HRMFASTKB

KAPA HRM FAST

• Synonym(e): PCR
• UNSPSC-Code: 41106300
• NACRES: NA.55

Eigenschaften

• Haltbarkeit: ≤12 mo.
• Verpackung: kit of 1 mL (100 x 20 μL rxn; KK4201); kit of 10 mL (1000 x 20 μL rxn; KK4203); kit of 5 mL (500 x 20 μL rxn; KK4202)
• Hersteller/Markenname: Roche
• Methode(n): PCR: suitable
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Die HRM-Analyse (hochauflösende Schmelze) ist ein Verfahren für eine schnelle Post-Polymerase-Kettenreaktionsanalyse (Post-PCR) mit hohem Durchsatz für genetische Mutationen oder Veränderungen der Nukleinsäuresequenzen. Der KAPA HRM FAST Master Mix enthält ein neuartiges DNA-Polymerase- und Puffersystem sowie einen EvaGreen^® Sättigungsfarbstoff, der für eine maximale Unterscheidung zwischen Sequenzvarianten optimiert wurde. Das KAPA HRM FAST PCR Kit ist ein benutzerfreundlicher und gebrauchsfertiger Master-Mix.

Anwendung

KAPA HRM FAST wird für Folgendes verwendet:

• Einzelnukleotidpolymorphismus(SNP)-Genotypisierung
• HRM-Assay (hochauflösende Schmelze) – Mutationserkennung (Gen-Scanning)
• Heterozygotie-Screening
• DNA-Fingerprinting
• DNA-Methylierungsanalyse
• Amplicon- oder Allel-Amplifikation
• Genomeditierungs-Screening für Einzelkolonien

Leistungsmerkmale und Vorteile

Maximieren Sie die Unterschiede der Sequenzvarianten

• Zur Maximierung der Unterschiede beim Schmelzverhalten entwickelt.
• Verbesserte Sensitivität.

Weisen Sie SNP vom Typ IV genau nach

• 95 % Erkennungsrate, selbst wenn die Konkurrenz versagt.
• Kürzere Reaktionszeiten.

Schnell von der Zelle zu SNP

• Ermöglicht die Extraktion, Amplifikation und HRM in weniger als 2 Stunden, wenn es in Kombination mit dem KAPA-Express-Extraktionskit verwendet wird.

Einige Anmerkungen:

• KAPA HRM FAST PCR-Kits enthalten EvaGreen, einen sättigenden Doppelstrang-DNA-Farbstoff, der für die HRM-Analyse optimiert wurde.
• Der 2X Master Mix enthält ein Puffersystem, das für die HRM-Analyse optimiert wurde sowie eine neuartige DNA-Polymerase, um die Amplifikationseffizienz zu verbessern. Der Master Mix enthält kein MgCl₂.
• Template-DNA aus verschiedenen Proben sollte mit demselben Verfahren hergestellt und in demselben Puffer (idealerweise 10 mM Tris-HCl, pH-Wert 8,5) eluiert oder verdünnt werden.
• Die optimale Menge Template-DNA beträgt von 20 ng bis 100 pg je 20 μl Reaktionsmischung.
• Um die Sensitivität des Assays zu maximieren, sollte die geringste Konzentration von Primern, die verwendet werden kann, ohne die Effizienz der PCR-Reaktion zu beeinträchtigen, verwendet werden (0,1 μM–0,3 μM je Primer).
• Die Konzentration von MgCl₂ kann die Anlagerung von Heterozygoten und das Schmelzen der Amplikone während der HRM stark beeinflussen. Die empfohlene Ausgangskonzentration beträgt 2,5 mM MgCl₂ und kann nach Bedarf angepasst werden. Eine Endkonzentration von 1,5–3,5 mM MgCl₂ wird für die meisten HRM-Assays empfohlen.
• Die Verstärkungseinstellungen der Instrumente müssen mit KAPA HRM FAST PCR-Kits eventuell auf eine maximale Sensitivität angepasst werden.

Qualität

Alle Kit-Komponenten werden einer strengen funktionellen Qualitätskontrolle unterzogen, sind frei von nachweisbarer kontaminierender Exo- und Endonukleaseaktivität und erfüllen strenge Anforderungen hinsichtlich der DNA-Kontamination.

Angaben zur Herstellung

Stellen Sie stets sicher, dass die Komponenten vor der Verwendung vollständig aufgetaut und gut gemischt sind. KAPA HRM FAST qPCR Master Mix (2X) wird auch bei einer Lagerung bei -20 °C möglicherweise nicht vollständig durchfrieren.
Der EvaGreen-Farbstoff in KAPA HRM FAST qPCR Master Mix (2X) ist lichtempfindlich. Direkte Lichteinwirkung über einen längeren Zeitraum führt zum Verlust der Intensität des Fluoreszenzsignals.
KAPA HRM FAST qPCR Master Mix (2X) bleibt über 30 Gefrier-/Auftau-Zyklen hinweg stabil. Stellen Sie bei Nichtgebrauch der Reagenzien sicher, dass diese bei -20 °C vor Lichteinwirkung geschützt gelagert werden. Wenn sie vor Licht geschützt sind, sind die Reagenzien im Dunkeln bei 4 °C mindestens eine Woche lang stabil und können bei dieser Temperatur für den baldigen Gebrauch unter der Voraussetzung gelagert werden, dass sie nicht mit Mikroben und/oder Nukleasen kontaminiert werden.

Sonstige Hinweise

Nur für Forschungszwecke. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.

Rechtliche Hinweise

Bestimmte Anwendungen dieses Produkts sind durch Patente abgedeckt, die an andere Parteien als Kapa Biosystems vergeben wurden und in bestimmten Ländern anwendbar sind. Der Kauf dieses Produkts beinhaltet keine Lizenz zur Durchführung dieser Anwendungen. Je nach Anwendung und Land, in dem dieses Produkt verwendet wird, kann es für Anwender dieses Produkts daher erforderlich sein, eine Patentlizenz zu erwerben.

Die Verwendung dieses Produkts unterliegt einem oder mehreren der folgenden US-Patente und entsprechenden Patentansprüchen außerhalb der USA: 5.994.056. 6.171.785. und 5.928.907 (Ansprüche 12-24, 27-28). Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den oben genannten Patentansprüchen für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produktes für eigene interne Forschungsanwendungen des Käufers. Es wird weder ausdrücklich noch implizit oder durch Rechtsverwirkung ein Rechtsanspruch unter anderen Patentsprüchen (wie z. B. Vorrichtungs- oder Systemansprüche in US-Patent Nr. 6.814.934) oder ein Rechtsanspruch zur Erbringung kommerzieller Leistungen jeglicher Art übertragen, einschließlich, aber nicht beschränkt auf, das Berichten der Ergebnisse aus den Aktivitäten des Käufers gegen Entgelt oder andere kommerzielle Gegenleistungen. Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke vorgesehen. Diagnostische Anwendungen nach Roche-Patentansprüchen erfordern eine gesonderte Lizenz von Roche. Weitere Informationen über den Erwerb von Lizenzen erhalten Sie vom Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California, 94404, USA.

Kapa Biosystems Inc. ist von Biotium Inc. dazu lizensiert, Reagenzien mit EvaGreen-Farbstoff zur Verwendung in Echtzeit-PCR nur für Forschungszwecke zu vertreiben.

Lizensiert unter den US-Patenten Nr. 5.338.671 und 5.587.287 und den entsprechenden Patenten in anderen Ländern.

Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Lizenz unter den spezifischen Ansprüchen der US-Patente Nr. 6.174.670, 6.569.627 und 5.871.908, die der University of Utah Research Foundation oder Evotec Biosystems GmbH erteilt wurden und für Idaho Technology, Inc. und Roche Diagnostics GmbH lizensiert sind, zur Verwendung nur der beigefügten Menge des Produkts gemäß der spezifizierten Protokolle. Es wird kein Recht übertragen, ausdrücklich, implizit oder durch Rechtsverwirkung, Instrumente oder Systeme unter einem Anspruch der US-Patente Nr. 6.174.670, 6.569.627 und 5.871.908 zu verwenden, abgesehen von der hierin enthaltenen Produktmenge.

EvaGreen ist eine eingetragene Marke von Biotium, Inc.
Rotor-Gene ist eine Marke von Corbett Research.

EvaGreen is a registered trademark of Kapa Biosystems

Nur Kit-Komponenten

• KAPA HRM FAST MasterMix (2X)
• KAPA MgCl₂ 25 mM

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash