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Citologia e citodiagnóstico

Coloração citológica diagnóstica de amostra de exame colpocitológico

Citologia é o estudo da estrutura e função das células, ao passo que citodiagnóstico é o uso da citologia como ferramenta diagnóstica. O citodiagnóstico se baseia em colorações altamente específicas e protocolos bem estabelecidos para facilitar a identificação de anormalidades nas células com microscopia. No citodiagnóstico humano, existem duas áreas da citologia (ginecológica e não ginecológica) em que as amostras são examinadas quanto à presença de células malignas e pré-malignas. 

Amostragem citológica

No citodiagnóstico, as células são extraídas da massa de tecido ou líquido da amostra e são transferidas para uma lâmina citológica, coradas, examinadas e avaliadas. A estrutura do tecido original fica irreconhecível e não pode ajudar no processo de avaliação. Materiais da amostra, como escarro, urina, efusões de cavidades corporais e material de lavagem são centrifugados e o sedimento é posteriormente usado para fazer um esfregaço em uma lâmina microscópica. Biópsia aspirativa por agulha fina (BAAF) ou auxiliada por imagem - o material da mama, tireoide, linfonodos, próstata, líquido cefalorraquidiano e de outros locais é cuidadosamente espalhado em lâminas. Dependendo do método de coloração, as amostras em esfregaços são imediatamente fixadas (coloração de Papanicolau) ou completamente secas ao ar antes da coloração hematológica ou qualquer outra coloração. 

Fixação para citologia

Coloração citológica diagnóstica de amostra de exame colpocitológico

Um pré-requisito para diagnóstico citológico exato é a fixação perfeita do material de amostra. As amostras devem ser fixadas imediatamente após a coleta para evitar que as células ressequem e encolham. A fixação imediata retém as características estruturais da amostra para coloração e diferenciação nítidas. Artefatos de coloração podem interferir no diagnóstico, caso as amostras sejam fixadas tarde demais. O método clássico de fixação é a imersão da lâmina microscópica em etanol a 96% durante 30 minutos. Uma maneira mais eficaz é fixar as células com um fixador em spray. Fixadores em spray são soluções alcoólicas aquosas que contêm polietilenoglicol (PEG). São adequados para todos os tipos de materiais citológicos corados pelo método de Papanicolau.

Métodos de coloração para citodiagnóstico

A escolha do corante depende amplamente da origem da amostra e da experiência e preferência do analista. Por exemplo, a técnica de coloração segundo Papanicolau não é usada apenas para esfregaços ginecológicos, como exame colpocitológico, mas também é rotineiramente utilizada para material não ginecológico, como escarro, líquido cefalorraquidiano, líquido sinovial e urina. A coloração de Giemsa é amplamente usada para amostras de BAAF de linfonodos. A coloração de Pappenheim é usada para sedimentos urinários, efusões, material de lavagem brônquica e material de BAAF de vários locais (p. ex., mama, tireoide, líquido cefalorraquidiano). A coloração de Wright é um corante hematológico que pode ser usado para diferenciação dos tipos de células hematológicas. As células coradas são preparadas para microscopia usando desidratação em álcool/xileno, clarificação e emblocamento. Além dos métodos de coloração manuais, sistemas de coloração mecânicos e automatizados podem ser utilizados para preparar grandes números de amostras. Um sistema de avaliação totalmente automatizado pode ser usado para varredura, em que as amostras coradas são avaliadas, células ou grupos de células anormais são marcados e as imagens são salvas em uma galeria para recuperação e investigação mais a fundo.

Interpretação citodiagnóstica

O exame microscópico do material pode ser realizado imediatamente, dependendo das técnicas de fixação, preparo e coloração empregadas. Essa característica faz com que o citodiagnóstico seja adequado para varreduras de grande volume, como varreduras cervicais. Um ponto crucial no citodiagnóstico é que os resultados das investigações citológicas se relacionam diretamente com o local de onde a amostra foi coletada. Para fins de eficiência, as técnicas de amostragem e preparo devem ser dominadas e controladas por completo. Os controles adequados devem ser usados com cada aplicação para evitar um resultado incorreto.

O sucesso e a eficiência da citologia diagnóstica são medidos por sua capacidade de detectar as alterações iniciais no estado da doença (sensibilidade) e, ao mesmo tempo, evitar simultaneamente diagnósticos falso-positivos (especificidade). A sensibilidade e a especificidade dependem da coleta, fixação, coloração e interpretação corretas da amostra. Juntamente com as técnicas de imageamento, como imagens por radiografia, tomografia computadorizada (TC), ultrassonografia, tomografia de ressonância nuclear e tomografia por emissão de pósitrons (PET); a citologia é uma parte indispensável do diagnóstico. 


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