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17-10264

Sigma-Aldrich

Anticorpo ChIPAb+ JHDM1B

from rabbit, purified by affinity chromatography

Sinônimo(s):

JMJD, Lysine (K)-specific demethylase 2B, F-box protein FBL10, [Histone-H3]-lysine-36 demethylase 1B, JEMMA (Jumonji domain, EMSY-interactor, methyltransferase motif) protein, F-box and leucine-rich repeat protein 10, Protein containing CXXC domain 2, Ju

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About This Item

Código UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.32
Preço e disponibilidade não estão disponíveis no momento.

fonte biológica

rabbit

Nível de qualidade

clone

polyclonal

purificado por

affinity chromatography

reatividade de espécies

horse, mouse, pig, human

reatividade da espécie (prevista por homologia)

porcine (based on 100% sequence homology), equine (based on 100% sequence homology), chimpanzee (based on 100% sequence homology), rat (based on 100% sequence homology), rabbit (based on 100% sequence homology)

fabricante/nome comercial

ChIPAb+
Upstate®

técnica(s)

ChIP: suitable
dot blot: suitable
western blot: suitable

nº de adesão NCBI

nº de adesão UniProt

Condições de expedição

dry ice

Informações sobre genes

human ... KDM2B(84678)

Descrição geral

JHDM1B (proteína 1B de desmetilação de histona contendo domínio jumonji) e KDM2B. Devido à presença de um motivo F-box, esta proteína também é conhecida como proteína 10 de repetição F-box/LRR (FBXL 10). Esta proteína funciona como uma histona desmetilase para a lisina 36 da histiona H3 e preferencialmente desmetila lisina dimetilada 3 com atividade fraca ou nenhuma atividade para a lisina 36 H3 mono- e tri-metilada.
Todos os anticorpos ChIPAb+ são validados individualmente para precipitação da cromatina: todos os lotes, sempre. Cada conjunto de anticorpo ChIPAb+ inclui primers de controle (todos os lotes testados por qPCR) para validar biologicamente os seus resultados de IP em um contexto específico para o locus. O protocolo de qPCR e as sequências de primers são fornecidos, o que permite que pesquisadores validem os protocolos de ChIP quando usam nosso anticorpo no seu contexto de cromatina. Cada conjunto também inclui um anticorpo de controle negativo para garantir a especificidade da reação de ChIP.
O conjunto ChIPAb+JHDM1B inclui o anticorpo JHDM1B, uma IgG de coelho normal e primers de controle que amplificam uma região de 110 pb de ChIP Primers, globina β humana. O JHDM1B e os controles negativos são fornecidos em um tamanho de reação escalonável "por ChIP" e podem ser usados para validar funcionalmente a precipitação da cromatina associada ao JHDM1B.

Imunogênio

Peptídeo linear conjugado com KLH correspondente ao JHDM1B humano.

Aplicação

Categoria de pesquisa
Epigenética & Função nuclear
Este conjunto de primers de anticorpos & validados ChIPAb+ JHDM1B -ChIP inclui convenientemente o anticorpo & e os primers de PCR de controle específicos.
Imunoprecipitação de cromatina:
Dados representativos do lote.
A cromatina sonicada preparada a partir de células HeLa (1 X 10E6 equivalentes de células por IP) foi submetida à imunoprecipitação da cromatina usando 2 µl de IgG de coelho normal ou anti-JHDM1B e o kit Magna ChIP A (Cat. # 17-610). A imunoprecipitação bem-sucedida dos fragmentos de DNA associados a JHDM1B foi verificada por qPCR usando ChIP Primers, βglobina humana como locus positivo e iniciadores promotores de βactina como locus negativo. (Figura 2). Os dados são apresentados como porcentagem de entrada de cada amostra IP em relação à cromatina de entrada para cada amplicon e amostra ChIP, conforme indicado.
Consulte o EZ-Magna ChIP A (Cat. # 17-408) ou EZ-ChIP (Cat. # 17-371) protocolo para detalhes experimentais.
Análise de Western blot:
Dados representativos do lote.
O extrato nuclear HeLa foi testado com Anti-JHDM1B (1 µg/ml). As proteínas foram visualizadas usando um anticorpo secundário anti-IgG de coelho de burro conjugado com HRP e um sistema de detecção de quimioluminescência.
A seta indica JHDM1B (~165 kDa). (Figura 3). Uma banda não caracterizada aparece em ~109 kDa em alguns lisados.
Análise imunocitoquímica:
Dados de lote representativos.
Análise fluorescente confocal de células NIH/3T3 e HeLa usando anti-JHDM1B (vermelho). Os filamentos de actina foram rotulados com o corante Alexa Fluor 488 - Faloidina (verde). O núcleo é corado com DAPI (azul). Este anticorpo cora positivamente o núcleo. (Figura 4).
Subcategoria de pesquisa
Histonas

Embalagem

25 ensaios por conjunto. Uso recomendado: 1,4 μg (2 μl) de anticorpo por imunoprecipitação da cromatina (dependendo do contexto biológico).

Qualidade

Imunoprecipitação de cromatina:
Dados representativos do lote.
A cromatina sonicada preparada a partir de células HeLa (1 X 10E6 equivalentes de células por IP) foi submetida à imunoprecipitação da cromatina usando 2 µl de IgG de coelho normal ou anti-JHDM1B e o kit Magna ChIP® A (Cat. # 17-610). A imunoprecipitação bem-sucedida de fragmentos de DNA associados a JHDM1B foi verificada por qPCR usando ChIP primers, βglobina humana (Figura 1).
Consulte o EZ-Magna ChIP A (Cat. # 17-408) ou EZ-ChIP (Cat. # 17-371) protocolo para detalhes experimentais.

Descrição-alvo

aproximadamente 165 kDa observado. Uma banda de peso molecular inferior não caracterizada pode ser observada em alguns lisados.

forma física

Componentes:
anti-JHDM1B (Policlonal de coelho). Um frasco contendo 50 µl de policlonal de coelho purificado em tampão contendo Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4) e NaCl 150 mM e azida sódica a 0,05% antes da adição de glicerol a 30%. Armazene a –20 °C.
Concentração: 0,7 mg/ml
IgG de coelho normal. Um frasco contendo 125 µg de IgG de coelho em 125 µl de tampão de armazenamento contendo azida sódica a 0,05%. Armazene a –20 °C.
Primers de ChIP, β-globina humana. Um frasco contendo 75 μl de cada de primer (5 μM) específico para o promotor da βglobina humana. Armazene a –20 °C.
PARA: AGG ACA GGT ACG GCT GTC ATC
REV: TTT ATG CCC AGC CCT GGC TC
Purificado por afinidade

Armazenamento e estabilidade

Estável por 1 ano a -20 °C a partir da data de recebimento. Recomendações de manuseio: após o primeiro descongelamento e antes de remover a tampa, centrifugue o frasco e misture delicadamente a solução. Separe as alíquotas em tubos de microcentrífuga e armazene a -20 °C. Evite ciclos repetidos de congelamento/descongelamento, pois podem danificar a IgG e afetar o desempenho do produto.
Observação: Variabilidade nas temperaturas do congelador abaixo de –20 °C pode provocar o congelamento de soluções contendo glicerol durante o armazenamento.

Nota de análise

Controle
Inclui IgG de coelho normal e primers específicos para βglobina humana.

Outras notas

Concentração: Vide a concentração específica do lote no certificado de análise.

Informações legais

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Exoneração de responsabilidade

Exceto quando indicado em contrário em nosso catálogo ou em outros documentos da empresa que acompanham o(s) produto(s), os nossos produtos destinam-se somente ao uso em pesquisa e não devem ser usados para qualquer outra finalidade, o que inclui, dentre outros, usos comerciais não autorizados, usos para diagnóstico in vitro, usos terapêuticos ex vivo ou in vivo, ou qualquer tipo de consumo ou aplicação em humanos ou animais.

Código de classe de armazenamento

12 - Non Combustible Liquids

Ponto de fulgor (°F)

Not applicable

Ponto de fulgor (°C)

Not applicable


Certificados de análise (COA)

Busque Certificados de análise (COA) digitando o Número do Lote do produto. Os números de lote e remessa podem ser encontrados no rótulo de um produto após a palavra “Lot” ou “Batch”.

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