktán	0.00
Szén-tetraklorid	0.14
Toluol	0.22
Benzol	0.27
Tert-butil-metil-éter	0.29
Kloroform	0.31
Metilén-klorid (diklórmetán)	0.32
Dietil-éter	0.29
Etilacetát	0.43
Tetrahidrofurán	0.35
Aceton	0.45
Acetonitril	0.50
40% metanol acetonitrilben	0.67
20% metanol dietil-éterben	0.65
20% metanol metilén-kloridban	0.63
Isopropanol	0.63
Metanol	0.73
Víz	>0.73	Elúció
Ecetsav	>0.73