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L6397

Sigma-Aldrich

Concanavaline A from Canavalia ensiformis (Jack bean)

peroxidase conjugate, lyophilized powder

Synonyme(s) :

ConA

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About This Item

Code UNSPSC :
12352202
Nomenclature NACRES :
NA.32

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Source biologique

Canavalia ensiformis (jack bean)

Niveau de qualité

Conjugué

peroxidase conjugate

Forme

lyophilized powder

Technique(s)

blood typing: suitable
fractionation: suitable

Impuretés

carbohydrate, essentially free

Température de stockage

−20°C

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Application

Detects glycoproteins containing α-D-mannose, α-D-glucose when used with appropriate peroxidase substrate
General Western Blot Protocol:
  • Glycoprotein sample size: 500ng
  • Lectin Concentration: 0.1ug/ml

  1. Load samples at 500 ng of glycoprotein per lane
  2. Run 4-20% Bis-Tris SDS page gel
  3. Transfer gel to a PVDF membrane
  4. Block membrane for 1 hr at RT with RIPA buffer (R0278 Sigma)
  5. Incubate HRP lectin at 0.1ug/ml with RIPA buffer for 2 hours at RT
  6. Wash membrane 5 x 5 minutes with 25ml RIPA buffer
  7. Detect using chemiluminescent substrate (CPS1-120)

Actions biochimiques/physiologiques

La Con A n′est pas spécifique au groupe sanguin, mais a une affinité pour les résidus terminaux α-D-mannosyle et α-D-glucosyle. Les ions Ca2+ et Mn2+ sont requis pour l′activité. La Con A se dissocie en dimères à un pH inférieur ou égal à 5,6. Entre pH 5,8 et pH 7,0, la Con A existe sous forme d′un tétramère ; au-dessus de pH 7,0, elle forme des agrégats d′ordre supérieur. Con A possède une activité mitogène, qui dépend de son degré d′agrégation. La succinylation produit une forme dimérique active qui reste dimérique à un pH supérieur à 5,6.

Conditionnement

Package size based on protein content

Définition de l'unité

One unit will form 1 mg purpurogallin in 20 sec from pyrogallol at pH 6.0 at 20 °C.

Forme physique

Lyophilized powder containing tris-citrate buffer salts and trace calcium and manganese

Notes préparatoires

Prepared from peroxidase type VI (P8375), using the method of Wilson and Nakane,[1] which promotes conjugation but prevents the interaction between Con A and peroxidase sugar residues.

Remarque sur l'analyse

L′activité d′agglutination est exprimée en μg/ml et est déterminée à partir de dilutions en série dans un tampon phosphate salin de pH 6,8 contenant du Ca2+ et du Mn2+ à 1 mg par ml de solution. Cette activité est la concentration la plus faible nécessaire pour agglutiner une suspension d′érythrocytes humains à 2 % après 1 h d′incubation à 25 °C.

Pictogrammes

Health hazard

Mention d'avertissement

Danger

Mentions de danger

Classification des risques

Repr. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1

Code de la classe de stockage

11 - Combustible Solids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 3

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable

Équipement de protection individuelle

Eyeshields, Faceshields, Gloves, type P3 (EN 143) respirator cartridges


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