DNALIG-RO

T4-DNA-Ligase

solution, from Escherichia coli(NM 989), suitable for activity assay

• Synonym(e): DNA-Ligase, T4
• UNSPSC-Code: 12352204

Eigenschaften

• Biologische Quelle: Escherichia coli (NM 989)
• Qualitätsniveau: 100
• Rekombinant: expressed in E. coli
• Beschreibung: recombinant form of the enzyme from T4 phage
• Form: solution
• Spezifische Aktivität: ~3000 units/mg protein
• Verpackung: pkg of 100 U (10481220001 [1 U/μl]); pkg of 500 U (10716359001 [1 U/μl]); pkg of 500 U (10799009001 [5 U/μl])
• Hersteller/Markenname: Roche
• Parameter: 4-22 °C optimum reaction temp.
• Methode(n): activity assay: suitable
• Optimaler pH-Wert: 7.2-7.8
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

T4-DNA-Ligase katalysiert die Bildung von Phosphodiesterbindungen zwischen benachbarten 3′-Hydroxyl- und 5′-Phosphat-Enden in doppelsträngiger DNA. Außerdem werden Einzelstrangbrüche in doppelsträngiger DNA durch T4-DNA-Ligase geschlossen.

Inhalt
T4-DNA-Ligase, geliefert mit 10x konzentriertem Ligationspuffer, der ATP enthält.

Spezifität

Hitzeinaktivierung: Das Enzym kann durch Erhitzen (65 °C, 10 Minuten) inaktiviert werden.

Anwendung

Ligation von DNA-Fragmenten mit klebrigen oder glatten Enden.

Qualität

Qualität

Nach Maßgabe der aktuellen Qualitätskontrollverfahren auf die Abwesenheit von Desoxyribonukleasen und Exonukleasen getestet.

Einheitendefinition

Eine Einheit T4-DNA-Ligase ist die Menge an Enzymaktivität, die 1 nmol ³²P aus Pyrophosphat bei +37 °C in 20 Minuten in Norit-absorbierbares Material umwandelt. Eine Einheit entspricht 0,2 U, bestimmt im Exonuklease-III-Resistenzassay. Verdünnungspuffer: 50 mM Tris-HCl, 10 mM Dithioerythritol, Rinderserumalbumin, 500 μg/ml, pH 7,6 (+25 °C).

Volumenaktivität: 1 x 10³ U/ml; 5 x 10³ U/ml

Angaben zur Herstellung

Aktivator: Mg²⁺ (10 mM), DTT
Arbeitslösung: Zur Verdünnung des Enzyms empfiehlt Roche die Verwendung eines Puffers, der die Komponenten des Aufbewahrungspuffers enthält: 20 mM Tris-HCl, 60 mM KCl, 1 mM EDTA, 5 mM Dithoerythritol, 50 % Glycerin (v/v), pH 7,5 (4 °C).

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash