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KAPA SYBR^™ FAST One-Step

suitable for RT-PCR, 2 ×, Universal

• Synonym(e): SYBR, qPCR
• NACRES: NA.55
• UNSPSC Code: 41106300

Eigenschaften

• usage: sufficient for 100 reactions, sufficient for 1000 reactions, sufficient for 500 reactions
• shelf life: ≤6 mo.
• feature: dNTPs included: no, hotstart: no
• packaging: kit of 1 mL (100 x 20 μL rxn; KK4650), kit of 10 mL (1000 x 20 μL rxn; KK4652), kit of 5 mL (500 x 20 μL rxn; KK4651)
• manufacturer/tradename: Roche
• concentration: 2 ×
• technique(s): RT-PCR: suitable, qPCR: suitable, whole genome amplification: suitable
• input: purified DNA
• compatibility: for use with Agilent Mx3000P, for use with Agilent Mx3005P, for use with Agilent Mx4000, for use with Applied Biosystems^® 5700, for use with Applied Biosystems^® 7000, for use with Applied Biosystems^® 7300, for use with Applied Biosystems^® 7500, for use with Applied Biosystems^® 7700, for use with Applied Biosystems^® 7900HT, for use with Applied Biosystems^® ViiA 7, for use with QuantStudio^™, for use with StepOne^™, for use with StepOnePlus^™
• detection method: SYBR^™ Green
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

General description

Die KAPA SYBR FAST One-Step qRT-PCR-Kits wurden für eine optimale Leistung unter strengen Echtzeit-PCR-Reaktionsbedingungen entwickelt und zeigen enorme Verbesserungen der Sensitivität, Spezifität, Reaktionseffizienz und Fluoreszenz. Das Kit wurde für die schnelle RNA-Bestimmung in einem einzigen Schritt und mit einem einzigen Röhrchen optimiert. Die experimentelle Varianz und Kontamination wird dabei mit einem praktischen Echtzeit-PCR-Protokoll reduziert.

KAPA SYBR FAST One-Step qRT-PCR-Kits enthalten M-MuLV reverse Transkriptase, RNase-Hemmer und eine neuartige DNA-Polymerase, die durch gerichtete Evolution weiterentwickelt wurde.

Application

KAPA SYBR^™ FAST-One-Step

• Genexpressions-Analyse
• Detektion von Genen mit niedriger Kopienzahl
• Microarray-Validierung in der microRNA-Forschung
• Gen-Knock-Down-Validierungen
• Echtzeit-qRT-PCR (quantitative Reverse-Transkriptase-PCR)
• RNAi- und miRNA-Forschung

Features and Benefits

Höhere Signal- und Reaktionseffizienz

• Konstant höhere Amplifikationseffizienz für eine genaue Echtzeit-PCR.
• Höhere Fluoreszenz, frühere Cq-Werte und verbesserte Reaktionseffizienz

Amplifikation über einen weiten Bereich von Ziellängen

• Robuste Leistung unabhängig von der Amplikon-Größe
• Verbesserte Sensitivität und Reproduzierbarkeit
• Zuverlässige Abfragen über einen weiten Bereich von RNA-Template-Konzentrationen.

Kurzanmerkungen:

• Dieses Kit enthält wildtypisches M-MuLV und ein technisch hergestelltes Enzym, das für die qPCR unter Verwendung der SYBR Green-I-Farbstoffchemie optimiert wurde.
• Der 2X-Master-Mix enthält einen proprietären Puffer. In Kombination mit dem neuartigen Enzym wird die Amplifikationseffizienz sowohl für GC- als auch für AT-reiche Targets verbessert.
• Nur mit genspezifischen Primern für Ein-Schritt-qRT-PCR.
• Eine optimale cDNA-Synthese wird bei 42° C in 5 Minuten erreicht.
• 3 Minuten bei 95° C sind ausreichend für RT-Inaktivierung und DNA-Polymerase-Aktivierung.
• Für einen 3-Schritt-Zyklus sind 20 s für das Primer-Annealing und 1 s für die Extension/Datenerfassung bei 72 °C zu verwenden.
• Das Reaktionsvolumen darf 25 μL nicht überschreiten.

Preparation Note

Stellen Sie stets sicher, dass die Komponenten vor der Verwendung vollständig aufgetaut und gut gemischt sind. KAPA SYBR^™ FAST qPCR-Master-Mix (2X) gefriert möglicherweise auch bei einer Lagerung von -20 °C nicht vollständig. Der KAPA RT-Mix ist temperaturempfindlich und sollte bei -20° C gelagert und während der Verwendung auf Eis gelegt werden.

Der im KAPA SYBR FAST qPCR-Master-Mix (2X) enthaltene Farbstoff SYBR Green I und die ROX-/Fluorescein-Farbstoffe (je nach Kit-Konfiguration) sind lichtempfindlich. Direkte Lichteinwirkung über einen längeren Zeitraum führt zum Verlust der Intensität des Fluoreszenzsignals.

KAPA SYBR FAST qPCR Master Mix (2X) bleibt über 30 Gefrier-/Auftauzyklen hinweg stabil. Stellen Sie bei Nichtgebrauch der Reagenzien sicher, dass diese bei -20 °C vor Lichteinwirkung geschützt gelagert werden. Bei lichtgeschützter Lagerung sind die Reagenzien bei 4 °C für mindestens eine Woche lang stabil und können bei dieser Temperatur für den baldigen Gebrauch unter der Voraussetzung gelagert werden, dass sie nicht mit Mikroben und/oder Nukleasen kontaminiert werden.

Analysis Note

Alle Kit-Komponenten werden einer strengen funktionellen Qualitätskontrolle unterzogen, sind frei von nachweisbarer kontaminierender Exo- und Endonukleaseaktivität und erfüllen strenge Anforderungen hinsichtlich der DNA-Kontamination.

Other Notes

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Legal Information

SYBR is a trademark of Thermo Fisher Scientific or its subsidiaries

Applied Biosystems is a registered trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

QuantStudio is a trademark of IROA Technologies LLC

StepOne is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

StepOnePlus is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

Nur Kit-Komponenten

• KAPA RT Mix
• dUTP
• KAPA SYBR^™ FAST DNA Polymerase
• reaction buffer
• dNTPs
• SYBR^™ Green I dye
• MgCl₂ 2.5 mM

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS08
• signalword: Warning
• hcodes: H371
• pcodes: P260 - P264 - P270 - P308 + P311 - P405 - P501
• Hazard Classifications: STOT SE 2
• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1
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