KCQS09

Mistura para RT-qPCR KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™, ROX^™

with ROX for ABI instruments

• Sinônimo(s): RT qPCR, one step RT qPCR, probe PCR
• Código UNSPSC: 41106300
• NACRES: NA.55

Propriedades

• forma: liquid
• uso: sufficient for 500 reactions
• Características: dNTPs included; hotstart
• condição de armazenamento: protect from light
• técnica(s): RT-qPCR: suitable
• cor: light blue
• entrada: purified RNA
• compatibilidade: ABI 5700; ABI 7000; ABI 7300; ABI 7700; ABI 7900 HT ; ABI 7900 HT Fast; ABI 7900; ABI StepOne; ABI StepOnePlus
• método de detecção: probe-based
• Condições de expedição: dry ice
• temperatura de armazenamento: −20°C

Descrição

Descrição geral

A mistura para RT-qPCR KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™ é uma mistura-mestre pronta para uso e altamente sensível para PCR quantitativa por transcrição reversa (RT-qPCR) de moldes de RNA usando produtos químicos para detecção por sondas de hibridização, como sondas de hidrólise de 5′ TaqMan^® em sistemas de PCR em tempo real (vide a seção de compatibilidade com instrumentos para selecionar o reagente adequado para o seu equipamento). A síntese da primeira fita de cDNA e a amplificação de PCR são realizadas no mesmo tubo, sem abertura entre os procedimentos. Ela é ideal para quantificação altamente sensível de vírus de RNA ou alvos de RNA pouco abundantes, bem como estudos de expressão gênica de alto rendimento. O sistema foi otimizado para oferecer máxima eficiência, sensibilidade e especificidade de RT-PCR em volumes de reação reduzidos e ciclos de rápida duração.

A mistura para RT-qPCR KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™ contém todos os componentes necessários para RT-qPCR, exceto molde de RNA e sonda. Ela é compatível com todos os produtos químicos de sonda com marcação dupla. A transcriptase reversa é um M-MLV (vírus da leucemia murina de Moloney) desenvolvido por engenharia genética com atividade reduzida de RNase H e aumento da atividade e estabilidade em temperaturas mais altas. O uso de temperaturas mais altas (50 °C a 55 °C) para a etapa de primeira fita da RT-qPCR de uma etapa proporciona maior especificidade para a hibridização do primer e desagregação da estrutura secundária do RNA que pode interferir na síntese de cDNA.

A mistura para RT-qPCR KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™ é altamente resistente a inibidores de PCR. Um componente-chave da mistura ReadyMix^™ é uma DNA polimerase ultrapura, altamente processiva e termoestável, que é combinada com anticorpos monoclonais com avidez elevada. Isso proporciona uma reação hot start automática extremamente rigorosa que minimiza o potencial de formação de dímeros de primer e outros artefatos de PCR não específicos. A cor azul-claro do corante inerte simplifica a montagem da reação em placas brancas ou transparentes e ajuda a minimizar erros de pipetagem ou mistura. O corante não interfere no desempenho de qPCR nem afeta a estabilidade do produto.

Aplicação

Diferentes sistemas de PCR em tempo real empregam diferentes estratégias para normalização de sinais fluorescentes e correção de variações ópticas de um poço para outro. É fundamental associar o reagente de qPCR adequado ao seu instrumento específico. A mistura para RT-qPCR KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™ não contém um corante de referência interno. Os instrumentos compatíveis incluem:

• 5700 da Applied Biosystems^®
• 7000 da Applied Biosystems
• 7300 da Applied Biosystems
• 7700 da Applied Biosystems
• 7900 da Applied Biosystems
• 7900 HT Fast da Applied Biosystems
• 7900 HT da Applied Biosystems
• StepOnePlus da Applied Biosystems^™
• StepOne da Applied Biosystems^™

Características e benefícios

• Resultados de ensaio em apenas 33 minutos
• Resultados de PCR em tempo real altamente eficientes e sensíveis
• Pouca/nenhuma otimização necessária

Componentes

Tampão de reação 2× contendo dATP, dCTP, dGTP, dTTP, cloreto de magnésio, transcriptase reversa, proteína inibidora de RNase, DNA polimerase hot start, corante de referência ROX, corante azul inerte para qPCR e estabilizantes

embalagem:
500 reações* = 5 x tubos de 1 ml
*Número de reações com base em um volume de 20 ul

Informações legais

Applied Biosystems is a registered trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

KiCqStart is a registered trademark of QIAGEN Beverly Inc.

ROX is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

StepOne is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

StepOnePlus is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.

Informações de segurança

• Código de classe de armazenamento: 10 - Combustible liquids
• Classe de risco de água (WGK): WGK 3
• Ponto de fulgor (°F): Not applicable
• Ponto de fulgor (°C): Not applicable