Následné zpracování mAb
Optimalizace navazujících kroků při zpracování monoklonálních protilátek (mAb) má zásadní význam pro zajištění kvality, výtěžnosti a sterility produktu. Maximální využití každého kroku závisí na široké škále produktů, služeb a řešení, které splňují různé potřeby jednotlivých procesů.
Urychlení čiření předčištěných vstupních proudů
Zvýšení účinnosti předcházejících procesů umožňuje výrobcům biofarmaceutických přípravků dosáhnout vyšší hustoty buněk a titrů protilátek. Tato zvýšená účinnost upstreamu vedla k novým výzvám v oblasti čištění, které vyplývají z vysokých koncentrací produktů a kontaminantů. Technologie sklizně a čiření se vyvíjejí tak, aby zahrnovaly předúpravu vstupního proudu, včetně flokulace a různých metod filtrace, jako je normální průtok, tangenciální průtok a hloubková filtrace, a zlepšily tak účinnost separace. Cílem je zvýšit kapacitu procesu a kvalitu filtrátu a zároveň minimalizovat náklady na biomanufakturu.
Například předúprava vstupních surovin pomocí flokulačního činidla s následnou hloubkovou filtrací je účinným řešením čiření pro sklízení kultur s vysokou hustotou buněk se snadnou integrací do současných platforem. Flokulační činidlo funguje jako pojivo, které v roztoku agreguje buňky a buněčné zbytky do větších částic. Nyní jsou k dispozici primární klarifikační filtry speciálně navržené pro sklizeň kultur s vysokou hustotou buněk, které odstraňují větší částice využitím jejich hloubky k prosévání při zachování dobré adsorpční kapacity.
Související zdroje produktů
- Article: pDADMAC Flocculation in Monoclonal Antibody Production Processes – Overcoming Regulatory Challenges with Quality Risk Management
Flocculants, like pDADMAC, remove cell debris during downstream monoclonal antibody production, but their adoption has been difficult due to perceived regulatory concerns.
- mAbsizer™ Calculator Tool
The mAbsizer™ Calculator estimates the quantity of Merck products required to express, purify, and formulate a mAb effectively.
- Webinar: Challenges and Options in High-viscosity Tangential Flow Filtration
Overview of available TFF solutions for achieving high viscosity of monoclonal antibodies and plasma IgG, and strategies for reliable cycle-to-cycle cleaning.
- Webinar: Intensified mAb Polishing: Linking Single Pass Tangential Flow Filtration with Anion Exchange Chromatography
There is growing interest within the biopharmaceutical industry to improve individual unit operation performance by intensification and overall process train efficiency through linked and continuous processing.
- Technical Brief: Techniques for Demonstrating Cleaning Effectiveness of Ultrafiltration Membranes
Tangential flow filtration cartridges designed to isolate, purify and concentrate therapeutic biomolecules are typically reused for multiple process cycles.
- Application Note: pDADMAC Flocculant Reagent for Use with Clarisolve® Depth Filters
In recent years, advances in cell line engineering and cell culture media design have allowed for improvements in monoclonal antibody expression, with cell culture systems exhibiting product titers greater than 10 g/L.
- Application Note: Natrix® Q Chromatography Membrane
Comparison of process-related impurity clearance for resin-based chromatography technologies.
- Application Note: Natrix® Q Membrane Adsorber
Comparison of process-related impurity clearance for membrane adsorbers.
- Application Note: Intensified Polishing Using SPTFF with Anion Exchange Chromatography
The bioprocessing industry is interested in Next Generation Processes with higher flexibility, lower costs, and higher product quality.
Intenzifikace leštění mAb pomocí jednoprůchodové TFF a aniontově výměnné chromatografie
Ačkoli je v procesech následného čištění mAb běžné používat průtočnou aniontově výměnnou pryskyřici (AEX) jako závěrečný krok adsorpce nečistot, tento konvenční krok leštění může vést k úzkému hrdlu procesu kvůli velkým kolonám s dlouhou dobou zpracování. Stále více výrobců využívá nové řešení: předkoncentraci vstupního mAb před kolonou AEX spojením inline jednoprůchodové tangenciální průtokové filtrace (SPTFF) s chromatografií AEX. Tento přístup zlepšuje kapacitu pryskyřice AEX pro nečistoty HCP a minimalizuje úzké hrdlo v kroku leštění AEX.
Zvýšení účinnosti čištění pomocí chromatografické membrány
Konvenční technologie čištění obecně vyžadují kompromisy v návrhu procesu. Například chromatografické kolony na bázi pryskyřic jsou často předimenzované kvůli omezením propustnosti a jsou méně kompatibilní s flexibilní výrobou. Konvenční membránové adsorbéry nabízejí rychlejší propustnost, ale jejich nízká vazebná kapacita nemusí zajistit dostatečnou robustnost procesu.
Pro překonání těchto omezení byla vyvinuta nová generace vysokokapacitní chromatografické membrány AEX s vysokou propustností, která kombinuje vysokou vazebnou kapacitu a průtoky ve formátu plug-and-play pro jednorázové použití. Tato nová možnost purifikace nabízí potenciál produktivnějšího, flexibilnějšího a robustnějšího návrhu procesu.
Zpracování krmiv s vysokou viskozitou spojených se zvyšující se koncentrací
Převedení infuzní léčby na podkožní injekce může zvýšit komfort a spokojenost pacientů. Mezi výzvy při vývoji těchto řešení patří např:
- Dodání léčiva o mnohem vyšší koncentraci
- Navržení účinného procesu ultrafiltrace s použitím vysoce kvalitních formulačních pufrů
- Překonání viskozitních omezení u některých TFF systémů
TFF kazety určené pro provoz s vysokou viskozitou umožňují koncentrovat léčiva bez nutnosti úpravy stávajících systémů nebo výměny čerpadel.
Kombinace pomocných látek pro snížení viskozity. vysoce koncentrovaných roztoků bílkovin lze použít k zlepšení ekonomiky procesu během TFF. To může v konečném důsledku umožnit vyšší konečnou koncentraci bílkovin v přípravku, který lze stále podávat standardními injekčními stříkačkami.
Optimalizace opakovaného použití a skladování kazet TFF
Kvalifikace opakovaného použití, životnosti a skladování kazet TFF je důležitá při optimalizaci a kvalifikaci jakéhokoli výrobního procesu. Pochopení požadavků a rizik skladování a opakovaného použití TFF kazet je nezbytné pro vypracování komplexního validačního plánu a zmírnění potenciálních rizik stažení výrobků z trhu nebo odstávky závodu.
Optimalizace čištění pro prodloužení životnosti chromatografických pryskyřic
Chromatografické pryskyřice se významně podílejí na nákladech na výrobu monoklonálních protilátek. Pro zlepšení ekonomiky procesu a maximalizaci životnosti pryskyřic by měly být pryskyřice před opětovným použitím účinně vyčištěny, aby se odstranily druhy znečištění.
Optimalizace postupů čištění pryskyřic v průběhu několika cyklů prostřednictvím tradičních experimentů v laboratorním měřítku je časově náročná a vyžaduje značné množství vstupního materiálu. K optimalizaci postupů čištění pryskyřic však lze použít miniaturní, vysoce výkonné screeningové nástroje. Studie v miniaturizovaném měřítku zrychlují dobu dosažení výsledků a zároveň minimalizují objem potřebného vstupního materiálu a pufrů.
Související videa
Pracovní postupy
Proti proudu
Přípravný proces začíná vývojem buněčné linie a zahrnuje všechny kroky až po sklizeň buněk, přičemž cílem je zvýšit hustotu buněk a titry produktů, aby se maximalizovala produkce mAb
Konečná filtrace a plnění
Konečné plnění léčivých přípravků musí splňovat přísné požadavky na sterilitu, neporušenost, čistotu, provozní bezpečnost a efektivitu
Virová bezpečnost
Virusová bezpečnost je založena na zásadách "prevence, detekce a odstranění" a kombinuje analýzu rizik s pečlivým výběrem surovin, rozsáhlým testováním surovin a meziproduktů a prováděním kroků ke snížení výskytu virů v následném zpracování
.
Kontrola biologické zátěže
Všechny procesy výroby mAb jsou vystaveny riziku mikrobiální kontaminace, což vyžaduje návrh procesu s kontrolními strategiemi ke zmírnění rizika a také monitorování biologické zátěže k zajištění kontroly procesu
Odstraňování kameniva
Agregáty bílkovin jsou problémem v celé předcházející i navazující výrobě mAb a jejich kontrola je klíčem k maximalizaci účinnosti a robustnosti procesu
.Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet.
Nemáte účet?