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FLAG® Aufreinigung

Eine Nahaufnahme einer Laborumgebung. Der Fokus liegt auf einer blauen Pipette, aus der ein Tropfen in einen kleinen Glasbehälter gegeben wird, der teilweise mit einer rosafarbenen Flüssigkeit gefüllt ist. Der Hintergrund ist zwar verschwommen, lässt aber auf verschiedene andere Laborgeräte oder Behälter schließen.

FLAG® Tags ermöglichen einen hervorragenden Nachweis und eine robuste Aufreinigung rekombinanter Fusionsproteine und haben sich in zahlreichen Downstream-Anwendungen von Bindungs- und Aktivitätsassays bis hin zur Strukturanalyse bewährt. Das FLAG® Epitop-Tag ist ein kurzes, hydrophiles Peptid mit acht Aminosäuren (DYKDDDDK-Tag), das leicht durch Enterokinase (EK) gespalten werden kann. Aufgrund seiner geringen Größe und hydrophilen Beschaffenheit befindet sich das FLAG® Tag in der Regel auf der Oberfläche des Fusionsproteins, wodurch die Auswirkungen auf Funktion, Sekretion oder Transport des Fusionsproteins minimiert werden. Unabhängig von Ihrer Endanwendung verfügen wir über die erforderlichen Werkzeuge für die Expression, Aufreinigung und den Nachweis von FLAG® Fusionsproteinen. 

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Produktnummer
Produktbezeichnung
Produktbeschreibung
Preisangaben
F1804
Monoklonaler ANTI-FLAG® M2-Antikörper in Maus hergestellte Antikörper
1 mg/mL, clone M2, affinity isolated antibody, buffered aqueous solution (50% glycerol, 10 mM sodium phosphate, and 150 mM NaCl, pH 7.4)
A2220
ANTI-FLAG® M2-Affinitätsgel
purified immunoglobulin, buffered aqueous glycerol solution
M8823
Anti-FLAG® M2 Magnetperlen
affinity isolated antibody
F3165
Monoklonaler ANTI-FLAG® M2-Antikörper in Maus hergestellte Antikörper
clone M2, purified immunoglobulin (Purified IgG1 subclass), buffered aqueous solution (10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH 7.4, containing 0.02% sodium azide)
F4799
3xFLAG™ Peptide
≥90% (HPLC/MS), lyophilized powder
A8592
Monoklonale ANTI-FLAG® M2-Peroxidase (HRP) in Maus hergestellte Antikörper
clone M2, purified immunoglobulin, buffered aqueous glycerol solution
F7425
ANTI-FLAG® in Kaninchen hergestellte Antikörper
affinity isolated antibody, buffered aqueous solution
F3290
FLAG® Peptide
≥85% (HPLC), lyophilized powder
F4049
Monoklonales ANTI-FLAG®-M2-FITC in Maus hergestellte Antikörper
clone M2, purified immunoglobulin, buffered aqueous solution
F2426
EZview™ Red ANTI-FLAG® M2-Affinitätsgel
clone M2
A4596
Affinitätsgel ANTI-FLAG® M1 Agarose
F9291
Monoklonaler ANTI-FLAG® BioM2 in Maus hergestellte Antikörper
clone M2, purified immunoglobulin, buffered aqueous glycerol solution
B3111
ANTI-FLAG® M2 antibody, Mouse monoclonal
Clone M2, purified from hybridoma cell culture in bioreactor
F3040
Monoklonaler ANTI-FLAG® M1 in Maus hergestellte Antikörper
clone M1, purified immunoglobulin, buffered aqueous solution
FLAGIPT1
FLAG® Immunoprecipitation Kit
P2983
Monoklonaler ANTI-FLAG® M2-Antikörper in Maus hergestellte Antikörper
96-well, clear, polystyrene, flat bottom plate
F2555
Monoklonaler ANTI-FLAG-Antikörper®
clone SIG1-25, ascites fluid
P7582
Amino-terminal FLAG-BAP™ Fusion Protein
SAB4200071
ANTI-FLAG® antibody, Rat monoclonal
clone 6F7, purified from hybridoma cell culture
CELLMM2
FLAG® M Purification Kit
For Mammalian expression systems.
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Eine grafische Darstellung mit einem Muster aus miteinander verbundenen violetten Kreisen und Linien auf gelbem Hintergrund. Der Aufbau ähnelt einer vereinfachten Molekülstruktur oder einem Netzwerkdiagramm und weist auf Themen der Vernetzung oder Beziehungen hin.

FLAG® Tag Proteinexpression

Unser FLAG® Tag Portfolio für die Proteinexpression umfasst Vektoren für die effiziente Expression rekombinanter Fusionsproteine in bakteriellen und Säugersystemen. Die SnapFast™ Vektortechnologie ermöglicht es Ihnen, das gewünschte Gen einfach von einem Vektor in einen anderen zu verschieben, um die Klonierung effizienter und kostengünstiger zu gestalten.

  • Das Standard FLAG® Peptid (Sequenz: DYKDDDDK) ist ein kleines Tag, das mit minimalem Risiko einer sterischen Hinderung oder einer negativen Auswirkung auf die Proteinlöslichkeit eingebaut werden kann
  • Die 3xFLAG® Tag-Sequenz fusioniert drei Tandem-FLAG® Epitope zum verbesserten (bis zu 200X) Nachweis von Fusionsproteinen
Ein violettes Quadrat mit abgerundeten Ecken in der Mitte auf einem kräftig-gelben Hintergrund. Im Quadrat befindet sich eine symmetrische Darstellung mit drei horizontalen Pfeilen: einer oben, der nach links und rechts zeigt, einer in der Mitte, der von der Mitte aus nach beiden Seiten zeigt, und einer unten, der den oberen Pfeil spiegelt. Eine senkrechte Linie verläuft vom oberen zum unteren Pfeil durch deren Symmetriepunkte. Um diese Pfeile herum sind geometrische Formen verteilt: Kreise und Rauten oder Rhomben.

FLAG® Tag Proteinaufreinigung

Wir bieten eine Vielzahl von Agarose-Affinitäts-Aufreinigungsgelen, magnetische Beads, Aufreinigungskits und beschichtete Platten für die Isolierung und Aufreinigung von FLAG® markierten Proteinen.

  • Agarose-Affinitätsgele ermöglichen die Aufreinigung von mit Fusionsmarkierungen versehenen Proteinen unter Verwendung von anti-FLAG® Antikörpern, die mit Agarose-Beads vernetzt sind, und eignen sich für die Aufreinigung in kleinem bis großem Maßstab. Diese Harze können darüber hinaus für die Aufreinigung in Schwerkraftflusssäulen eingesetzt werden.
  • Anti-FLAG® M2 Magnetische Beads werden zur Aufreinigung rekombinanter fusionsmarkierter Proteine verwendet, wobei ein magnetisches Gestell oder eine Plattform zur Trennung der Beads und zur Isolierung des Proteins für eine schnelle Verarbeitung verwendet wird.
  • Anti-FLAG® High Sensitivity M2-beschichtete 96-Well-Platten eignen sich für das Expressionsscreening, die Untersuchung von Protein-Protein-Interaktionen und ELISA-Assays.
Violette Strichzeichnung auf gelbem Hintergrund, die einer abstrakten Darstellung des Buchstabens „K“ ähnelt. Das Design ist einfach mit klaren Linien und ohne zusätzliche Verzierungen oder Texturen.

FLAG® Tag Nachweis

FLAG® und 3xFLAG™ Tags enthalten Bindungsstellen für hochspezifische monoklonale Anti-FLAG® Antikörper sowie polyklonale Antikörper und Konjugate für ELISA, Blotting-Anwendungen, Immunfluoreszenz, Immunzytochemie, Immunhistochemie (IHC), Blotting und Durchflusszytometrie.

  • Durch den M2 anti-FLAG® Antikörper werden N-Terminus FLAG®, C-Terminus FLAG® und Met-FLAG® Fusionsproteine gebunden.
  • Die Bindung des M1 anti-FLAG® Antikörpers ist kalziumabhängig und spezifisch für den N-Terminus des FLAG® Tags.
  • Durch den M5 anti-FLAG® Antikörper werden N-Terminus FLAG® und Met-FLAG® Fusionsproteine gebunden.
 Monoklonaler anti-FLAG® M1 Maus-AntikörperMonoklonaler anti-FLAG® M2
Maus-Antikörper		Monoklonaler anti-FLAG® M5 Maus-Antikörper
BestellnummerF3040F1804F3165F4042
KlonM1M2M2M5
ImmunogensequenzDYKDDDDKDYKDDDDKDYKDDDDKDYKDDDDK
Methode zur AntikörperaufreinigungGereinigt auf Protein-A-SepharoseGereinigt auf proprietärer FLAG® PeptidagaroseGereinigt auf Protein-A-SepharoseGereinigt auf Protein-A-Sepharose
KD53,4 nM9,3 nM9,3 nMNicht verfügbar
SpezifitätHochspezifisch. Erkennt nur das FLAG® Epitop, wenn es sich am freien N-Terminus befindet.Erkennt die FLAG® Sequenz am N-Terminus, Met-N-Terminus,
C-Terminus oder an einer beliebigen internen Stelle des FLAG® Fusionsproteins.		Starke Erkennung des Met-N FLAG® Fusionsproteins. Schwache Bindung an N- oder C-terminales Fusionsprotein.
SensitivitätNachweis von 1 ng FLAG-BAP™ Fusionsprotein auf einem Dot BlotNachweis von 2 ng Protein auf einem Dot BlotNachweis von < 1 ng Met-FLAG® Fusionsprotein auf einem Dot Blot
Empfohlen für:Empfohlen für den Nachweis von FLAG® Fusionsproteinen in Säuger-, Pflanzen- und bakteriellen Expressionssystemen. Sehr nützlich für die Affinitätsaufreinigung. Nicht empfohlen für den Nachweis von zytoplasmatisch exprimierten Proteinen.Western-Blot-Nachweis von Zielproteinen, die in E. coli,
Pflanzen- oder rohem Säugerzelllysat
exprimiert werden.		Western-Blot-Nachweis von Zielproteinen, die auf Säuger- und Drosophila-Zelllysat exprimiert werden. Besonders nützlich für den Nachweis von zytoplasmatisch exprimierten Met-FLAG-Fusionsproteinen. Nicht empfohlen für den Nachweis von in E. coli exprimierten Fusionsproteinen
Anwendungen*IP, IC, WB, EIAIP, IC, WB, EIAIP, IC, WB, EIAWB
Spezielle AnforderungenFür die Bindung ist Kalzium erforderlich. (Der Komplex dissoziiert in Abwesenheit von Kalzium-Ionen)N/AN/AN/A
*IP = Immunpräzipitation; IC = Immunchemie, WB = Western Blot, EIA = Enzymgekoppelter Immunabsorptionsassay (ELISA)

Antikörper- & Bindungseigenschaften

ANTI-FLAG M1

Maus
IgG2b MAb

ANTI-FLAG M2

Maus
IgG1 MAb

ANTI-FLAG
M5

Maus
IgG1 MAb

Unverarbeitetes N-terminales FLAG-Fusionsprotein:
Signalpeptid - FLAG - Protein		-+Nicht nachgewiesen
Met-N-terminales FLAG-Fusionsprotein:
Met - FLAG - Protein		-+++
N-terminales FLAG-Fusionsprotein:
FLAG - Protein		++Schwach
Internes FLAG-Peptid:
Protein - FLAG - Protein		-+Nicht nachgewiesen
C-terminales FLAG-Fusionsprotein:
Protein - FLAG		-+Schwach
Kalzium-abhängige Bindung
(Komplex wird in EDTA-haltigem Puffer dissoziiert)		+--

Weitere Informationsquellen

  • Brochure: Refine Protein Preparation

    Today, researchers are challenged to create high quality samples for meaningful protein analysis, often using cumbersome traditional sample preparation methods. With over 50 years of experience in developing protein sample preparation technologies, Merck is constantly innovating new tools to offer you rapid and efficient solutions that can be smoothly integrated into your workflow.

  • User Guide: FLAG - Proven System for Detection and Purification of Proteins

    The FLAG Expression System is an established way to express, purify, and detect recombinant fusion proteins. FLAG and 3×FLAG® have proven utility in numerous applications such as Western blotting, immunocytochemistry, immunoprecipitation, flow cytometry, protein purification, and in the study of protein-protein interactions, cell ultrastructure, and protein localization. These small hydrophilic tags facilitate superior detection and purification of recombinant fusion proteins when using our highly specific and sensitive ANTI-FLAG® antibodies.

  • Application Note: EZview™ Red Protein A and ANTI-FLAG® M2 Affinity Gels - Immunoprecipitation with Enhanced Visibility Affinity Beads

    The strength and specificity of interactions between biomolecules have been exploited for years in biochemical research. Affinity-based protein purification techniques have been used extensively to isolate and purify specific proteins or classes of proteins from complex biochemical mixtures, such as cell lysates..

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