MABE342

Anti-Puromycin-Antikörper, Klon 4G11

clone 4G11, from mouse

• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: 4G11, monoclonal
• Species reactivity: human
• Application: FACS, ICC, IF, WB
• Citations: 21

Eigenschaften

• biological source: mouse
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 4G11, monoclonal
• species reactivity: human
• species reactivity (predicted by homology): all
• technique(s): flow cytometry: suitable, immunocytochemistry: suitable, immunofluorescence: suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG1κ
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: unmodified
• Quality Level: 100
• Gene Information: human ... NPEPPS(9520)

Beschreibung

General description

Puromycin ist ein Aminonukleosid-Antibiotikum, das aus dem Bakterium Streptomyces alboniger gewonnen wird und als Proteinsynthesehemmer wirkt, der die Translation durch verfrühte Terminierung der Ribosomketten verhindert. Monoklonale Antikörper gegen Puromycin können bei standardmäßigen immunchemischen Verfahren zur direkten Überwachung der Translation verwendet werden. Diese Verfahren werden als SUnSET (Surface Sensing of Translation) bezeichnet. Ein Teil des Moleküls ähnelt dem 3′-Ende der Aminoacyl-tRNA, weshalb es bei der Analyse der Proteintranslation nützlich ist. Puromycin veranlasst die DNA-Fragmentierung in Thymozyten und menschlichen HL-60-Leukämiezellen.

Puromoycin ist in neu synthetisierten Proteinen integriert. Wenn nur Puromycin vorhanden ist, weist der Antikörper neu synthetisierte Proteine mit integriertem Puromycin mit unterschiedlichen Molekulargewichten nach. Es wird jedoch eine Abnahme des Signals beobachtet, wenn auch Cycloheximid vorhanden ist, das die Proteinbiosynthese in eukaryotischen Organismen hemmt.

Application

Anti-Puromycin-Antikörper, Klon 4G11, für den Nachweis von in Proteinen integriertem Puromycin. Monoklonale Antikörper gegen Puromycin können auch bei standardmäßigen immunchemischen Verfahren verwendet werden.

Immunzytochemische Analyse: Eine 1:2.000-Verdünnung einer repräsentativen Charge detektierte neu synthetisierte Proteine mit integriertem Puromycin in HeLa-Zellen, die mit Puromycin behandelt wurden. Es wird jedoch eine Abnahme des Signals beobachtet, wenn Cycloheximid hinzugefügt wurde, das die Proteinbiosynthese in eukaryotischen Organismen hemmt.

Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge aus einem unabhängigen Labor wurde in neusynthetisierten Proteinen integriertes Puromycin mittels WB nachgewiesen (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).

Immunfluoreszenz-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge aus einem unabhängigen Labor wurde in neusynthetisierten Proteinen integriertes Puromycin mittels IF nachgewiesen (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).

Fluoreszenzaktivierte Zellsortierungsanalyse (FACS): Mit einer repräsentativen Charge aus einem unabhängigen Labor wurde in neusynthetisierten Proteinen integriertes Puromycin mittels FACS nachgewiesen (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).

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Biochem/physiol Actions

Nachgewiesene Reaktion mit menschlicher Untersuchungsprobe, die mit Puromycin vorinkubiert wurde. Prognostizierte Reaktion mit allen Spezies, wenn die Probe mit Puromycin vorinkubiert wurde.

Physical form

Format: Aufgereinigt

Analysis Note

Beurteilt mittels Western-Blot in HEK293-Zelllysaten, die mit Puromycin und Cycloheximid, oder nur mit Puromycin, behandelt wurden.

Western-Blot-Analyse: Eine 1:12.500-Verdünnung dieses Antikörpers detektierte neu synthetisierte Proteine mit integriertem Puromycin in HEK293-Zelllysaten, die nur mit Puromycin behandelt wurden. Dieser Antikörper detektierte zudem geringe Mengen von Puromycin in HEK293-Zellen, die mit Puromycin und Cycloheximid behandelt wurden.

Legal Information

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Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1
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• flash_point_c: Not applicable