MAB377

Anticorpo anti-NeuN, clone A60

clone A60, Chemicon^®, from mouse

• Sinonimo/i: Neuron-Specific Nuclear Protein, Neuna60, A60
• Codice UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Proprietà

• Origine biologica: mouse
• Livello qualitativo: 100
• Forma dell’anticorpo: purified immunoglobulin
• Tipo di anticorpo: primary antibodies
• Clone: A60, monoclonal
• Reattività contro le specie: avian, pig, chicken, human, rat, salamander, ferret, mouse
• Produttore/marchio commerciale: Chemicon^®
• tecniche: flow cytometry: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunofluorescence: suitable; immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotipo: IgG1
• Condizioni di spedizione: wet ice
• modifica post-traduzionali bersaglio: unmodified
• Informazioni sul gene: human ... RBFOX3(146713) ; mouse ... Rbfox3(52897) ; rat ... Rbfox3(287847)

Descrizione

Descrizione generale

L'anticorpo NeuN (NEUronal Nuclei; clone A60) riconosce in modo specifico la proteina neurone-specifica con attività di legame al DNA NeuN, presente nella maggior parte delle cellule neuronali del CNS e del PNS di tutti i vertebrati testati. La distribuzione della proteina NeuN, sia nel cervello fetale che in quello adulto, interessa i nuclei, i corpi cellulari e alcuni processi neuronali prossimali; non tutti i tipi di neuroni vengono però riconosciuti da NeuN ad età diverse: non lo sono ad esempio le cellule retiniche INL, le cellule Cajal-Retzius, le cellule di Purkinje, i neuroni del nucleo olivare inferiore e del nucleo dentato e le cellule dei gangli del sistema nervoso simpatico (Mullen et al., 1992; Wolf et al., 1996). In immunoistochimica la proteina NeuN appare per la prima volta in momenti dello sviluppo che corrispondono all′uscita del neurone dal ciclo cellulare e/o all'inizio della differenziazione terminale del neurone (Mullen et al., 1992). L'immunoreattività nel tubo neurale del topo appare intorno a E9,5 e si estende a tutto il sistema nervoso in via di sviluppo entro E12,5. L′intensa colorazione nucleare suggerisce una funzione regolatrice a livello del nucleo, non esistono invece prove che attestino una funzione nel citoplasma distale, la proteina potrebbe essere semplicemente sintetizzata nel citoplasma per essere poi trasportata nel nucleo. In immunoblot non è stata trovata alcuna differenza tra la proteina isolata dai nuclei rispetto a quella ottenuta da estratto totale di cervello (Mullen et al., 1992).

Specificità

L′esclusivo anticorpo monoclonale di MILLIPORE diretto contro la proteina nucleare neurone-specifica dei vertebrati NeuN (o Neuronal Nuclei), reagisce con la maggior parte dei tipi di cellule neuronali in tutto il sistema nervoso di topo, inclusi cervelletto, corteccia cerebrale, ippocampo, talamo, midollo spinale e con i neuroni del sistema nervoso periferico, inclusi i gangli della radice dorsale, i gangli della catena simpatica e gangli del sistema nervoso enterico. Durante lo sviluppo, l'immunoreattività viene osservata per la prima volta poco dopo che i neuroni sono diventati post-mitotici, mentre non è stata osservata alcuna colorazione nelle zone in fase di proliferazione. La colorazione immunoistochimica è localizzata principalmente nel nucleo dei neuroni, si osserva inoltre una colorazione più debole nel citoplasma. I pochi tipi cellulari che non reagiscono con MAB377 includono le cellule del Purkinje, le cellule mitrali e le cellule fotorecettrici. L'anticorpo è un eccellente marker per i neuroni nelle colture primarie e di cellule P19 stimolate con acido retinoico. E′ inoltre usato per l′identificazione dei neuroni nei trapianti.

Immunogeno

Nuclei cellulari purificati dal cervello di topo

Applicazioni

Analisi mediante Western blot:
un lotto precedente di questo anticorpo riconosceva 2-3 bande nell'intervallo 46-48 kDa ed eventualmente un'altra banda di circa 66 kDa.

Immunocitochimica:
è stata utilizzata la diluizione 1:10-1:100 di un lotto precedente. I neuroni in coltura vanno permeabilizzati con triton X-100 allo 0,1%. Di regola, gli anticorpi primari vanno diluiti semplicemente in un tampone, senza eccesso di bloccanti delle proteine o detergenti.

Immunoistochimica:
1:100-1:1.000. L'anticorpo funziona meglio su tessuti inclusi in cera di poliestere, può comunque essere usato su tessuti inclusi in paraffina utilizzando una diluizione di lavoro inferiore. L'anticorpo funziona bene con i fissativi a base di formaldeide. E′ stato utilizzato con successo il pretrattamento con acido citrico e microonde (Sarnat, 1998).

Analisi immunoistochimica (paraffina): un lotto di questo anticorpo è stato utilizzato per IH(P).

Le diluizioni di lavoro ottimali vanno comunque determinate dall'utente finale.

Categoria di ricerca
Neuroscienze

L′anticorpo Anti-NeuN, clone A60, rileva il livello di NeuN ed è stato pubblicato e convalidato per l'uso in FC, IC, IF, IH, IH (P), IP e WB.

Sottocategoria di ricerca
Marcatori neuronali & gliali

Qualità

Testato regolarmente in immunoistochimica su tessuto cerebrale.

Analisi immunoistochimica (paraffina):
NeuN (cat. # MAB377) pattern/morfologia di colorazione in cervelletto di ratto. Tessuto pretrattato con citrato, pH 6.0. Questo lotto di anticorpo è stato diluito a 1:100, utilizzando IHC-Select Detection con HRP-DAB. L'immunoreattività è visibile come colorazione nucleare nei neuroni dello strato granulare. Si noti che non viene rilevato alcun segnale nel nucleo delle cellule di Purkinje.
Colorazione ottimale con tampone citrato, pH 6.0, recupero dell'epitopo: cervelletto di ratto

Descrizione del bersaglio

46/48 kDa

Stato fisico

Formato: purificato

Immunoglobulina IgG1 murina purificata in tampone contenente tampone fosfato 0,02 M, NaCl 0,25 M, pH 7,6 con sodio azide 0,1%.

Purificato con proteina A

Stoccaggio e stabilità

Stabile per 6 mesi a 2-8ºC dalla data di ricezione.

Risultati analitici

Controlli
Controllo positivo - Tessuto cerebrale. Controllo negativo - Qualsiasi tessuto non neuronale ad es. fibroblasti

Altre note

Vincitore del CiteAb Award 2024 per i fornitori che hanno conseguito risultati nella ricerca sul Parkinson

Note legali

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Esclusione di responsabilità

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Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 2
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable