Myší embryonální fibroblasty (MEF Feeder Cells)

Mnoho protokolů pro kultivaci embryonálních kmenových buněk (ES) je založeno na použití monovrstvy primárních myších embryonálních fibroblastů (MEF feeder cells). Buňky MEF plní v kultuře kmenových buněk dvě důležité role: vylučují do média několik důležitých růstových faktorů, které pomáhají udržovat pluripotenci, a poskytují buněčnou matrici pro růst buněk ES. Řada myších napájecích buněk PMEF EmbryoMax™ poskytuje výzkumným pracovníkům pohodlné řešení pro kultivaci ES buněk tím, že eliminuje potřebu časově náročné izolace a přípravy napájecích buněk. Tyto buňky, odvozené z myších embryí 13. dne, jsou zmrazeny do jednotlivých lahviček, které obsahují přibližně 5-6 x 10⁶ fibroblastů na lahvičku, a prodávají se v balení po 5 lahvičkách v sadě s různým počtem pasáží (P1-P3). K dispozici je několik variant, včetně myších podkladových buněk rezistentních na léčiva, buněk se zástavou růstu a buněk neošetřených mitomycinem-C.

EmbryoMax PMEF byly citovány ve více než 500 publikacích

PMEF-CF1:

MEF buňky izolované z myších embryí CF-1 ve 13. dni. Nejčastěji používaná linie napájecích buněk MEF používaná k podpoře myších a lidských embryonálních kmenových buněk (ES buněk) v kultuře.

PMEF-N:

Neomycin rezistentní buňky MEF izolované z myších embryí FVB v den 13. Běžně se používají v genetických selekčních experimentech s použitím neomycinu jako selekčního činidla.

PMEF-H:

Hygromycin rezistentní MEF buňky izolované z myších embryí C57BL/6 v 13. dni.

PMEF-DR4:

DR4 MEF feederové buňky jsou rezistentní k neomycinu, hygromycinu, puromycinu a 6-thioguaninu.

Obrázek 1. A) Myší embryonální fibroblasty (MEF) PMEF-CF-C nasazené v hustotě 5X10⁴ buněk/cm2 na desky potažené 0,1% želatinou v médiu MEF obsahujícím FBS 24 hodin po nasazení. B) Myší ES buňky CMTI-1 pěstované na MEF v médiu pro myší ES buňky si zachovávají správnou pluripotentní morfologii (shlukovité kolonie s jasnými/jasnými okraji).