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96992

Cell Counting Kit - 8

for quantitation of viable cell number in proliferation and cytotoxicity assays

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NACRES:
NA.32
UNSPSC Code:
12352108

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Das Cell Counting Kit-8 (CCK-8) basiert auf WST-8 (2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium, Mononatriumsalz), das in Gegenwart des Elektronenträgers 1-Methoxy PMS in einen wasserlöslichen Formazanfarbstoff umgesetzt wird. Die CCK-8-Lösung wird den Zellen direkt zugegeben. Ein Vormischen der Komponenten ist nicht erforderlich. WST-8 wird durch zelluläre Dehydrogenasen in ein orangefarbenes Formazanprodukt umgesetzt, das sich im Zellkulturmedium löst. Die Menge des gebildeten Formazans ist direkt proportional zur Zahl der lebenden Zellen. Da die CCK-8-Lösung sehr stabil und wenig zytotoxisch ist, ist eine längere Inkubation von 24 bis 48 Stunden möglich.
Das Cell Counting Kit-8 ermöglicht sensitive kolorimetrische Bestimmungen der Anzahl lebender Zellen in Proliferations- und Zytotoxizitäts-Assays. Die Nachweisempfindlichkeit ist höher bei allen anderen Tetrazoliumsalzen wie MTT, XTT oder MTS.

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Health hazardExclamation mark

signalword

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Carc. 2 - Eye Irrit. 2 - Muta. 2 - Skin Irrit. 2

Lagerklasse

12 - Non Combustible Liquids

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ppe

Eyeshields, Gloves



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Questions

1–7 of 7 Questions  
  1. How, much volume to be used for 12 well plate. For e.g I am growing cells in my 12 well plate over a thin film. some paper mentions to use 10%, so if I add 100ul with 1ml media. will it work? 

    1 answer
    1. Yes, 10% of the culture volume is suitable for use. The kit instructions require 10uL of reagent per 100ul culture volume in a 96 well format. Please see the link below to review additional information available in the product datasheet:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/381/017/96992dat.pdf
      Please see the following link to review troubleshooting tips that may also be of interest:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/129/020/96992-product-information.pdf

      Helpful?

  2. What is the solution volume provided in the "3000 tests"?

    1 answer
    1. The 96992-3000TESTS vial will include 30 milliliters of reagent.

      Helpful?

  3. 100 Test means 100 wells, so only one 96-well plate?

    1 answer
    1. The reagents provided in kit 96992 are sufficient for 100 tests. A 96 well microplate is not included with the kit. The customer must provide the 96 well plate. Although a solid 96 well plate can be used, a 96 well microplate with removable strips will allow for the most efficient use of the kit.

      Helpful?

  4. How much volume (in milliliters) is present in each vial of the CCK-8 solution?

    1 answer
    1. The volume supplied for Product No. 96992, Cell Counting Kit, is as follows:
      •100 tests: 1 ml x 1 vial
      •500 tests: 5 ml x 1 vial
      •3000 tests: 5 ml x 6 vials

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  5. What are the volumes of reagents included in the 96992-100test-F kit?

    1 answer
    1. Supplier information specifies that the kit contains 6 bottles, each containing 5 ml of solution. Based on the product datasheet, each well of a well-plate requires 10 microliters of solution, indicating that for 3000 tests, the kit should contain 30 ml of solution. Using these calculations, for the 100 test kit, each bottle would contain approximately 167 microliters of solution (5 ml divided by 30 = 167 microliters).

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  6. Is this kit suitable for use with HEK293 or HEK293f cells?

    1 answer
    1. Yes, the 96992 kit can be utilized to stain both HEK293 and HEK293B cells. The Cell Count kit is not cell type-specific and is expected to function effectively for counting viable mammalian cells. In this kit, the WST-8 dye, which is a formazan stain is specific to viable cells and is not present in nonviable cells.

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  7. Hi, what is the solution volume provided in the "500 tests" SKU? Thanks in advance, Aviv.

    1 answer
    1. The 500 test volume is 5 mL. See the links below to the Product datasheet and the Product Troubleshooting Guide for additional information.
      Product datasheet:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/381/017/96992dat.pdf

      Troubleshooting Guide:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/129/020/96992-product-information.pdf

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