Kultura hematopoetických kmenových a imunitních buněk
- Kmenové buňky krvetvorby
- Lidské monocyty
- Lidské mononukleární buňky (PBMCs)
- Lidské makrofágy
- Humánní dendritické buňky
- Člověčí makrofágní buňky (makrofágní buňky)Stromální buňky pro diferenciaci T-buněk
Kmenové buňky krvetvorby (HSC) dávají vzniknout všem typům krevních buněk včetně myeloidní a lymfoidní linie. Mezi myeloidní buňky patří monocyty, makrofágy, neutrofily, bazofily, eozinofily, erytrocyty, dendritické buňky a megakaryocyty nebo krevní destičky. Mezi lymfoidní buňky patří T-lymfocyty, B-lymfocyty a přirozené zabíječe. HSC se nacházejí v kostní dřeni dospělých, pupečníkové krvi, placentě a mobilizované periferní krvi. Nedávné pokroky v biologii krvetvorných kmenových buněk vedly k využití transplantací HSC při léčbě rakoviny a dalších poruch imunitního systému. Nabízíme širokou škálu nástrojů, buněk a optimalizovaných bezsérových expanzních médií pro kultivaci CD34+ lidských hematopoetických kmenových buněk a dalších typů lidských imunitních buněk včetně CD14+ monocytů, mononukleárních buněk (PBMC), makrofágů, dendritických buněk a T-buněčných lymfocytů.
Obrázek 1. Fáze krvetvorby.V procesu krvetvorby jsou všechny buněčné složky krve odvozeny z krvetvorných kmenových buněk.
Kmenové buňky krvetvorby
CD34+ Kmenové buňky krvetvorby
CD34 je marker lidských kmenových buněk krvetvorby. Veškerá kolonie tvořící aktivita buněk lidské kostní dřeně (KD) se nachází ve frakci CD34+ progenitorových buněk. Klinické transplantační studie, které používaly obohacené CD34+ buňky BM, ukázaly, že v této frakci jsou přítomny HSC s dlouhodobou schopností rekonstituce BM. Nabízíme kryokonzervované CD34+ hematopoetické progenitorové buňky izolované z pupečníkové krve zdravých lidských dárců. CD34+ progenitorové buňky obsahují dvě hlavní buněčné subpopulace, krvetvorné a endoteliální progenitorové buňky. Proto jsou CD34+ progenitorové buňky vhodné pro řadu studií včetně cílené diferenciace na více typů krevních buněk a endoteliálních linií.
Obrázek 2.Morfologie a charakterizace lidských CD34+ hematopoetických progenitorových buněk pomocí průtokové cytometrie.
| Popis produktu | Číslo dílu |
|---|---|
| Popis produktu Lidské CD34+ progenitorové buňky (hCD34+-CB), 100 000 buněk/vialku (PromoCell) | C-12921 |
Média pro hematopoetické kmenové buňky
HSC jsou schopny expandovat in vivo do velkého množství díky své výrazné schopnosti sebeobnovy. Ke studiu proliferace a diferenciačního vzorce hematopoetických progenitorů podle jejich schopnosti tvořit kolonie v polotuhém agarovém médiu se používá test in vitro na jednotky tvořící kolonie (CFU). Výzkumníci se však během in vitro expanze nediferencovaných HSC potýkají s obtížemi, přičemž během expanzní fáze v tradičních kultivačních systémech obsahujících sérum je pozorována rostoucí diferenciace buněk.
Expanzní médium pro hematopoetické progenitorové buňky (HPC) DXF bylo navrženo pro maximální expanzi primitivních HPC v plně definovaném kultivačním prostředí bez xenonů. Díky využití výhradně syntetických, rekombinantních nebo rostlinných materiálů je toto médium definované a neobsahuje žádné složky živočišného původu.
Upozornění k použití: In Vitro Expanze CD34+/CD38- lidských hematopoetických progenitorových buněk v bezsérovém a bezxenovém médiu pro kultivaci kmenových buněk.
Představovaný produkt
Stemline® II Hematopoetic Stem Cell Media
Vyvinuto pro podporu optimální expanze lidských hematopoetických kmenových buněk (HSC) z kostní dřeně, mobilizované periferní krve a pupečníkové krve, Stemline® Hematopoietic Stem Cell Expansion Medium (S0192) vykazuje vyšší násobné zvýšení celkového počtu nukleovaných buněk (TNC) než jiné komerčně dostupné přípravky médií bez séra.
Vlastnosti a výhody
- Složení bez séra
- Zvýšená expanze z CD34+ buněk pupečníkové krve
- Expanduje buňky ze všech příslušných hematopoetických linií v jednotce tvořící kolonie.
- Důkladně testováno v 7denních a 14denních růstových testech.
- Vyrábí se v nejmodernějším zařízení GMP s dostupným hlavním souborem zařízení (DMF).
Obrázek 2. Stemline® vykazuje vynikající expanzi hematopoetických kmenových buněk (HSC) kostní dřeně.CD34+ HSCs byly nasazeny do jamek 24jamkových destiček pro tkáňové kultury. Do každé jamky byl přidán jeden mililitr média s příslušnými cytokiny pro stimulaci růstu (po 100ng/ml TPO, SCF a G-CSF). Každá podmínka byla provedena ve třech opakováních a do každé jamky bylo nasazeno 10 000 buněk na ml. Buňky byly spočítány 14. den a násobný nárůst byl stanoven podle poměru konečné buňky/počáteční buňky. HSC z kostní dřeně kultivované v médiích Stemline® a Stemline® II vykazovaly lepší expanzi než HSC kultivované v jiných médiích bez séra.
Hematopoetické cytokiny a růstové faktory
Na regulaci krvetvorby se podílí řada imunitních cytokinů v rámci komplexní sítě pozitivních a negativních regulátorů. Některé cytokiny mají velmi úzkou liniovou specifičnost svého působení, zatímco mnohé jiné mají poměrně široké a překrývající se rozsahy specifičnosti. V rámci tohoto oddílu jsou uvedeny cytokiny a růstové faktory, jejichž působení zřejmě spočívá ve stimulaci nebo regulaci vývoje krvetvorných kmenových buněk:
Markery krvetvorných kmenových buněk
AdeRed™ ALDH Detection Assay
Kmenové buňky krvetvorby exprimují zvýšené hladiny aldehyddehydrogenázy (ALDH). Aktivita ALDH se používá jako marker kvality transplantátů krvetvorných kmenových buněk. Historicky se hladiny ALDH měřily pomocí barviv propustných pro živé buňky, která emitují v zelené oblasti elektromagnetického spektra (512 nm). Toto činidlo tedy nelze současně použít u buněk nebo myší exprimujících zeleně fluoreskující proteiny emitující v zelené oblasti fluorescenčního spektra. AldeRed™ ALDH Detection Assay je fluorescenční substrát pro ALDH s červeným posunem, který se používá ke značení životaschopných ALDH pozitivních HSC a ponechává zelený emisní kanál k dispozici pro další experimenty.
Lidské monocyty
Monocyty jsou nezralé fagocytující buňky cirkulující v krvi. Působí jako antigen prezentující imunitní buňky a mohou fagocytovat a rozkládat mikroby a pevné částice. Naše primární lidské monocyty CD14+ jsou izolovány z čerstvé periferní krve jednoho zdravého dárce. Po izolaci ultračisté frakce mononukleárních buněk patentovanými metodami jsou monocyty CD14+ izolovány pozitivní selekcí s čistotou 95 %. Monocyte Attachment Medium umožňuje účinnou adherenční selekci monocytů z čerstvě izolovaných lidských mononukleárních buněk při zachování optimálního zdraví buněk.
Network error: Failed to fetch
Lidské mononukleární buňky (PBMCs)
Mononukleární buňky, včetně mononukleárních buněk periferní krve (PBMCs), představují lymfocytární a monocytární frakci izolovanou z pupečníkové nebo periferní krve. Připravují se optimalizovanou centrifugací s gradientem nízké hustoty, která účinně snižuje obsah granulocytů. Červené krvinky jsou šetrně, ale důkladně vyčerpány patentovanými technikami namísto osmotické lýzy. Výsledkem jsou ultračisté mononukleární buňky s vynikající životaschopností a nezměněnou biologickou funkcí. PBMC lze použít přímo pro experimenty nebo jako výchozí materiál pro izolaci několika typů buněk, např. hematopoetických a endoteliálních progenitorů, monocytů a subpopulací lymfocytů.
Network error: Failed to fetch
Lidské makrofágy
Makrofágy jsou profesionální fagocyty a buňky prezentující antigen (APC), které se diferencují z cirkulujících monocytů periferní krve do fenotypů M1 nebo M2. Médium pro generování makrofágů bylo vyvinuto pro efektivní generování makrofágů odvozených od monocytů (MDM) z čerstvě izolovaných lidských monocytů periferní krve nebo přímo z PBMC jako výchozího materiálu. Médium DXF pro tvorbu M1-makrofágů obsahuje GM-CSF a umožňuje tvorbu makrofágů s polarizací M1. M2-Macrophage Generation Medium DXF obsahuje M-CSF a umožňuje generovat makrofágy polarizované jako M2. Obě média DXF pro tvorbu makrofágů jsou definované a bez xenoformulky a používají výhradně syntetické, rekombinantní nebo rostlinné materiály, toto médium neobsahuje žádné složky živočišného původu.
Aplikační poznámka: In Vitro Diferenciace lidských monocytů odvozených z PBMC na makrofágy M1 nebo M2 v bezsérových a bezxenových kultivačních médiích.
Network error: Failed to fetch
Lidské dendritické buňky
Dendritické buňky jsou vysoce pohyblivé imunitní buňky a jsou nejvýkonnějšími buňkami prezentujícími antigen (APC) imunitního systému savců. Dendritické buňky jsou jedinými antigen prezentujícími buňkami schopnými stimulovat naivní T-buňky, a proto mají klíčový význam při vytváření adaptivní imunity. Médium pro tvorbu dendritických buněk (DC) bylo vyvinuto pro snadnou a účinnou tvorbu nezralých i plně zralých myeloidních dendritických buněk z monocytů periferní krve. DC Generation Medium je definovaný a xeno-free přípravek pro použití s čerstvě izolovanými buňkami. Díky využití výhradně syntetických, rekombinantních nebo rostlinných materiálů neobsahuje toto médium žádné složky živočišného původu.
Network error: Failed to fetch
Stromální buňky pro diferenciaci T-buněk
T-lymfocyty se vyvíjejí v thymu z hematopoetických kmenových (HSC) a progenitorových buněk (HSPC) odvozených z kostní dřeně. In vitro byly použity různé modelové systémy k napodobení funkce thymu podporující vývoj T-buněk. Nedávno byl vyvinut nový systém umělého tymického organoidu (ATO) bez použití séra, který podporuje vysoce účinnou a reprodukovatelnou diferenciaci a pozitivní selekci lidských T-buněk in vitro z více zdrojů HSPC, včetně pupečníkové krve, kostní dřeně a CD34+ HSPC z periferní krve. Klíčovou složkou systému ATO je buněčná linie MS5-DLL1, která eliminuje potřebu primárních thymických tkání. Pro vytvoření organoidů se stromální buňky MS5-DLL1 shlukují s HSPC centrifugací a kultivují na Millicell® vložka pro kultivaci buněk v definovaném médiu bez séra.
Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet.
Nemáte účet?Toto je strojově přeložená stránka.
