For assay purposes, this product is reconstituted at 0.02 - 0.04 u/mL in water containing 0.2% bovine serum albumin (BSA). The enzyme may also be prepared as follows:
Water containing 0.2% BSA at 2 mg/mL yielding a clear tan or brown solution
10 mM phosphate buffer, pH 6, containing 25 to 150 mM KCl at 120ug/mL. This stock solution may be stored refrigerated for several months.
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N2876
Neuraminidase aus Clostridium perfringens (C. welchii)
Suitable for manufacturing of diagnostic kits and reagents, Type V, lyophilized powder
Synonym(e):
Acyl-neuraminyl-Hydrolase, Receptor-destroying enzyme, Sialidase
Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise
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Empfohlene Produkte
Qualitätsniveau
Typ
Type V
Form
lyophilized powder
Spezifische Aktivität
≥0.1 units/mg solid (using mucin)
≥1.3 units/mg solid (using 4MU-NANA)
Anwendung(en)
diagnostic assay manufacturing
Fremdaktivität
Protease and NAN-aldolase, present
Versandbedingung
dry ice
Lagertemp.
−20°C
Angaben zum Gen
Clostridium perfringens str. 13 ... nanI(988807)
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Allgemeine Beschreibung
Neuraminidaseenzyme sind Hydrolaseenzyme, die die Freisetzung des Influenzavirus aus infizierten Zellen und somit die Verbreitung des Virus fördern.
Anwendung
Neuraminidase aus Clostridium perfringens wurde in einer Studie zur Untersuchung der Bindung an humane T-Lymphozyten in mit Neuramidase vorbehandelten Schafen eingesetzt. [1] Sie wurde auch in einer Studie zur Untersuchung der Wirkung von Gallensalzen auf die Wirksamkeit der Hydrolyse durch Neuramidase eingesetzt. [2]
Biochem./physiol. Wirkung
Die Spaltung von Sialinsäurerückständen mittels Neuraminidase wurde verwendet, um das Erkennen von Antikörpern von Glycoproteinstrukturen zu untersuchen. Die Verwendung von Neuraminidase für die Schätzung von N-Acetylneuraminsäure war im Vergleich zu zwei anderen Methoden von vorteilhafter.
Die Verwendung von Neuraminidase zum Entfernen von Sialinsäurerückständen aus Glycoproteinen auf Zelloberflächen wird häufig berichtet. Für Verfahren wird in der Regel eine Anwendung von Neuraminidase in PBS bei 37 °C über 30 Minuten mit mehreren anschließenden Reinigungsvorgängen mit PBS angegeben. Die Behandlung von Gewebeschnitten mit Neuraminidase in viel geringeren Konzentrationen erfordert eine längere Inkubation: bei 1–4 U/ml in 0,1 M Acetatpuffer pH 4,2–5, 2 bis 20 Stunden bei 37 °C.
Neuramidase kann die Aggregation in bestimmten Zelllinien steigern, indem sie an der Zelloberfläche exponierte negativ geladene Sialinsäurereste entfernt. [3]
Neuraminidasen werden verwendet, um terminale N-Acetyl-Neuraminsäure (Sialinsäure) von vielen Glycoproteinen zu spalten. Das Enzym von Clostridium perfringens spaltet terminale Sialinsäurerückstände, die α-2,3- α-2,6- oder α-2,8-gebunden an Gal, GlcNac, GalNAc, AcNeu, GlcNeu, Oligosaccharide, Glycolipide, oder Glycoproteine sind. Die relative Spaltungsrate nimmt in dieser Reihenfolge ab: α-2-3 > α-2-6 α-2-8 Neuraminidase aus C. perfringens spaltet am effizientesten α-2-3-gebundene Sialinsäurerückstände im Vergleich zu A. ureafaciens, (Sigma N3642), das vorzugsweise α-2-6-gebundene Rückstände spaltet.
Einheitendefinition
Eine Einheit setzt je Minute bei einem pH-Wert von 5,0 und 37 °C unter Verwendung von submaxillärem Mucin von Rindern 1,0 Mikromol N-Acetylneuraminsäure frei.
Eine Einheit hydrolysiert je Minute bei einem pH-Wert von 5,0 und 37 °C 1,0 Mikromol 2′-(4-Methylumbelliferyl)-α-D-N-acetylnumeraminsäure (unter Verwendung von 4MU-NANA als Substrat).
Eine Einheit hydrolysiert je Minute bei einem pH-Wert von 5,0 und 37 °C 1,0 Mikromol 2′-(4-Methylumbelliferyl)-α-D-N-acetylnumeraminsäure (unter Verwendung von 4MU-NANA als Substrat).
Angaben zur Herstellung
Hergestellt durch Salzfraktionierung.
Hinweis zur Analyse
Packungsgrößen basieren auf den 4MU-NANA-Einheiten
Signalwort
Danger
H-Sätze
P-Sätze
Gefahreneinstufungen
Resp. Sens. 1
Lagerklassenschlüssel
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
Flammpunkt (°F)
Not applicable
Flammpunkt (°C)
Not applicable
Persönliche Schutzausrüstung
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
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See the link below to review the gene information of Clostridium perfringens str. 13 nanI(988807) on NCBI:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/988807The specific sequence of the orgnism use in the production of this product is considered proprietary.
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The recommendation is to dissolve in water containing 0.2% BSA (albumin) at 2 mg/mL. This will yield a clear tan or brown solution. Neuraminidase is a comparatively stable enzyme in solution. When dissolved at 120 µg/mL in 10 mM phosphate buffer, pH 6, containing 25 to 150 mM KCl, the enzyme retained activity at 0-4 C for over 30 months. At a concentration of 2 µg/mL under the same conditions, activity was lost unless albumin (BSA) was added.
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