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F7425

Millipore

ANTI-FLAG® antibody produced in rabbit

ANTI-FLAG® antibody produced in rabbit

affinity isolated antibody, buffered aqueous solution

Synonyme(s) :

Anti-ddddk, Anti-dykddddk

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0.2 MG
773.00 CHF

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About This Item

Numéro MDL:
MFCD02262912
Code UNSPSC :
12352203
Nomenclature NACRES :
NA.32

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Source biologique

rabbit

Niveau de qualité

200

Conjugué

unconjugated

Forme d'anticorps

affinity isolated antibody

Type de produit anticorps

primary antibodies

Clone

polyclonal

Forme

buffered aqueous solution

Espèces réactives

all

Concentration

~0.8 mg/mL

Technique(s)

dot blot: 1-2.5 μg/mL
immunoprecipitation (IP): 4-8 μg using amino terminal FLAG-BAP fusion protein from E. coli crude lysate
indirect immunofluorescence: 5-10 μg/mL using 293T cells transfected with a plasmid encoding FLAG-JNK
western blot (chemiluminescent): 1-2.5 μg/mL using an E. coli periplasmic extract expressing an N-terminal FLAG fusion protein

Isotype

IgG

Séquence immunogène

DYKDDDDK

Conditions d'expédition

dry ice

Température de stockage

−20°C

Catégories apparentées

Description générale

L′anticorps polyclonal anti-FLAG de lapin reconnaît l′épitope FLAG situé sur les protéines de fusion avec une étiquette FLAG. Cet anticorps réagit avec les protéines de fusion portant une étiquette FLAG sur l′extrémité N-terminale, Met-N-terminale ou C-terminale.
L′épitope FLAG est une protéine de huit acides aminés dotée d′un site de clivage de l′entérokinase.[1][2]

Immunogène

FLAG ; séquence peptidique DYKDDDDK

Application

L'anticorps reconnaît l'épitope FLAG situé au niveau de l'extrémité C-terminale ou N-terminale des protéines de fusion avec étiquette FLAG, lors d'essais du type dot blot, immunoblotting[3][4], immunoprécipitation[3] et immunocytochimie.
Pour en savoir plus sur nos produits, rendez-vous sur notre portail des applications des produits FLAG®.

Actions biochimiques/physiologiques

L′épitope FLAG joue un rôle crucial dans la purification par immuno-affinité des protéines de fusion.[1]

Forme physique

Solution dans une solution saline tamponnée au phosphate 0,01 M à pH 7,4, contenant 1 % d′albumine de sérum bovin et de l′azide de sodium 15 mM

Notes préparatoires

Produit purifié par chromatographie d′affinité sur une colonne greffée avec le peptide immunisant.

Autres remarques

Lauréat du prix CiteAb 2024 récompensant les avancées des fournisseurs dans la recherche sur la maladie de Parkinson

Informations légales

FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

nwg

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable

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Ryota Sato et al.
Frontiers in microbiology, 10, 1857-1857 (2019-08-29)
The envelope proteins of influenza A virus, hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA), play critical roles in viral entry to host cells and release from the cells, respectively. After protein synthesis, they are transported from the trans-Golgi network (TGN) to the
Martin S Taylor et al.
The Journal of biological chemistry, 288(45), 32211-32228 (2013-09-21)
Ghrelin O-acyltransferase (GOAT) is a polytopic integral membrane protein required for activation of ghrelin, a secreted metabolism-regulating peptide hormone. Although GOAT is a potential therapeutic target for the treatment of obesity and diabetes and plays a key role in other
Makoto Miyazawa et al.
The Journal of biological chemistry, 286(22), 19191-19203 (2011-04-12)
The molecular chaperone prefoldin (PFD) is a complex comprised of six different subunits, PFD1-PFD6, and delivers newly synthesized unfolded proteins to cytosolic chaperonin TRiC/CCT to facilitate the folding of proteins. PFD subunits also have functions different from the function of
Ecco Staller et al.
Journal of virology, 93(17) (2019-06-21)
ANP32 proteins have been implicated in supporting influenza virus replication, but most of the work to date has focused on the ability of avian Anp32 proteins to overcome restriction of avian influenza polymerases in human cells. Using a CRISPR approach
Gouji Toyokawa et al.
Neoplasia (New York, N.Y.), 13(10), 887-898 (2011-10-27)
A number of histone methyltransferases have been identified and biochemically characterized, but the pathologic roles of their dysfunction in human diseases like cancer are not well understood. Here, we demonstrate that Wolf-Hirschhorn syndrome candidate 1 (WHSC1) plays important roles in
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Questions

1–9 of 9 Questions  

  1. Can this AB (F7425) used for mouse 30um thick section. mouse will be perfused with 4% PFA and than cryopreserved. thanks

    1 answer

    1. This product has been recommended for use in immunofluorescence and indirect immunofluorescence at 5-10 μg/mL using 293T cells transfected with a plasmid encoding FLAG-JNK. It has not been tested for use in IHC applications. The end-user will need to optimize the assay. Please see the link below to review the product datasheet:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/207/353/f7425dat-ms.pdf

      In general, antibodies work well on 5-15 uM sections, for 30 uM sections, blocking /permeabilization steps and antibody dilution, the incubation time will need to be optimized by end user. Please see the links below to review an alternative anti-Flag antibody that may be more suitable for this application. Note that this product is a mouse monoclonal antibody:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/175/747/f1804bul-ms.pdf
      https://www.sigmaaldrich.com/product/sigma/f1804

      Helpful?

  2. Is there a recommended isotype control for this antibody?

    1 answer

    1. Any rabbit IgG such as product I5006 would be an appropriate isotype control for this antibody.

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  3. What are the positive controls that can be used with Product F7425, ANTI-FLAG® from rabbit?

    1 answer

    1. The positive controls that can be used are as follows:Amino-terminal FLAG-BAP fusion protein, Product No. P7582Carboxy-terminal FLAG-BAP fusion protein, Product No. P7457Amino-terminal Met-FLAG-BAP fusion protein, Product No. P5975.

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  4. How to get rid of background when using Product F7465, ANTI-FLAG® from rabbit,?

    1 answer

    1. To reduce non-specific background on tissue staining, a small amount of Triton X-100 (Product No. X100 or T8787), can be added to the wash buffers and antibody incubation buffers. Try a Triton X-100 concentration of 0.1% to start. Tween 20 (Product No. P5927) can also be used.

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  5. What is the concentration of Product F7425, ANTI-FLAG® from rabbit?

    1 answer

    1. The concentration is 0.9 mg protein per ml.

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  6. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 answer

    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

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  7. Is Product F7425, ANTI-FLAG® from rabbit, a monoclonal or polyclonal?

    1 answer

    1. F7425 is a polyclonal antibody from rabbit.

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  8. Is there any references for the use of Product F7465, ANTI-FLAG® from rabbit, in immunohistochemistry or western blotting?

    1 answer

    1. K. Schafer and T. Braun, Monoclonal Anti-FLAG Antibodies React with a New Isoform of Rat Mg++ Dependent Protein Phosphatase. Biochemical and Biophysical Research Communications, 207, 708.

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  9. How much Product F7425, ANTI-FLAG® from rabbit, should be used in western blotting and ELISA applications?

    1 answer

    1. For a Western blot from a PAGE run (preferably) under denaturing conditions, a 1:400 dilution of this antibody should be used.  A 1-10 μg/ml concentration should be used when using thie antibody in an ELISA application.

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Reviews

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  1. Nottingham
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    5 out of 5 stars.

    Western blotting

    I HAVE USED THIS ANTIBODY ALOT DURING MY RESEARCH. AND IT HAS WORKED PERFECTLY.

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