COLLD-RO

胶原酶D

from Clostridium histolyticum

• EC 号: 3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
• 分類程式碼代碼: 12352204

属性

• 生物源: Clostridium histolyticum
• 品質等級: 100
• 無菌: non-sterile
• 形狀: lyophilized
• collagenase activity: >0.15 U/mg lyophilizate
• 包裝: pkg of 100 mg (11088858001); pkg of 2.5 g (11088882001); pkg of 500 mg (11088866001)
• 製造商／商標名: Roche
• 濃度: (working concentration: 0.5 - 2.5 mg/ml)
• 技術: tissue processing: suitable
• 顏色: light brown
• 最適pH: 6.0-8.0
• 溶解度: water: soluble
• NCBI登錄號: WP_171012037
• 應用: cell analysis
• 異物活動: Clostripain 0.060 U/mg; Proteases 8 U/mg ( Azocoll); Trypsin <0.2 U/mg (with BAEE)
• 儲存溫度: 2-8°C

说明

一般說明

胶原酶D是通过过滤、硫酸铵沉淀、透析和冻干而从溶组织梭菌的培养物中制备的。

特異性

胶原酶可降解天然胶原蛋白。梭菌蛋白酶、胰蛋白酶样酶和中性蛋白酶也会降解其他蛋白质。

應用

来自溶组织梭菌的胶原酶被广泛用于解聚多种类型的组织（如，肺、心脏、肌肉、骨骼、脂肪组织、肝脏、肾脏、软骨、乳腺、胎盘、血管、脑、肿瘤），以及用于建立原代细胞培养系统的单细胞悬浮液的制备。当细胞表面蛋白的功能性和完整性很重要时，推荐使用胶原酶D。来自Roche的
梭菌胶原酶已用于从多种类型的组织中进行细胞的制备，如肝细胞、脂肪细胞、胰岛、上皮细胞、肌肉细胞、内皮细胞等。然而，应根据经验确定每个批次的酶对破坏特定组织的适用性。

特點和優勢

内含物
冻干粉，未灭菌

單位定義

来自Roche的胶原酶以Wünsch单位（在+25°C下每分钟用Wünsch底物形成μmol的产物）进行测定。
通常，胶原酶活性是以Mandl单位（在+37℃下5小时内从胶原释放的1 μmol亮氨酸）给出的。
不幸的是，两个活性单位之间没有统一的转换因子，因为Mandl单位部分取决于胶原酶制剂中污染性蛋白酶的浓度，而这是一个不确定的变量。较纯的胶原酶制剂相对于粗制剂在Mandl单位中实际上具有更低的比活性。梭菌制剂通常具有约1:1800的转换因子（如某个特定批次的梭菌胶原酶所含有的约0.15 Wünsch U/mg和250 Mandl U/mg）。

外觀

冻干粉，未灭菌。

準備報告

激活剂：Ca²⁺
工作浓度：0.5 - 2.5mg/ml
储存条件（工作溶液）：-15至-25°C
Roche建议仅重悬需要立即使用的冻干粉的量。重新配制的溶液可以在-15至-25℃下储存长达一周。因为重新配制后活性降低了，所以要避免反复冻融。

抑制剂：
胶原酶抑制剂：EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-巯基乙醇
胶原酶不会被血清所抑制。
梭菌蛋白酶抑制剂：TLCK
胰蛋白酶抑制剂：抑肽酶，胰蛋白酶抑制剂（蛋清，大豆）

酶活：
胶原酶活性：>0.15 U/mg (基于Wünsch) (+25°C, 4-苯基-偶氮苄基-氧基羰基-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg作为底物)
污染性酶活：胰蛋白酶，梭菌蛋白酶和总蛋白水解活性
胶原酶D具有正常至高的胶原酶活性，以及非常低的胰蛋白酶活性（通常<0.2单位/mg，BAEE作为底物）。

重構

在任何平衡盐溶液中重悬（如HBSS）

儲存和穩定性

避光

其他說明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

安全信息

• 象形圖: GHS07,GHS08
• 訊號詞: Danger
• 危險聲明: H315 - H319 - H334 - H335
• 防範說明: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• 危險分類: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• 標靶器官: Respiratory system
• 儲存類別代碼: 11 - Combustible Solids
• 水污染物質分類（WGK）: WGK 1
• 閃點（°F）: does not flash
• 閃點（°C）: does not flash