71205-M

Benzonase^® Nuclease HC

Purity > 90%, Serratia marcescens, buffered aqueous glycerol solution

• Sinônimo(s): Endonuclease
• Número CAS: 9025-65-4
• Número da licença da enzima: 3.1.30.2 (BRENDA, IUBMB)
• Número MDL: MFCD00131010
• Código UNSPSC: 12352202
• NACRES: NA.54

Propriedades

• product name: Nuclease Benzonase^® HC, Pureza > 90%,
• fonte biológica: Serratia marcescens
• Nível de qualidade: 200
• recombinante: expressed in E. coli
• Ensaio: >90% (SDS-PAGE)
• forma: buffered aqueous glycerol solution
• fabricante/nome comercial: Novagen^®
• condição de armazenamento: OK to freeze
• concentração: ≥250 units/μL
• aplicação(ões): research use
• temperatura de armazenamento: −20°C

Descrição

Descrição geral

A nuclease Benzonase^® é uma endonuclease desenvolvida geneticamente a partir de Serratia marcescens. Ela degrada todas as formas de DNA e RNA (fita simples, dupla-fita, linear e circular) e, ao mesmo tempo, não tem atividade proteolítica. É eficaz em uma ampla gama de condições e tem atividade específica excepcionalmente alta. A enzima digere completamente ácidos nucleicos em oligonucleotídeos com terminação 5′-monofosfato com 2 a 5 bases de comprimento (abaixo do limite de hibridização), o que é ideal para remoção de ácidos nucleicos de proteínas recombinantes, possibilitando a conformidade com as diretrizes da FDA para contaminação com ácidos nucleicos. A capacidade da Benzonase de hidrolisar rapidamente os ácidos nucleicos faz desta enzima uma excelente opção para reduzir a viscosidade de forma a diminuir o tempo de processamento e aumentar a produção de proteína. Por exemplo, a enzima é compatível com os reagentes de extração proteica BugBuster^® e PopCulture^® e pode, portanto, ser adicionada juntamente com esses reagentes para eliminar a viscosidade e remover ácidos nucleicos de extratos de E. coli.

A enzima consiste em duas subunidades de 30 kDa cada. Ela é funcional em pH 6 a 10 e entre 0 e 42 °C e requer 1 a 2 mM de Mg²⁺ para ativação. A enzima também é ativa na presença de detergentes iônicos e não iônicos, agentes redutores, PMSF (1 mM), EDTA (1 mM) e ureia (a atividade relativa depende de condições específicas). A atividade é inibida por > 150 mM de cátions monovalentes, > 100 mM de fosfato, > 100 mM de sulfato de amônio ou > 100 mM de guanidina-HCl.

A nuclease Benzonase está disponível em graus ultrapuro (> 99% por SDS-PAGE) e puro (> 90%) em uma concentração padrão de 25 a 29 U/μl e em uma concentração alta (CA) de 250 U/μl. Os dois preparados não contêm protease detectável e têm atividade específica > 1 × 10⁶ U/mg de proteína. O grau de pureza > 99% é testado quanto à presença de endotoxinas e contém < 0,25 UE/1000 unidades. Este produto é fornecido em solução 0,2 μm filtrada em glicerol 50%. Armazenar a –20 °C.

Total de endotoxinas: < 0.25 EU/1,000 units. Purity : > 90% por SDS-PAGE.

Aplicação

Usado para remoção de ácidos nucleicos de amostras proteicas.

Ações bioquímicas/fisiológicas

Digere DNA e RNA nativos ou desnaturados por calor.

Advertência

Toxicidade: Manuseio padrão

Definição da unidade

Uma unidade é definida como a quantidade de enzima que causa uma A²⁶⁰ de 1,0 em 30 minutos, que corresponde à digestão total de 37 μg de DNA.

Informações legais

BUGBUSTER is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

POPCULTURE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Informações de segurança

• Código de classe de armazenamento: 10 - Combustible liquids
• Classe de risco de água (WGK): WGK 2