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Zellproliferation ELISA, BrdU (kolorimetrisch)

sufficient for ≤1,000 tests

• Synonym(e): Zellproliferation
• UNSPSC-Code: 41116158

Eigenschaften

• Verwendung: sufficient for ≤1,000 tests
• Qualitätsniveau: 100
• Hersteller/Markenname: Roche
• Methode(n): ELISA: suitable
• Nachweisverfahren: colorimetric
• Lagertemp.: 2-8°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Kolorimetrischer Immunassay zur Quantifizierung der Zellproliferation, basierend auf der Messung des BrdU-Einbaus während der DNA-Synthese: eine nicht-radioaktive Alternative zum [³H]-Thymidin-Inkorporations-Assay.

Spezifität

Das Antikörperkonjugat reagiert mit dem Thymidinanalogon 5-Brom-2′-desoxyuridin (BrdU) und mit in die DNA eingebautem BrdU. Für die Bindung des in die DNA eingebauten BrdU muss die BrdU- markierte DNA denaturiert werden. Der Antikörper zeigt keine Kreuzreaktion mit endogenen Zellkomponenten wie Thymidin, Uridin oder DNA.

Anwendung

Nur für Forschungszwecke. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.
Die Zellproliferation ELISA, BrdU (kolorimetrisch) gehört zur zweiten, verbesserten Generation von Kits zur Messung der DNA-Synthese. Sie bietet eine präzise, schnelle und einfache kolorimetrische Alternative zur quantitativen Zellproliferation, basierend auf der Messung des BrdU-Einbaus während der DNA-Synthese in sich replizierende (Zyklus) Zellen. Deshalb kann die Zellproliferation ELISA für viele verschiedene In-vitro-Zellsysteme eingesetzt werden, wie zum Beispiel:

• Nachweis und Quantifizierung der von Wachstumsfaktoren und Zytokinen induzierten Zellproliferation
• Bestimmung des hemmenden oder stimulierenden Effekts verschiedener Substanzen auf die Zellproliferation in der Umwelt- und der biomedizinischen Forschung sowie in der Lebensmittel-, Kosmetik- und Pharmaindustrie
• Messung der Immunreaktivität von durch Mitogene oder Antigene stimulierten Lymphozyten
• Analyse der Chemosensitivität von Tumorzellen gegenüber verschiedenen Zytostatika in der medizinischen Forschung
• Testen der Biokompatibilität verschiedener Zellträger, die bei der Knochengewebszüchtung eingesetzt werden, für das Knochenzellwachstum

Verpackung

1 Kit mit 6 Komponenten.

Angaben zur Herstellung

Arbeitskonzentration: Der Antikörper des Kits (Anti-BrdU-Peroxidase) hat nach der Rekonstitution eine Konzentration von 7,5 U/ml, nach der Verdünnung 0,075 U/ml. Anstelle des Antikörpers des Kits kann auch der Anti-BrdU-Antibody (Fab-Fragmente) verwendet werden. Dieser Antikörper ist doppelt konzentriert, nach der Rekonstitution in 1 ml muss er also 1:200 verdünnt werden.
Arbeitslösung: BrdU-Markierungslösung

Das BrdU-Markierungsreagenz 1:100 mit sterilem Kulturmedium verdünnen (entstandene Konzentration: 100 μM BrdU).
Für eine 96-Well-Mikrotiterplatte wird 1 ml BrdU-Markierungslösung benötigt, wenn die Zellen in 100 μl/Well (10 μl/Well) kultiviert wurden, und 2 ml BrdU-Markierungslösung werden benötigt, wenn die Zellen in 200 μl/Well (20 μl/Well) kultiviert wurden.

Anti-BrdU-Peroxidase-Stammlösung

Anti-BrdU-Peroxidase in 1,1 ml bidest. Wasser 10 Minuten lang lösen und gründlich mischen.

Anti-BrdU-Peroxidase-Arbeitslösung

Anti-BrdU-Peroxidase-Stammlösung 1:100 mit Antikörper-Verdünnungslösung verdünnen. Für eine 96-Well-Mikrotiterplatte 100 μl Anti-BrdU-Peroxidase-Stammlösung in 10 ml Antikörper-Verdünnungslösung verdünnen.

Waschlösung

Waschpufferkonzentrat 1:10 mit bidest. Wasser verdünnen.
Für eine 96-Well-Mikrotiterplatte 10 ml Waschpufferkonzentrat mit 90 ml bidest. Wasser verdünnen.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): BrdU-Markierungslösung
Unverdünntes BrdU-Markierungsreagenz (1000x): Vor Licht geschützt bei 2 bis 8 °C mehrere Monate haltbar.
Verdünntes BrdU-Markierungsreagenz: Bei 2 bis 8 °C mehrere Wochen haltbar. Vor Licht geschützt lagern. Für die langfristige Lagerung wird empfohlen, die BrdU-Markierungslösung in Aliquoten bei -15 bis -25 °C zu lagern.
Anti-BrdU-Peroxidase-Stammlösung
Bei 2 bis 8 °C mehrere Monate haltbar. Für die langfristige Lagerung wird empfohlen, die Lösung in Aliquoten bei -15 bis -25 °C zu lagern.
Anti-BrdU-Peroxidase-Arbeitslösung
Kurz vor der Anwendung vorbereiten. Nicht lagern.
Waschlösung
Bei 2 bis 8 °C mehrere Wochen haltbar.

Rekonstituierung

Die Arbeitslösung für den Antikörper sollte aus phosphatgepufferter Salzlösung (PBS) mit 1 % BSA und pH-Wert 7,4 bestehen.

Sonstige Hinweise

Nur für die Life Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Nur Kit-Komponenten

• BrdU Labeling Reagent
• FixDenat ready-to-use
• Anti-BrdU-peroxidase antibody
• Antibody Dilution Solution ready-to-use
• Washing Buffer PBS 10x concentrated
• Substrate Solution TMB ready-to-use

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS02,GHS07,GHS08
• Signalwort: Danger
• H-Sätze: H225,H317,H319,H340
• P-Sätze: P201 - P210 - P233 - P280 - P308 + P313 - P370 + P378
• Gefahreneinstufungen: Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 2 - Muta. 1B - Skin Sens. 1
• Lagerklassenschlüssel: 3 - Flammable liquids
• WGK: WGK 1