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Merck

H0393

Sigma-Aldrich

Hirudin

recombinant, expressed in unspecified host, ≥7,000 ATU/mg protein, powder

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About This Item

CAS-Nummer:
EG-Nummer:
MDL-Nummer:
UNSPSC-Code:
12352202
NACRES:
NA.77

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Produktbezeichnung

Hirudin, recombinant, expressed in unspecified host, ≥7,000 ATU/mg protein (ATU = antithrombin units)

Rekombinant

expressed in unspecified host

Qualitätsniveau

Form

powder

Spezifische Aktivität

≥7,000 ATU/mg protein (ATU = antithrombin units)

Mol-Gew.

~7 kDa

Löslichkeit

pyridine: soluble
water: soluble

Versandbedingung

dry ice

Lagertemp.

−20°C

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Anwendung

Die antithrombotische Wirksamkeit bei parenteraler Verabreichung kann durch Integration in die kationischen Liposome, die als eine Art von Retardanzien wirken, wesentlich verlängert werden.

Physikalische Eigenschaften

Das Antikoagulans Hirudin ist ein saures Protein mit einem Molekulargewicht von ~7 kDa und 65 Aminosäureresten. Es kommt in Blutegeln (Hirudo medicinalis) natürlich vor. Es ist der stärkste Inhibitor sowohl von löslichem (freiem) als auch gerinnselgebundenem Thrombin. Hirudin bindet Thrombin mit hoher Affinität und deckt mehr als 20 % der Thrombinoberfläche, wobei der aktive Situs und der exolytische Situs I (Fibrinogen und PAR-Erkennung) okkludiert werden. Durch diese umfassende Deckung werden Thrombuswachstum und Plättchenaktivierung blockiert. Hirudin wird in der menschlichen Blutbahn nicht metabolisiert und scheidet unverändert durch die Nierenfiltration aus. Natives Hirudin enthält einen sulfatierten Tyrosylrest (Tyr63), drei Disulfidbrücken und einen hohen Anteil an Dicarboxylsäuren. Hirudin wird nicht glykosyliert und enthält keine Tryptophan-, Arginin- und Methioninreste. Mindestens 20 Isoformen wurden identifiziert und sequenziert.
Dieses rekombinante Hirudinprodukt entspricht der HV-1-Variantensequenz, jedoch mit der Ausnahme, dass der Tyr63-Rest nicht sulfatiert wird.

Einheitendefinition

Gemäß einem direkten Vergleich mit einem NIH-Trombin-Referenzstandard neutralisiert eine Antithrombin-Einheit (ATU) eine NIH-Einheit Thrombin bei 37 °C.

Rekonstituierung

Hirudin ist wasserlöslich. In der Fachliteratur wird die Verwendung von „Verdünnungsflüssigkeit II“ (35,7 mM Essigsäure, 35,7 mM Natriumdiethylbarbiturat, 0,85 % NaCl, 1 % Rinderserumalbumin und 0,5 % PEG, pH 7,4) für die Auflösung von Hirudin (500 ATU/ml) und Thrombin beschrieben. Berichten zufolge ist Hirudin in Pyridin löslich, aber in Alkohol, Ether, Aceton oder Benzol praktisch unlöslich.

Hinweis zur Analyse

Proteinbestimmung nach Lowry.

Lagerklassenschlüssel

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 3

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable

Persönliche Schutzausrüstung

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Gloves


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R Bischoff et al.
Biochemistry, 32(2), 725-734 (1993-01-19)
Natural hirudin variant 2 with a lysine residue in position 47 (rHV2-Lys47) was produced in a genetically engineered strain of Saccharomyces cerevisiae as a secreted protein of 65 amino acids and purified to greater than 99% homogeneity. Only reversed-phase high-performance
A Kudo et al.
Cerebrovascular diseases (Basel, Switzerland), 10(6), 424-430 (2000-11-09)
The role of thrombin as a spasmogen after subarachnoid hemorrhage was evaluated using the intrathecally administered thrombin inhibitor hirudin, released from a drug delivery system (DDS) based on collagen in a canine vasospasm model. The DDS was implanted into the
The complete amino acid sequence of hirudin, a thrombin specific inhibitor: Application of colour carboxymethylation.
Dodt, J., et al.
Febs Letters, 165, 180-184 (1984)
Jun Wang et al.
iScience, 25(3), 103971-103971 (2022-03-01)
Clotting Factor V (FV) is primarily synthesized in the liver and when cleaved by thrombin forms pro-coagulant Factor Va (FVa). Using whole blood RNAseq and scRNAseq of peripheral blood mononuclear cells, we find that FV mRNA is expressed in leukocytes, and
[The reaction between hirudin and thrombin].
F MARKWARDT et al.
Hoppe-Seyler's Zeitschrift fur physiologische Chemie, 312(1-3), 85-98 (1958-01-01)

Questions

1–3 of 3 Questions  
  1. Hi Please help me for reconstituting of Hirudin H0393  H100UN . Can I solve it by distilled water ? How much of DW should be added to the vial? Another question is the vial seems to be empty however it is plumb . Is this because the amount of powder?

    1 answer
    1. This material is soluble in water, a rate has not been established. For assay purposes, this product is reconstituted at 10 units/100ul in 28.6 mM Barbital buffer (see product B5934) containing 1.0% (w/v) Bovine Serum Albumin and 0.5% (w/v) Polyethylene Glycol, pH 7.35. Please see the link below to review the product datasheet which includes detailed preparation instructions.
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/320/022/h0393pis.pdf

      The activity specification for this product is minimum 7000 units per milligram protein. Occasionally, a small amount of powder may not be visible. A gentle spin or ‘shake down’ of the vial may move the powdered product to the bottom of the vial.

      Helpful?

  2. Thanks for the previous answer, but the "units" definition is confusing. Does "100-units pack" mean 100-IU (in the International Standard system) or -ATU again?

    1 answer
    1. One antithrombin unit (ATU) will neutralize one NIH unit of thrombin at 37°C, based on a direct comparison to an NIH thrombin reference standard. There is no International Standard Unit value associated with this product.

      Helpful?

  3. Hi, some years ago we bought H0393-100UN but lost the info sheet. How many mg protein does the single vial contain? Thank you very much, Dario

    1 answer
    1. A link to the general product information sheet is provided on this product page. See the link below to review. You may either print or save a copy as needed.
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/320/022/h0393pis.pdf

      The specific activity will determine the amount of protein in each vial. This value will be listed on the lot-specific Certificate of Analysis. Please see the link below to access the Certificate of Analysis for the currently available lot: https://www.sigmaaldrich.com/certificates/COFA/H0/H0393/H0393-100UN_______SLCK4656__.pdf

      As the specific unit activity is batch dependent, the currently available lot, SLCK4656, has a units/mg activity of 9769. Thus, the 100-unit pack size for this lot contains 0.01024 mg protein.

      Please refer to the product label to verify your lot number. Should a different lot number be needed please navigate to the link https://www.sigmaaldrich.com/techservice, click on "Product Technical Inquiries" under the Products Section with all the required information so that a member of the Technical Service team can reach out to assist further. Thank you.

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