This form of neutrophil elastase is a salt-free preparation and is supplied in an active form with a specific activity of ≥20 units/mg protein. It is not sterile and has not been tested for cell culture applications. To use it in a cell culture assay, sterile filtration is necessary, which may result in some product retention on the filter.
324681
Elastase, neutrófilo humano
Elastase, Human Neutrophil, CAS 9004-06-2, is a serine protease that degrades elastin, collagen, and proteoglycans
Sinônimo(s):
Elastase, neutrófilo humano
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About This Item
Número CAS:
Número MDL:
Código UNSPSC:
12352204
NACRES:
NA.77
Preço e disponibilidade não estão disponíveis no momento.
Produtos recomendados
Nível de qualidade
descrição
Merck USA index - 14, 3535
Formulário
lyophilized solid
atividade específica
≥20 units/mg protein
fabricante/nome comercial
Calbiochem®
condição de armazenamento
OK to freeze
Condições de expedição
ambient
temperatura de armazenamento
−20°C
Descrição geral
A elastase de neutrófilo humano, nº CAS 9004-06-2, é uma protease de serina que degrada elastina, colágeno e proteoglicanos
Elastase natural de neutrófilo humano. Degrada colágeno, elastina e proteoglicanos. A elastase foi implicada no desenvolvimento de enfisema pulmonar e artrite reumatoide.
Elastase natural de neutrófilo humano. Uma protease de serina que degrada elastina, colágeno e proteoglicanos. Sua superexpressão foi implicada no desenvolvimento de enfisema pulmonar, artrite reumatoide e fibrose cística.
Advertência
Toxicidade: Manuseio padrão (A)
Definição da unidade
Uma unidade é definida como a quantidade de enzima que irá hidrolisar 1,0 µmol de MeO-Suc-Ala-Ala-Pro-Val-pNA (N.º do catálogo 454454) por min a 25 °C, pH 8,0.
forma física
Sem sal.
Nota de preparo
Preparado a partir de sangue negativo para HBsAg e anticorpos contra HIV e HCV, conforme demonstrado por testes certificados.
Reconstituição
Após a reconstituição, separe alíquotas e congele (-20 °C) para armazenamento de longo prazo ou refrigere (4 °C) para armazenamento de curto prazo. As soluções-estoque ácidas são estáveis por até 1 mês a 4 °C ou por até 1 ano a -20 °C.
Reconstituir em acetato de sódio 50 mM, pH 5,5, com NaCl 200 mM ou em outros tampões aquosos. O material é mais ativo perto do pH neutro, mas para manter a estabilidade após a reconstituição, use em um tampão ligeiramente ácido (pH 5,5) para evitar a autólise.
Nota de análise
Banda principal por SDS-PAGE
Outras notas
Siedle, B., et al. 2002. Biorg. Med. Chem.10, 2855.
Junger, W.G., et al. 1992. Biol. Chem. Hoppe-Seyler 373, 691.
Selak, M.A. 1992. Thromb. Haemost.68, 570.
Baugh, R.J., e Travis, J. 1976. Biochemistry15, 836.
Junger, W.G., et al. 1992. Biol. Chem. Hoppe-Seyler 373, 691.
Selak, M.A. 1992. Thromb. Haemost.68, 570.
Baugh, R.J., e Travis, J. 1976. Biochemistry15, 836.
Informações legais
CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Palavra indicadora
Danger
Frases de perigo
Declarações de precaução
Classificações de perigo
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Órgãos-alvo
Respiratory system
Código de classe de armazenamento
11 - Combustible Solids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 3
Ponto de fulgor (°F)
Not applicable
Ponto de fulgor (°C)
Not applicable
Certificados de análise (COA)
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Hi Is this form of neutrophil elastase active and suitable be used directly in a cell assay? And is it sterile ? Mvh Magdalena
1 answer-
Helpful?
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what is the molecular wight of the enzyme ?
1 answer-
Unfortunately, the molecular weight has not been determined for this product. A number of estimates have been reported in the literature. Please see the link below to a publication that may be helpful:
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1016847823175091?via%3DihubHelpful?
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Is this the active form of the enzyme? or does it require activation by cathepsin?
1 answer-
Here are the recommended reconstitution and reaction conditions:
Solubility information:
Reconstitute in 50 mM sodium acetate, pH 5.5, with 200 mM NaCl or in other aqueous buffers. Material is most active near a neutral pH, but to maintain stability upon reconstitution, use in a slightly acidic buffer (pH 5.5) to avoid autolysis.
Following reconstitution, aliquot and freeze (-20°C) for long term storage or refrigerate (4°C) for short-term storage. Acidic stock solutions are stable for up to 1 month at 4°C or for up to 1 year at -20°C.Human Neutrophil Elastase Protocol
1. Dissolve enzyme in reaction buffer: 100 mM Tris-HCl, pH 7.5, 500 mM NaCl.
2. Prepare the substrate stock solution by dissolving Elastase Substrate I (MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-pNA, Cat. No. 324696) at 50 mM in DMSO.
3. Just prior to assay, dilute the substrate stock solution with an equal volume of 200 mM Tris-HCl, pH 8.0. Mix well.
4. Prepare the assay mixture by combining 960 µl of reaction buffer with 40 µl of diluted substrate stock solution.
5. Add enzyme to assay mixture, mix, and incubate at 25°C.
6. Monitor the change in absorbance at 410 nm. Use an ε of 8800 at 410 nm to calculate the hydrolysis of nitroanilide.Helpful?
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