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Roche

KAPA SYBR® FAST One-Step

suitable for RT-PCR, 2 ×, Universal

Synonym(e):

SYBR, qPCR

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise
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About This Item

UNSPSC-Code:
41106300
NACRES:
NA.55

Qualitätsniveau

100

Verwendung

sufficient for 100 reactions
 sufficient for 1000 reactions
 sufficient for 500 reactions

Haltbarkeit

≤6 mo.

Leistungsmerkmale

dNTPs included: no
hotstart: no

Verpackung

kit of 1 mL (100 x 20 μL rxn; KK4650)
kit of 10 mL (1000 x 20 μL rxn; KK4652)
kit of 5 mL (500 x 20 μL rxn; KK4651)

Hersteller/Markenname

Roche

Konzentration

2 ×

Methode(n)

RT-PCR: suitable
qPCR: suitable

Aufnahme

purified DNA

Kompatibilität

for use with Agilent Mx3000P
for use with Agilent Mx3005P
for use with Agilent Mx4000
for use with Applied Biosystems® 5700
for use with Applied Biosystems® 7000
for use with Applied Biosystems® 7300
for use with Applied Biosystems® 7500
for use with Applied Biosystems® 7700
for use with Applied Biosystems® 7900HT
for use with Applied Biosystems® ViiA 7
for use with QuantStudio™
for use with StepOne™
for use with StepOnePlus™

Nachweisverfahren

SYBR® Green

Lagertemp.

−20°C

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Allgemeine Beschreibung

Die KAPA SYBR FAST One-Step qRT-PCR-Kits wurden für eine optimale Leistung unter strengen Echtzeit-PCR-Reaktionsbedingungen entwickelt und zeigen enorme Verbesserungen der Sensitivität, Spezifität, Reaktionseffizienz und Fluoreszenz. Das Kit wurde für die schnelle RNA-Bestimmung in einem einzigen Schritt und mit einem einzigen Röhrchen optimiert. Die experimentelle Varianz und Kontamination wird dabei mit einem praktischen Echtzeit-PCR-Protokoll reduziert.

KAPA SYBR FAST One-Step qRT-PCR-Kits enthalten M-MuLV reverse Transkriptase, RNase-Hemmer und eine neuartige DNA-Polymerase, die durch gerichtete Evolution weiterentwickelt wurde.

Anwendung

KAPA SYBR® FAST-One-Step
  • Genexpressions-Analyse
  • Detektion von Genen mit niedriger Kopienzahl
  • Microarray-Validierung in der microRNA-Forschung
  • Gen-Knock-Down-Validierungen
  • Echtzeit-qRT-PCR (quantitative Reverse-Transkriptase-PCR)
  • RNAi- und miRNA-Forschung

Leistungsmerkmale und Vorteile

Höhere Signal- und Reaktionseffizienz
  • Konstant höhere Amplifikationseffizienz für eine genaue Echtzeit-PCR.
  • Höhere Fluoreszenz, frühere Cq-Werte und verbesserte Reaktionseffizienz

Amplifikation über einen weiten Bereich von Ziellängen
  • Robuste Leistung unabhängig von der Amplikon-Größe
  • Verbesserte Sensitivität und Reproduzierbarkeit
  • Zuverlässige Abfragen über einen weiten Bereich von RNA-Template-Konzentrationen.

Kurzanmerkungen:
  • Dieses Kit enthält wildtypisches M-MuLV und ein technisch hergestelltes Enzym, das für die qPCR unter Verwendung der SYBR Green-I-Farbstoffchemie optimiert wurde.
  • Der 2X-Master-Mix enthält einen proprietären Puffer. In Kombination mit dem neuartigen Enzym wird die Amplifikationseffizienz sowohl für GC- als auch für AT-reiche Targets verbessert.
  • Nur mit genspezifischen Primern für Ein-Schritt-qRT-PCR.
  • Eine optimale cDNA-Synthese wird bei 42° C in 5 Minuten erreicht.
  • 3 Minuten bei 95° C sind ausreichend für RT-Inaktivierung und DNA-Polymerase-Aktivierung.
  • Für einen 3-Schritt-Zyklus sind 20 s für das Primer-Annealing und 1 s für die Extension/Datenerfassung bei 72 °C zu verwenden.
  • Das Reaktionsvolumen darf 25 μL nicht überschreiten.

Qualität

Alle Kit-Komponenten werden einer strengen funktionellen Qualitätskontrolle unterzogen, sind frei von nachweisbarer kontaminierender Exo- und Endonukleaseaktivität und erfüllen strenge Anforderungen hinsichtlich der DNA-Kontamination.

Angaben zur Herstellung

Stellen Sie stets sicher, dass die Komponenten vor der Verwendung vollständig aufgetaut und gut gemischt sind. KAPA SYBR® FAST qPCR-Master-Mix (2X) gefriert möglicherweise auch bei einer Lagerung von -20 °C nicht vollständig. Der KAPA RT-Mix ist temperaturempfindlich und sollte bei -20° C gelagert und während der Verwendung auf Eis gelegt werden.

Der im KAPA SYBR FAST qPCR-Master-Mix (2X) enthaltene Farbstoff SYBR Green I und die ROX-/Fluorescein-Farbstoffe (je nach Kit-Konfiguration) sind lichtempfindlich. Direkte Lichteinwirkung über einen längeren Zeitraum führt zum Verlust der Intensität des Fluoreszenzsignals.

KAPA SYBR FAST qPCR Master Mix (2X) bleibt über 30 Gefrier-/Auftauzyklen hinweg stabil. Stellen Sie bei Nichtgebrauch der Reagenzien sicher, dass diese bei -20 °C vor Lichteinwirkung geschützt gelagert werden. Bei lichtgeschützter Lagerung sind die Reagenzien bei 4 °C für mindestens eine Woche lang stabil und können bei dieser Temperatur für den baldigen Gebrauch unter der Voraussetzung gelagert werden, dass sie nicht mit Mikroben und/oder Nukleasen kontaminiert werden.

Sonstige Hinweise

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Rechtliche Hinweise

Applied Biosystems is a registered trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries
QuantStudio is a trademark of IROA Technologies LLC
SYBR is a registered trademark of Life Technologies
StepOne is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries
StepOnePlus is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

Nur Kit-Komponenten

Produkt-Nr.
Beschreibung
  • KAPA RT Mix
  • dUTP
  • KAPA SYBR® FAST DNA Polymerase
  • reaction buffer
  • dNTPs
  • SYBR® Green I dye
  • MgCl2 2.5 mM

Piktogramme

Health hazard
GHS08

Signalwort

Warning

H-Sätze

H371

Gefahreneinstufungen

STOT SE 2

Lagerklassenschlüssel

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

Flammpunkt (°F)

does not flash

Flammpunkt (°C)

does not flash

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