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DUO92101

Sigma-Aldrich

Starter kit Duolink® in situ rosso, topo/coniglio

Sinonimo/i:

in situ Proximity Ligation Assay, Protein Protein Interaction Assay

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About This Item

Codice UNSPSC:
41116158
NACRES:
NA.32

Nome Commerciale

Duolink®

Livello qualitativo

tecniche

proximity ligation assay: suitable

Fluorescenza

λex 594 nm; λem 624 nm (Texas Red®; Zeiss Filter set 31)

Compatibilità

suitable for fluorescence

Temperatura di conservazione

−20°C

Applicazioni

Il saggio di ligazione per prossimità (PLA®)Duolink®, consente il rilevamento endogeno di interazioni proteiche, modificazioni post-traduzionali e analisi dell′ espressione proteica a livello di singola molecola, in cellule e campioni di tessuto fissati.

Per usare il prodotto, seguire il Protocollo per la fluorescenza in situ Duolink® Sono disponibili anche una serie di istruzioni brevi

Per informazioni su come eseguire un esperimento Duolink®, per consultare le applicazioni, le istruzioni per la risoluzione dei problemi, e altro ancora si rimanda al nostro Centro delle risorse per PLA Duolink®

Un saggio Duolink® PLA in situ completo, necessita di due anticorpi primari (validati per PLA, IHC, ICC o IF) che riconoscano i due epitopi target. Il kit di base fornisce tutti gli altri reagenti necessari per 30 reazioni Duolink® PLA che includono due di Sonde PLA (Anti-coniglio PLUS e Anti-topo MINUS), reagenti rossi di rilevamento, tamponi di lavaggio e terreno di montaggio. Tenere presente che gli anticorpi primari devono provenire dalla stessa specie delle sonde PLA Duolink® L′analisi si effettua con l′attrezzatura comunemente utilizzata per l′immunofluorescenza.

Specificità
Lo starter kit Duolink® in situ rosso, topo/coniglio richiede un anticorpo primario di topo e un anticorpo primario di coniglio. I reagenti per il rilevamento della fluorescenza rossa sono spesso utilizzati con il filtro Texas Red® .

Nota applicativa
Sono necessari due anticorpi primari prodotti in specie diverse. Provare gli anticorpi primari (IgG, mono o policlonali) in un normale saggio di immunofluorescenza (IF), immunoistochimica (IHC) o immunocitochimica (ICC) per determinare tipo di fissazione, blocking e titolo ottimali. I reagenti PLA Duolink® in situ sono idonei all′uso su cellule fissate, citospin, cellule cresciute su vetrino, fissate in formalina, incluse in paraffina (FFPE), o su tessuto (fresco o congelato). Non è richiesto un numero minimo di cellule.

Se per velocizzare i vostri progetti Duolink® preferite affidarvi a noi, scoprite il nostro Programma di assistenza ai clienti

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Lo starter kit Duolink® in situ rosso, topo/coniglio richiede un anticorpo primario di topo e un anticorpo primario di coniglio. ®


Testare gli anticorpi primari (IgG, mono o policlonali) mediante un saggio standard di immunofluorescenza (IF), immunoistochimica (IHC) o immunocitochimica (ICC) per determinare le condizioni ottimali di fissazione, blocking e titolo. I reagenti per PLA in situ Duolink® sono idonei all′uso su cellule fissate, cytospin, cresciute su vetrino, fissate in formalina, incluse in paraffina (FFPE) o su tessuto (fresco o congelato).

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®
Lo starter kit Duolink® in situ rosso è stato utilizzato per il saggio di ligazione per prossimità.

Caratteristiche e vantaggi

  • Non è necessaria alcuna overespressione o manipolazione genetica
  • Elevata specificità (meno falsi positivi)
  • Sensibilità a livello di singola molecola, grazie all′amplificazione a cerchio rotante
  • Quantificazione relativa possibile
  • Non richiede un′apparecchiatura particolare
  • Più rapida e più semplice della FRET
  • Maggiore accuratezza rispetto alla co-immunoprecipitazione (co-IP)
  • Risultati pronti per la pubblicazione

Note legali

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Texas Red is a registered trademark of Life Technologies

I componenti del kit sono disponibili anche separatamente

N° Catalogo
Descrizione
SDS

  • DUO92002Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Rabbit PLUS, Affinity purified Donkey anti-Rabbit IgG (H+L)SDS

  • DUO92004Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Mouse MINUS, Affinity purified Donkey anti-Mouse IgG (H+L)SDS

  • DUO92008Duolink® In Situ Detection Reagents RedSDS

  • DUO82049Duolink® In Situ Wash Buffers, FluorescenceSDS

  • DUO82040Duolink® In Situ Mounting Medium with DAPISDS

Avvertenze

Danger

Indicazioni di pericolo

Classi di pericolo

Aquatic Chronic 2 - Met. Corr. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1

Codice della classe di stoccaggio

8A - Combustible corrosive hazardous materials


Certificati d'analisi (COA)

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The Journal of Biological Chemistry (2015)
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New protein?protein interactions of mitochondrial connexin 43 in mouse heart.
Denuc A, et al.
Journal of Cellular and Molecular Medicine, 20(5), 794-803 (2016)
Ivan Duran et al.
Human molecular genetics, 24(7), 1918-1928 (2014-12-17)
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Articoli

Duolink® proximity ligation assay used to study neuron interactions furthering neuroscience research.

Scopri come funziona la tecnologia del saggio di ligazione di prossimità e come il kit per verificare l’interazione tra proteine permetta di confermare in situ la presenza di dimerizzazione di EGFR-HER2 indotta da EGF.

Learn how Proximity Ligation Assay technology works and how the protein-protein interaction control kit can confirm in situ detection of EGF-induced EGFR-HER2 dimerization.

Support information including tips and tricks, frequently asked questions, and basic troubleshooting.

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Protocolli

This page details the Duolink® In Situ Short Protocol for fluorescence detection

This protocol describes how to perform immunofluorescent detection of proteins in cells and tissue.

Questo protocollo si usa per la rivelazione mediante immunofluorescenza di proteine presenti nelle cellule e nei tessuti.

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