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FastStart Universal SYBR Green Master (Rox)

• UNSPSC-Code: 41106300
• NACRES: NA.55

Eigenschaften

• Verwendung: sufficient for 200 reactions; sufficient for 2000 reactions
• Qualitätsniveau: 100
• Leistungsmerkmale: dNTPs included: no; hotstart
• Hersteller/Markenname: Roche
• Verpackung: pkg of 200 x 50 μL reactions (04913850001); pkg of 2000 x 50 μL reactions (04913914001)
• Methode(n): RT-qPCR: suitable; qPCR: suitable
• Aufnahme: purified DNA
• Nachweisverfahren: probe-based

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

FastStart^™ Universal SYBR^® Green Master (Rox) ist ein gebrauchsfertiges Heißstart-Reaktionsgemisch für die qPCR und RT-qPCR auf allen Echtzeit-PCR-Systemen, die eine Normalisierung mit ROX erfordern.

SYBR^® Green I ist ein DNA-doppelstrangspezifischer Farbstoff. Während jeder Phase der DNA-Synthese bindet der im Reaktionsgemisch enthaltene SYBR^® Green I-Farbstoff an amplifizierte PCR-Produkte. Das Amplikon kann anhand seiner Fluoreszenz detektiert werden.

Heißstart-Protokolle verbessern die Spezifität, Sensitivität und Ausbeute der PCR erheblich. Hitzelabile Blockiergruppen auf einigen der Aminosäurereste der FastStart^™ Taq DNA-Polymerase inaktivieren das modifizierte Enzym bei Raumtemperatur (+15 bis +25 °C). Daher findet während der Zeit, in der Primer unspezifisch binden können, keine Verlängerung statt. FastStart^™ Taq DNA-Polymerase wird durch Entfernung der Blockiergruppen bei hohen Temperaturen (z.B. einem Vorinkubationsschritt bei +95 °C) aktiviert.

Anwendung

FastStart^™ Universal SYBR^® Green Master (Rox) kann zur Amplifikation und Detektion jedes DNA- oder cDNA-Targets, einschließlich GC- oder AT-reicher Targets, verwendet werden.
Durch Kombination dieses Mastermixes mit dem Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit (Roche) erzielen Sie ausgezeichnete Ergebnisse bei der zweistufigen qRT-PCR.
FastStart^™ Universal SYBR^® Green Master (Rox) wird in der qRT-PCR und qPCR eingesetzt

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Verbesserte PCR-Sensitivität und -Spezifität.

Reduziert die Bildung unspezifischer Amplifikationsprodukte auf ein Minimum.

• Keine Überbewertung von qPCR-Ergebnissen.

Eliminiert unspezifische Amplifikationsprodukte und Primer-Dimere, welche die Menge an gebundenem quantifizierten SYBR-Grün I erhöhen.

• Ermöglicht die Amplifikation und Detektion zahlreicher DNA- und cDNA-Targets.

Amplifiziert Fragmente bis zu einer Länge von 500 Basenpaaren, einschließlich GC- oder AT-reicher Targets.

• Zeit- und Arbeitsersparnis bei der qPCR-Vorbereitung.

Eliminiert das Mischen von Komponenten, die Titration von MgCl₂ und die Durchführung anderer zeitaufwändiger Optimierungsschritte.

• Keine falsch-positiven Ergebnisse infolge von Verschleppungskontaminationen.

Durch Verwendung dieses dUTP-haltigen Gemischs mit Uracil-DNA-Glycosylase wird eine Verschleppung kontaminierender DNA aus vorhergehenden PCR-Reaktionen eliminiert.

Komponenten

FastStart Universal SYBR Green Master (Rox), 2x konzentrierter Master-Mix mit FastStart Taq DNA-Polymerase, Reaktionspuffer, Nukleotiden (dATP, dCTP, dGTP, dUTP), SYBR-Grün I und einem Referenzfarbstoff.

Qualität

Funktionstest: Jede Charge wird unter Anwendung von drei Vorlagen – einer GC-reichen, einer AT-reichen und einer langen (etwa 440 Basenpaare) Vorlage – einer qPCR-Leistungsprüfung unterzogen.

Sonstige Hinweise

Nur für die Life Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Rechtliche Hinweise

FastStart is a trademark of Roche

SYBR is a registered trademark of Life Technologies

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash