MAB5290
Anticorpo antirreceptor dopaminérgico D1A, clone SG2-D1a
clone SG2-D1a, Chemicon®, from mouse
Faça loginpara ver os preços organizacionais e de contrato
About This Item
Código UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Produtos recomendados
fonte biológica
mouse
forma do anticorpo
purified immunoglobulin
tipo de produto de anticorpo
primary antibodies
clone
SG2-D1a, monoclonal
reatividade de espécies
mouse, sheep, rat
não deve reagir com
pig, rabbit, human, bovine, canine
fabricante/nome comercial
Chemicon®
técnica(s)
immunohistochemistry: suitable
western blot: suitable
Isotipo
IgG2b
nº de adesão NCBI
nº de adesão UniProt
Condições de expedição
wet ice
modificação pós-traducional do alvo
unmodified
Informações sobre genes
human ... DRD1(1812)
Especificidade
Receptor dopaminérgico D1A, sem reatividade cruzada com o receptor D1B (D5). Foi verificado que a imunorreatividade é específica para o receptor D1A de camundongos e ratos. Não houve reatividade por parte de amostras humanas, de porcos, cães, coelhos, ovelhas e bovinas na análise de western.
Imunogênio
Receptor D1a recombinante de ratos, extremidade carboxila.
Aplicação
Categoria de pesquisa
Neurociência
Neurociência
O anticorpo antirreceptor dopaminérgico D1A, clone SG2-D1a, detecta o nível de dopamina D1A e foi publicado e validado para uso em IH e WB.
Subcategoria de pesquisa
Neurotransmissores e receptores
Neurotransmissores e receptores
Western blot: 1:250-1:500 em frações de membrana de tecido do núcleo caudado de rato não fervidas. Também foi observada reatividade no córtex pré-frontal e temporal. Foi observada uma banda identificada entre 45-66 kDa (Luedtke, 1999).
Imuno-histoquímica: Cortes feitos por vibratomo fixados em PFA 4%, em blocos com soro normal de cabra (NGS, em inglês) 3% e BSA 1% com Triton X-100 0,2%. Os anticorpos primários foram diluídos apenas em PBS com o excesso dos reagentes de bloqueio.
As diluições de trabalho ideais devem ser determinadas pelo usuário final.
PROTOCOLO DE WESTERN BLOT SUGERIDO
Soluções 10X
tampão de transferência 1 litro
Tris 115,3 g
Glicina 24,2 g
[SDS 4 g (pode ser omitido)]
Para uma solução de trabalho 1X: 1 litro
misture 700 ml de água
200 ml MeOH
100 ml 10X TBST de transferência
estoque 1 litro
Tris 1 M pH 7,5 10 ml
NaC 5 M 30 ml
Tween-20 5 ml
1. Faça a corrida do gel SDS-PAGE conforme desejado.
2. Mergulhe a membrana de PVDF (ImmobilonP da Millipore) em metanol 100% por 1-2 minutos para umedecer a membrana.
3. Mergulhe a membrana em tampão de transferência (vide abaixo) até que esteja pronto para montar a transferência do blot (>15 min).
4. Monte o sanduíche de transferência do gel com o blot voltado para o eletrodo positivo.
5. Faça a transferência da proteína do gel para a membrana a 100 volts por 1-2 horas para proteínas de baixo peso molecular ou 65 mA por 16 horas (de um dia para o outro) para transferência completa de proteínas de maior peso molecular.
6. Faça a coloração das bandas transferidas com Chemicon BLOT-FastStain (Número do catálogo 2076).
7. Realize a descoloração com água desionizada.
8. Faça o bloqueio com leite desnatado a 5% (Marvel ou Carnation) em TBS ou PBS de um dia para o outro a 4 °C. O leite desnatado dever ser recém-dissolvido, centrifugado a 10.000 rpm por 10 min e filtrado através de um filtro de vidro (Gelman Acrodisc).
9. Faça a incubação com o primeiro anticorpo de um dia para o outro com uma agitação leve a 4 °C.
As diluições de trabalho e tempos de incubação ideais precisarão ser determinados pelo usuário final.
10. Lave pelo menos 3 x 5 min com TBST. A partir desta etapa, a azida deve ser omitida.
11. Incubação com o anticorpo secundário (anticorpo anticamundongo de cabra conjugado com HRP, por exemplo Número do catálogo Chemicon AP124P, diluído adequadamente) por 1 h em temperatura ambiente.
12. Lave pelo menos 3 x 5 min com TBST.
13. Faça a ECL (quimioluminescência aprimorada) com kit comercial (femtoLUCENT, Número do catálogo Chemicon 2078).
Imuno-histoquímica: Cortes feitos por vibratomo fixados em PFA 4%, em blocos com soro normal de cabra (NGS, em inglês) 3% e BSA 1% com Triton X-100 0,2%. Os anticorpos primários foram diluídos apenas em PBS com o excesso dos reagentes de bloqueio.
As diluições de trabalho ideais devem ser determinadas pelo usuário final.
PROTOCOLO DE WESTERN BLOT SUGERIDO
Soluções 10X
tampão de transferência 1 litro
Tris 115,3 g
Glicina 24,2 g
[SDS 4 g (pode ser omitido)]
Para uma solução de trabalho 1X: 1 litro
misture 700 ml de água
200 ml MeOH
100 ml 10X TBST de transferência
estoque 1 litro
Tris 1 M pH 7,5 10 ml
NaC 5 M 30 ml
Tween-20 5 ml
1. Faça a corrida do gel SDS-PAGE conforme desejado.
2. Mergulhe a membrana de PVDF (ImmobilonP da Millipore) em metanol 100% por 1-2 minutos para umedecer a membrana.
3. Mergulhe a membrana em tampão de transferência (vide abaixo) até que esteja pronto para montar a transferência do blot (>15 min).
4. Monte o sanduíche de transferência do gel com o blot voltado para o eletrodo positivo.
5. Faça a transferência da proteína do gel para a membrana a 100 volts por 1-2 horas para proteínas de baixo peso molecular ou 65 mA por 16 horas (de um dia para o outro) para transferência completa de proteínas de maior peso molecular.
6. Faça a coloração das bandas transferidas com Chemicon BLOT-FastStain (Número do catálogo 2076).
7. Realize a descoloração com água desionizada.
8. Faça o bloqueio com leite desnatado a 5% (Marvel ou Carnation) em TBS ou PBS de um dia para o outro a 4 °C. O leite desnatado dever ser recém-dissolvido, centrifugado a 10.000 rpm por 10 min e filtrado através de um filtro de vidro (Gelman Acrodisc).
9. Faça a incubação com o primeiro anticorpo de um dia para o outro com uma agitação leve a 4 °C.
As diluições de trabalho e tempos de incubação ideais precisarão ser determinados pelo usuário final.
10. Lave pelo menos 3 x 5 min com TBST. A partir desta etapa, a azida deve ser omitida.
11. Incubação com o anticorpo secundário (anticorpo anticamundongo de cabra conjugado com HRP, por exemplo Número do catálogo Chemicon AP124P, diluído adequadamente) por 1 h em temperatura ambiente.
12. Lave pelo menos 3 x 5 min com TBST.
13. Faça a ECL (quimioluminescência aprimorada) com kit comercial (femtoLUCENT, Número do catálogo Chemicon 2078).
forma física
Formato: Purificado
Imunoglobulina purificada. Líquida em tampão fosfato 0,02 M, NaCl 0,25 M, pH 7,6, com 0,1% de azida sódica.
Armazenamento e estabilidade
Mantenha a 2-8 °C em alíquotas não diluídas por até 6 meses após a data de recebimento.
Outras notas
Concentração: Vide a concentração específica do lote no certificado de análise.
Informações legais
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Exoneração de responsabilidade
Exceto quando indicado em contrário em nosso catálogo ou em outros documentos da empresa que acompanham o(s) produto(s), os nossos produtos destinam-se somente ao uso em pesquisa e não devem ser usados para qualquer outra finalidade, o que inclui, dentre outros, usos comerciais não autorizados, usos para diagnóstico in vitro, usos terapêuticos ex vivo ou in vivo, ou qualquer tipo de consumo ou aplicação em humanos ou animais.
Não está encontrando o produto certo?
Experimente o nosso Ferramenta de seleção de produtos.
Código de classe de armazenamento
10 - Combustible liquids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 2
Ponto de fulgor (°F)
Not applicable
Ponto de fulgor (°C)
Not applicable
Certificados de análise (COA)
Busque Certificados de análise (COA) digitando o Número do Lote do produto. Os números de lote e remessa podem ser encontrados no rótulo de um produto após a palavra “Lot” ou “Batch”.
Já possui este produto?
Encontre a documentação dos produtos que você adquiriu recentemente na biblioteca de documentos.
Carlo Cavallotti et al.
Neurochemical research, 29(8), 1499-1504 (2004-07-21)
Dopamine receptors (Dar) were studied as a component of the nervous dopaminergic system in the human dura mater. Dar were stained in several dural zones (vascular, perivascular, intervascular) in different regions (basal, calvarial, tentorial, occipital, frontal, parietal, temporal) of the
Anouk Schrantee et al.
PloS one, 12(2), e0172776-e0172776 (2017-02-28)
Dexamphetamine (AMPH) is a psychostimulant drug that is used both recreationally and as medication for attention deficit hyperactivity disorder. Preclinical studies have demonstrated that repeated exposure to AMPH can induce damage to nerve terminals of dopamine (DA) neurons. We here
Mizuki Maeda et al.
The Journal of veterinary medical science, 83(3), 542-548 (2021-02-02)
Recently, it has been reported that neonicotinoid pesticides (NNs) are transferred from mother to child and are assumed to affect the next generation, but the behavioral effects of NN exposure at different developmental stages have not been investigated. We exposed
Sufang Liu et al.
Molecular neurobiology, 57(10), 4060-4068 (2020-07-13)
Anterior cingulate cortex (ACC) is a critical brain center for chronic pain processing. Dopamine signaling in the brain has been demonstrated to contribute to descending pain modulation. However, the role of ACC dopamine receptors in chronic neuropathic pain remains unclear.
Naoki Yoneda et al.
The Journal of veterinary medical science, 80(4), 634-637 (2018-02-13)
Although neonicotinoid pesticides are expected to have harmful influence on mammals, there is little animal experimental data to support the effect and mechanisms. Since acetylcholine causes the release of dopamine, neonicotinoids may confer a risk of developmental disorders via a
Nossa equipe de cientistas tem experiência em todas as áreas de pesquisa, incluindo Life Sciences, ciência de materiais, síntese química, cromatografia, química analítica e muitas outras.
Entre em contato com a assistência técnica