Domů Produkty Buněčné kultury a analýzy Analýza buněkSoupravy pro izolaci buněčných organel

Soupravy pro izolaci buněčných organel

Slide 1 of 6

F-aktin je v buňkách viditelný jako dlouhé rovné čáry, které pokrývají buňky. Tyto čáry pokrývají celý obraz, protože buňky pokrývají obraz.

F-aktin konjugovaný s TRITC v buňkách ošetřených sadou ProteoExtract Cytoskeleton Enrichment and Staining Kit.

Malé tečky pokrývají povrch buněk, takže žádná tečka není zcela viditelná. Buňky pokrývají horní část obrázku a rozšiřují se do spodní části uprostřed obrázku.

Kontakty v ohnisku vizualizované pomocí protilátky proti vinculinu a sekundární protilátky konjugované s FITC v buňkách ošetřených soupravou pro obohacení a barvení cytoskeletu bez proteoextraktu.

Malé tečky pokrývají povrch buněk, takže žádná tečka není zcela viditelná. F-aktin je v buňkách viditelný jako dlouhé rovné čáry, které pokrývají buňku. Jádro je viditelné jako ovál uprostřed každé z buněk. Tyto buňky pokrývají horní část snímku a zasahují do dolního středu snímku.

Vizualizace a překrytí F-aktinu, kontaktů v ohnisku a jádra u buněk ošetřených soupravou pro obohacení a barvení cytoskeletu bez proteoextraktu.

F-aktin je v buňkách viditelný jako dlouhé rovné čáry, které pokrývají buňky. Tyto čáry pokrývají horní část snímku a rozšiřují se do spodní části uprostřed snímku.

F-aktin konjugovaný s TRITC v buňkách ošetřených soupravou pro obohacení a barvení cytoskeletu bez proteoextraktu.

Povrch buněk pokrývají malé tečky, přičemž každá z nich je viditelná z jiného místa. Buňky pokrývají celý obraz.

Kontakty v ohnisku vizualizované pomocí protilátky proti vinculinu a sekundární protilátky konjugované s FITC v buňkách ošetřených sadou ProteoExtract Cytoskeleton Enrichment and Staining Kit.

Povrch buněk pokrývají malé tečky, přičemž každá z nich je viditelná z jiného místa. F-aktin je v buňkách viditelný jako dlouhé rovné čáry, které pokrývají buňky. Jádro je viditelné jako ovál uprostřed každé z buněk. Tyto buňky pokrývají celý snímek.

Vizualizace a překrytí F-aktinu, kontaktů v ohnisku a jádra v buňkách ošetřených sadou ProteoExtract Cytoskeleton Enrichment and Staining Kit.

Ačkoli studium buněk získaných z tkání in vivo nejlépe vypovídá o buněčné biologii a funkci, biologická složitost může výsledky zkreslit, pokud nejsou izolovány cílové buněčné populace. Za účelem studia buněčných fenotypů se vyvinuly různé metody izolace buněčných populací na základě definitivních charakteristik. Izolace buněčných populací nejen napomáhá biologickému výzkumu, ale také usnadňuje klinické diagnostické testování. Nejúčinnější metody izolace vykazují vyšší výtěžnost, čistotu a životaschopnost. Obohacení nebo purifikace cílových populací lze dosáhnout pozitivní selekcí - často za použití protilátek, které vážou specifické buněčné markery - nebo negativní selekcí, která může využívat biofyzikální vlastnosti k odstranění nežádoucích buněk za účelem obohacení cílové populace.

Frakcionace buněk na jejich subcelulární složky je již dlouho základem pro studie buněčné biologie. Techniky subcelulární frakcionace se široce používají ke studiu struktury a funkce organel a subcelulárních kompartmentů a také k pochopení umístění, zpracování a pohybu biomolekul. Cílem většiny frakcionačních technik je získat organely a buněčné makromolekuly ve funkčním stavu, kdy si zachovávají své vlastní biochemické vlastnosti. Toho se často dosahuje lýzou buněk pomocí šetrných mechanických prostředků nebo jemných detergentů, po níž často následuje frakcionace buněčných složek diferenciální centrifugací.

Izolace buněk podle fenotypu

Preadipocyty lze použít ke studiu procesu adipogeneze a po diferenciaci k hodnocení lipolýzy, buněčné signalizace, endokrinní funkce a metabolické aktivity.

Naše Sada pro izolacireadipocytů kombinuje nástroje a činidla potřebná k izolaci frakce stromálních cévních buněk z tukové tkáně. Výsledná stromální cévní frakce se kultivuje na tkáňové kultivační desce, na kterou přilnou preadipocyty. Preadipocyty si zachovávají schopnost proliferace a diferenciace v adipocyty, pokud jsou ošetřeny složkami indukujícími diferenciaci.

Buňky jsou vyplněny různě velkými kroužky označujícími kapičky lipidů. Viditelné kapičky lipidů a buňky pokrývají popředí snímku.

Viditelné kapičky lipidů potvrzují izolaci preadipocytů 7 dní po diferenciaci pomocí diferenciační soupravy 3T3-L1.

Soupravy pro izolaci organel a subcelulárních komplexů

Derivace subcelulárních komponent podporuje pochopení funkce organel a může vést k novým biotechnologiím. Například jádra izolovaná ze savčích buněk lze následně použít k syntéze primárních transkriptů endogenní RNA. Souprava Nuclei EZ Prep Kit s vysokou výtěžností (NUC101, NUC201) byla vyvinuta pro rychlou izolaci jader z většiny savčích buněk.

Pro detekci integrity mitochondrií a membránového potenciálu slouží naše souprava pro barvení mitochondrií (CS0390, CS0760) používá barvivo JC-1 (420200, T4069), které se koncentruje v mitochondriální matrix a vytváří červené fluorescenční agregáty. Události, jako je apoptóza, které rozptylují mitochondriální membránový potenciál, zabraňují hromadění barviva JC-1 v mitochondriích a fluorescenční mikroskop pak lze použít k rozlišení životaschopných a poškozených mitochondrií.

Pro použití v proteolytických testech lze také izolovat subcelulární komplexy, jako jsou proteazomy. Naše metoda používá afinitní matricové kuličky obsahující GST-fúzní protein s doménou podobnou ubikvitinu navázanou na GST-agarózu.

Chcete-li pokračovat, musíte se přihlásit.

Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet.

Nemáte účet?