MABE343

Anti-Puromycin-Antikörper, Klon 12D10

clone 12D10, from mouse

• Synonym(e): Anti-Puromycin Klon 12D10, Anti-Puromycin-Antikörper, Puromycin Nachweisantikörper
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: mouse
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: purified immunoglobulin
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: 12D10, monoclonal
• Speziesreaktivität: human
• Speziesreaktivität (Voraussage durch Homologie): all
• Methode(n): flow cytometry: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunofluorescence: suitable; immunohistochemistry: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotyp: IgG2aκ
• Versandbedingung: wet ice
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... NPEPPS(9520)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Puromycin ist ein Aminoukleosid-Antibiotikum, das aus dem Bakterium Streptomyces alboniger gewonnen wird und als Proteinsynthesehemmer wirkt, der die Translation durch verfrühte Terminierung der Ribosomketten verhindert. Monoklonale Antikörper gegen Puromycin können bei standardmäßigen immunchemischen Verfahren zur direkten Überwachung der Translation verwendet werden. Diese Verfahren werden als SunSET (Surface Sensing of Translation) bezeichnet. Ein Teil des Moleküls ähnelt dem 3′-Ende der Aminoacyl-tRNA, weshalb es bei der Analyse der Proteintranslation nützlich ist. Puromycin veranlasst die DNA-Fragmentierung in Thymozyten und menschlichen HL-60-Leukämiezellen.

Spezifität

Anti-Puromycin-Antikörper, Klon 12D10, reagiert nachweislich mit einer menschlichen Untersuchungsprobe, die mit Puromycin vorinkubiert wurde. Prognostizierte Reaktion mit allen Spezies, wenn die Probe mit Puromycin vorinkubiert wurde.

Immunogen

Puromycin aus Streptomyces alboniger

Anwendung

Analyse durch Western Blotting (Gesamtproteinfärbung): Mit Puromycin und Cycloheximid oder nur mit Puromycin behandelte HEK293-Zelllysate wurden mithilfe von SDS-PAGE aufgelöst und auf eine Membran übertragen. Die Proteine wurden mithilfe von Ponceau S-Färbung sichtbar gemacht.

Immunzytochemie-Analyse: Eine 1:10.000-Verdünnung einer repräsentativen Probe detektierte neu synthetisierte Proteine mit integriertem Puromycin in HeLa-Zellen, die mit Puromycin behandelt wurden.

Analyse durch Western Blotting (WB): Eine repräsentative Probe detektierte neu synthetisierte Proteine mit integriertem Puromycin bei WB (Reineke, L. C., et al. (2012). Mol Biol Cell. 23(18):3499-3510.; Trinh, M. A. et al. (2012). Cell Rep. 1(6):678-688.; Fortin, D. A., et al. (2012). J Neurosci. 32(24):8127-8137.; Clavarino, G., et al. (2012). PLoS Pathog. 8(5):e1002708.; David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; White, L. K., et al. (2011). J Virol. 85(1):606-620.; Hoeffer, C. A., et al. (2011). Proc Natl Acad Sci USA. 108(8):3383-3388.; Goodman, C. A., et al. (2010). FASEB J. 25(3):1028-1039.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.; Santini, E., et al. (2013). Nature. 493(7432):411-415.; Quy. P. N., et al. (2013). J Biol Chem. 288(2):1125-1134.; Hulmi. J. J., et al. (2012). Am J Physiol Endocrinol Metab. 304(1):E41-50.; Bhattacharya, A., et al. (2012). Neuron. 76(2):325-337.; Hoeffer, C. A., et al. (2013). J Neurophysiol. 109(1):68-76.).

Immunfluoreszenz-Analyse: Eine repräsentative Probe detektierte neu synthetisierte Proteine mit integriertem Puromycin bei WB (Reineke, L. C., et al. (2012). Mol Biol Cell. 23(18):3499-3510.; Trinh, M. A. et al. (2012). Cell Rep. 1(6):678-688.; Fortin, D. A., et al. (2012). J Neurosci. 32(24):8127-8137.;David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; David, A., et al. (2011). J Biol Chem. 286(23):20688-20700.; White, L. K., et al. (2011). J Virol. 85(1):606-620.; Hoeffer, C. A., et al. (2011). Proc Natl Acad Sci USA. 108(8):3383-3388.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.; Goodman, C. A., et al. (2012). Proc Natl Acad Sci USA. 109(17):E989.; Santini, E., et al. (2013). Nature. 493(7432):411-415.; Quy. P. N., et al. (2013). J Biol Chem. 288(2):1125-1134.).

Immunhistochemie-Analyse (ICH): Eine repräsentative Probe detektierte neu synthetisierte Proteine mit integriertem Puromycin bei IHC (Goodman, C. A., et al. (2010). FASEB J. 25(3):1028-1039.).

Fluoreszenzaktivierte Zellsortierungsanalyse (FACS): Eine repräsentative Probe detektierte neu synthetisierte Proteine mit integriertem Puromycin bei FACS (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).

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Anti-Puromycin-Antikörper, Klon 12D10, für Nachweis von in Proteinen integriertem Puromycin. Monoklonale Antikörper gegen Puromycin können bei standardmäßigen immunchemischen Verfahren verwendet werden.

Forschungskategorie
Epigenetik & Zellkernfunktion

Forschungsunterkategorie
RNA-Stoffwechsel & Bindungsproteine

Qualität

Evaluiert durch Western Blottting in HEK293-Zelllysaten, die mit Puromycin und Cycloheximid, oder nur mit Puromycin, behandelt wurden.

Analyse von Western Blotting: Eine 1:25.000-Verdünnung dieses Antikörpers detektierte neu synthetisierte Proteine mit integriertem Puromycin in HEK293-Zelllysaten, die nur mit Puromycin behandelt wurden. Dieser Antikörper detektierte zudem geringe Mengen neu synthetisierter Proteine mit integriertem Puromycin in HEK293-Zelllysaten, die mit Puromycin und Cycloheximid behandelt wurden.

Zielbeschreibung

Puromoycin ist in neu synthetisierten Proteinen integriert. Wenn nur Puromycin anwesend ist, weist der Antikörper neu synthetisierte Proteine mit integriertem Puromycin mit unterschiedlichen Molekulargewichten nach. Es wird jedoch ein schwächeres Signal beobachtet, wenn auch Cycloheximid vorhanden ist, das die Proteinbiosynthese in eukaryotischen Organismen hemmt.

Physikalische Form

Aufgereinigtes monoklonales Maus-IgG2aκ in Puffer mit 0,1 M Tris-Glycin (pH 7,4), 150 mM NaCl mit 0,05 % Natriumazid.

Format: Aufgereinigt

Über Protein G aufgereinigt

Lagerung und Haltbarkeit

Bei 2 – 8 °C 1 Monat ab Empfangsdatum haltbar.

Hinweis zur Analyse

Kontrolle
HEK293-Zelllysate, die mit Puromycin und Cyclohexamid, oder nur mit Puromycin, behandelt wurden.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Rechtliche Hinweise

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