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F3165

Monoklonaler ANTI-FLAG® M2-Antikörper in Maus hergestellte Antikörper

clone M2, purified immunoglobulin (Purified IgG1 subclass), buffered aqueous solution (10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH 7.4, containing 0.02% sodium azide)

ANTI-FLAG® M2 antibody, Mouse monoclonal

Synonym(e):

Anti-ddddk, Anti-dykddddk

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Über diesen Artikel

NACRES:
NA.32
UNSPSC Code:
12352203
Conjugate:
unconjugated
Clone:
M2, monoclonal
Application:
WB
Citations:
8404

540,00 €


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biological source

mouse

Quality Segment

conjugate

unconjugated

antibody form

purified immunoglobulin (Purified IgG1 subclass)

antibody product type

primary antibodies

clone

M2, monoclonal

form

buffered aqueous solution (10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH 7.4, containing 0.02% sodium azide)

purified by

using Protein A

species reactivity

all

concentration

3.8-4.2 mg/mL

technique(s)

western blot: 10 μg/mL (Protein A)

isotype

IgG1

immunogen sequence

DYKDDDDK

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

General description

Der Antikörper Anti-Flag M2 wird für den Nachweis von Flag-Fusionsproteinen verwendet. Dieser monoklonale Antikörper wird in der Maus produziert und erkennt die FLAG-Sequenz am N-Terminus, Met-N-Terminus und C-Terminus. Der Antikörper kann FLAG auch an internen Stellen erkennen. M2 ist im Gegensatz zum M1-Antikörper nicht calciumabhängig.
F3165 wird mit Protein-A-Harz affinitätsgereinigt, sodass er nicht nur den Anti-FLAG-M2-Antikörper, sondern auch geringe Mengen an nativem Maus-IgG enthält, was seine Empfindlichkeit bei den meisten Anwendungen erhöht.
Verfahren zur Aufreinigung: Protein A

Immunogen

FLAG; Peptid-Sequenz DYKDDDDK

Application

Der monoklonale ANTI-FLAG® M2-Antikörper der Maus wurde in folgenden Anwendungen eingesetzt:
  • Immunblotting
  • Immunpräzipitation
  • Immunzytochemie
  • Immunfluoreszenz
  • ELISA
  • EIA
  • Chromatin-Immunpräzipitation
  • Elektronenmikroskopie
  • Durchflusszytometrie
  • Supershift-Assays

Weiterführende Literatur zur Anwendung finden Sie in unserem FLAG® Literatur-Portal.

Preparation Note

Den unverdünnten Antikörper in Arbeitsaliquoten bei –20 °C aufbewahren. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen wird nicht empfohlen.
Hinweis: Mit der Zeit können kleine Mengen aufgereinigter Antikörper aufgrund intermolekularer hydrophober Wechselwirkungen aus der Lösung präzipitieren. Wenn bei diesem Produkt ein Präzipitat beobachtet wird, das Fläschchen kurz zentrifugieren, um das Präzipitat zu pelletieren. Das gewünschte Volumen Antikörperlösung aus dem klaren Überstand entnehmen. Die Leistung des aufgereinigten Antikörpers sollte dadurch in Western Blots oder Immunpräzipitationsanwendungen nicht verändert werden.
Die Antikörperlösung aus 0,5-10 μg/ml in Tris-gepufferter Kochsalzlösung, pH 8,0, mit 3%iger fettfreier Milch verdünnen

Legal Information

ANTI-FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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clone

M2, monoclonal

clone

M2, monoclonal

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M2, monoclonal

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M2, monoclonal

conjugate

unconjugated

conjugate

unconjugated

conjugate

-

conjugate

agarose conjugate

antibody form

purified immunoglobulin (Purified IgG1 subclass)

antibody form

affinity isolated antibody

antibody form

-

antibody form

purified immunoglobulin

species reactivity

all

species reactivity

all

species reactivity

-

species reactivity

-

biological source

mouse

biological source

mouse

biological source

-

biological source

-

form

buffered aqueous solution (10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH 7.4, containing 0.02% sodium azide)

form

buffered aqueous solution (50% glycerol, 10 mM sodium phosphate, and 150 mM NaCl, pH 7.4)

form

-

form

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Fragen

1-7 von 7 Fragen  
  1. What is the recommended short-term storage condition for FLAG M2 antibody — is 4°C acceptable?

    1 Antwort
    1. To enhance stability & functional consistency, store the undiluted antibody at −20 °C in working aliquots. Repeated freezing and thawing is not recommended.

      Hilfreich?

  2. What is the recommended dilution for immunocytochemistry for this product ?

    1 Antwort
    1. This product has not been validated for immunocytochemistry applications.

      Hilfreich?

  3. Is there a recommended dilution for capture (sandwich) based ELISA?

    1 Antwort
    1. Monoclonal ANTI-FLAG® M2 may be used in EIA procedures. Typically, a fusion protein containing a FLAG® peptide sequence is directly adsorbed (or otherwise presented) within the wells of a multiwell polystyrene plate. The Monoclonal ANTI-FLAG® M2 antibody may be diluted up to 1:50,000 for subsequent incubation within the plate wells. Detection may be accomplished using Anti-Mouse IgG-Peroxidase (Cat. No. A9044) or equivalent, diluted 1:10,000, followed by an appropriate substrate for visualization.

      Dilutions for use as the capture antibody in an ELISA have not been evaluated. We would recommend that the end-user optimize the protocol following the recommendations found here:
      https://www.sigmaaldrich.com/technical-documents/protocol/protein-biology/elisa/elisa-procedures#antigen_coating

      Hilfreich?

  4. What is the recommended dilution for conducting western blotting using this antibody?

    1 Antwort
    1. The recommended dilution for Western Blot is 10 µg/mL. Please see the link below to review additional information, including protocols:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/274/912/f3165dat-ms.pdf

      Hilfreich?

  5. What is the difference between F1804 and F3165 product?

    1 Antwort
    1. Product F1804 and F3165 are both Monoclonal ANTI-FLAG M2 antibodies produced in mouse Clone M2, with the same starting material. The distinction between the products lies in their purification methods. F3165 is immunoglobulin purified, while F1804 is immunogen affinity purified. F1804, being more purified, is expected to exhibit reduced background and less non-specific staining compared to F3165. Both products are suitable for western blotting, immunofluorescence, and immunoprecipitation.

      Hilfreich?

  6. What is the recommended dilution for conducting immunoprecipitation (IP) using the M2 antibody?

    1 Antwort
    1. The general starting recommendation for conducting immunoprecipitation (IP) using the F3165, anti-FLAG M2 antibody, is 10 μg/mL.

      Hilfreich?

  7. What type of light chain is present on the FLAG M2 antibody?

    1 Antwort
    1. Test has not been conducted to determine whether the light chains of the antibody F3165, Monoclonal ANTI-FLAG® M2 antibody produced in mouse, are kappa or lambda. However, based on customer feedback, it appears that the M2 monoclonal antibody has lambda light chains and not kappa. A probe with anti-kappa did not yield a signal, while anti-lambda produced a good signal.

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  1. New Jersey
    • Bewertung 1
    • Stimmen 15
    5 von 5 Sternen.

    Great Anti Flag primary

    Works well for our western blot analysis of flag tagged recombinant proteins

    Mit Google übersetzen

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