NGLYFL-RO

N-Glicosidasi F

recombinant form of the gene from Flavobacterium meningosepticum

• Sinonimo/i: N-Glicosidasi F, Peptide-N-glicosidasi F, Peptide-N⁴-(acetil-β-glucosamminil)-asparagina ammidasi, [PNGASI F ; PEPTIDE-N-GLICOSIDASI F]
• Classificazione EC (Enzyme Commission): 3.5.1.52 (BRENDA, IUBMB)
• Codice UNSPSC: 12352204

Proprietà

• Origine biologica: bacterial (Flavobacterium meningosepticum)
• Livello qualitativo: 100
• Ricombinante: expressed in E. coli
• Coniugato: (N-linked)
• Saggio: ≥90% (SDS-PAGE)
• Stato: lyophilized
• Attività specifica: >25000 units/mg protein
• PM: 35.5 kDa
• Purificato mediante: electrophoresis
• Confezionamento: pkg of 100 U (11365185001); pkg of 250 U (11365193001)
• Produttore/marchio commerciale: Roche
• Condizioni di stoccaggio: (Keep container tightly closed in a dry and well-ventilated place.)
• tecniche: activity assay: suitable
• Colore: colorless
• pH ottimale: 7.0-8.0
• Solubilità: water: soluble
• Compatibilità: suitable for enzyme test
• Attività estranea: Endoglycosidase F, none detected; a-Fucosidase, present; b-Galactosidase, present; b-N-Acetylhexosaminidase, present; dA(17h ≤100 units, present
• Temperatura di conservazione: 2-8°C

Descrizione

Descrizione generale

La N-glicosidasi F (PNGasi F) è un potente enzima che idrolizza il legame glicosilamminico. Essa contribuisce anche a generare un peptide privo di residui zuccherini e un oligosaccaride con un′unità di di-N-acetilchitobiosio.[1]

La N-glicosidasi F, nota anche come PNGasi F, è un enzima asparagina amidasi che si ricava da Flavobacterium meningosepticum È diffusamente usato come strumento utile in proteomica per indagare ed analizzare i processi di N-glicosilazione.[2]

Specificità

Idrolizza tutti i tipi di catene laterali di N-glicano da glicopeptidi e glicoproteine a meno che portino residui di fucosio con nucleo legato 1,3 αpresenti in glicoproteine di insetti e piante. Privi di attività proteolitiche contaminanti (x = H o zucchero/[i]) secondo le procedure attuali di controllo di qualità.

Applicazioni

La N-glicosidasi F è stata impiegata per la deglicosilazione delle N-glicoproteine[3][4]

La N-glicosidasi F si è dimostrata in grado di liberare tutti i tipi di N-glicani legati ad asparagina, a condizione che il gruppo amminico e quello carbossilico siano impegnati in un legame peptidico e che l′oligosaccaride abbia la lunghezza minima pari ad una unità di chitobiosio. I prodotti di reazione sono ammoniaca, acido aspartico (nella catena peptidica) e l′oligosaccaride completo.
Nota: la N-glicosidasi F ricombinante è disponibile anche in soluzione.

Definizione di unità

Una unità è l′attività enzimatica che idrolizza 1 nmole di dansil fibrin glicopeptide o 0,2 nmoli di dansil fetuin glicoproteina entro 1 minuto a 37 °C e pH 7,8.

Stato fisico

Soluzione trasparente incolore dopo ricostituzione

Nota sulla preparazione

Condizioni di stoccaggio (soluzione di lavoro): Da 2 a 8 °C
La soluzione ricostituita è stabile fra 2 e 8 °C per almeno quattro settimane.

Ricostituzione

Dissolvere il contenuto rispettivamente in 0,1 mL di acqua ridistillata (confezione da 100 unità) o 0,25 mL di acqua bidistillata (250 unità per confezione) dà come risultato una concentrazione di 100 mM di tampone fosfato sodico, 25 mM di EDTA a pH 7,2.
Nota: La N-Glicosidasi F ricombinante è anche disponibile in soluzione al 50% di glicerolo.

Altre note

Esclusivamente per ricerche di life science. Non usare a scopo diagnostico.

Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 13 - Non Combustible Solids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 2
• Punto d’infiammabilità (°F): does not flash
• Punto d’infiammabilità (°C): does not flash