L6397

Concanavalin A aus Canavalia ensiformis (Jack bean)

peroxidase conjugate, lyophilized powder

• Synonym(e): ConA
• UNSPSC-Code: 12352202
• NACRES: NA.32

Eigenschaften

• Biologische Quelle: Canavalia ensiformis (jack bean)
• Qualitätsniveau: 200
• Konjugat: peroxidase conjugate
• Form: lyophilized powder
• Methode(n): blood typing: suitable; fractionation: suitable
• Verunreinigungen: carbohydrate, essentially free
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Anwendung

Detects glycoproteins containing α-D-mannose, α-D-glucose when used with appropriate peroxidase substrate

General Western Blot Protocol:

• Glycoprotein sample size: 500ng
• Lectin Concentration: 0.1ug/ml

1. Load samples at 500 ng of glycoprotein per lane
2. Run 4-20% Bis-Tris SDS page gel
3. Transfer gel to a PVDF membrane
4. Block membrane for 1 hr at RT with RIPA buffer (R0278 Sigma)
5. Incubate HRP lectin at 0.1ug/ml with RIPA buffer for 2 hours at RT
6. Wash membrane 5 x 5 minutes with 25ml RIPA buffer
7. Detect using chemiluminescent substrate (CPS1-120)

Biochem./physiol. Wirkung

Con A ist nicht blutgruppenspezifisch, hat aber eine Affinität für terminale α-D-Mannosyl- und α-D-Glucosylreste. Für ihre Aktivität sind Ca²⁺- und Mn²⁺-Ionen erforderlich. Bei einem pH-Wert von unter 5,6 löst Con A sich zu Dimeren auf. Bei einem pH-Wert von 5,8 bis 7,0 liegt Con A als Tetramer vor; bei einem pH-Wert über 7,0 bilden sich Aggregate. Con A weist eine mitogene Aktivität auf, die vom Ausmaß der Aggregation abhängt. Succinylierung führt zu einer aktiven dimeren Form, welche bei einem pH-Wert von mehr als 5,6 ihre Form beibehält.

Verpackung

Package size based on protein content

Einheitendefinition

One unit will form 1 mg purpurogallin in 20 sec from pyrogallol at pH 6.0 at 20 °C.

Physikalische Form

Lyophilized powder containing tris-citrate buffer salts and trace calcium and manganese

Angaben zur Herstellung

Prepared from peroxidase type VI (P8375), using the method of Wilson and Nakane,[1] which promotes conjugation but prevents the interaction between Con A and peroxidase sugar residues.

Hinweis zur Analyse

Falls angegeben, wird die Agglutinationsaktivität in μg/ml ausgedrückt und durch Serienverdünnungen einer phosphatgepufferten 1-mg/ml-Kochsalzlösung mit einem pH-Wert von 6,8, welche Ca²⁺ und Mn²⁺ enthält, bestimmt. Diese Aktivität ist die niedrigste Konzentration, bei der eine 2 % Humanerythrozytensuspension nach einstündiger Inkubation bei 25 °C agglutiniert.

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08
• Signalwort: Danger
• H-Sätze: H317,H334,H361
• P-Sätze: P202 - P261 - P272 - P280 - P302 + P352 - P308 + P313
• Gefahreneinstufungen: Repr. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1
• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Faceshields, Gloves, type P3 (EN 143) respirator cartridges