17-10061
ChIPAb+ E2F-1 - durch ChIP validiertes Antikörper- und Primer-Set
from mouse
Synonym(e):
Transcription factor E2F1, Retinoblastoma-binding protein 3, PRB-binding protein E2F-1
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About This Item
UNSPSC-Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.52
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![GAL4 [(1-147) - AH] from Saccharomyces cerevisiae recombinant, expressed in E. coli, ≥80% (SDS-PAGE)](/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/images/174/140/27ccc70c-c146-4db8-888e-496728638bd2/640/27ccc70c-c146-4db8-888e-496728638bd2.jpg)
Allgemeine Beschreibung
Alle ChIPAb+-Antikörper werden einzeln (jede Charge, jedes Mal) für die Chromatin-Immunpräzipitation validiert. Jedes ChIPAb+-Antikörper-Set enthält Kontrollprimer (jede Charge wurde durch qPCR geprüft), um Ihre IP-Ergebnisse im stellenspezifischen Kontext biologisch zu validieren. Das qPCR-Protokoll und die Primer-Sequenzen werden bereitgestellt, was es Forschenden ermöglicht, ChIP-Protokolle zu validieren, wenn sie unseren Antikörper in Ihrem Chromatin-Kontext nutzen. Jedes Set enthält außerdem einen Negativkontrolle-Antikörper, um die Spezifizität der ChIP-Reaktion zu gewährleisten.
Das ChIPAb+-E2F-1-Set enthält den E2F-1-Antikörper, normales Maus-IgG als Negativkontrolle und qPCR-Primer, die eine 100-bp-Region des humanen CDC2-Promotors amplifizieren. E2F-1 und die Negativkontrollen werden in skalierbarer „je ChIP“-Reaktionsgröße geliefert und können verwendet werden, um die Ausfällung von E2F-1-assoziiertem Chromatin funktionell zu validieren.
Das ChIPAb+-E2F-1-Set enthält den E2F-1-Antikörper, normales Maus-IgG als Negativkontrolle und qPCR-Primer, die eine 100-bp-Region des humanen CDC2-Promotors amplifizieren. E2F-1 und die Negativkontrollen werden in skalierbarer „je ChIP“-Reaktionsgröße geliefert und können verwendet werden, um die Ausfällung von E2F-1-assoziiertem Chromatin funktionell zu validieren.
Spezifität
Die Epitope wurden auf den Aminosäuren 1–89 und Aminosäuren 342–386 lokalisiert.
Immunogen
Epitop: A.S. 1–89 und 342–386
Anwendung
Chromatin-Immunpräzipitation:
Daten einer repräsentativen Charge.
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1 x 10E6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 1 µl normalem Maus-IgG oder 1 µl Anti-E2F-1 und dem Magna ChIP G Kit (Katalognr. 17-611) unterzogen.
Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit E2F-1 assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern, humanem CDC2-Promotor als positive Stelle und einer intergenischen Region nahe des humanen CALML5 als negative Stelle verifiziert. (Siehe Abbildungen). Die Daten werden als prozentuale Eingabe jeder IP-Probe relativ zur Chromatin-Eingabe für jedes Amplikon und jede ChIP-Probe wie angegeben dargestellt.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP G (Katalognr. 17-409) oder EZ-ChIP (Katalognr. 17-371).
Western-Blot-Analyse:
Daten einer repräsentativen Charge.
HeLa-Zellkernextrakt wurde durch Elektrophorese aufgelöst, auf eine PVDF-Membran übertragen und mit Anti-E2F-1 (1,0 µg/ml) untersucht.
Proteine wurden mit einem an HRP konjugierten Anti-Maus-Sekundärantikörper der Ziege und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem veranschaulicht.
Der Pfeil zeigt E2F-1 (~55 kDa) (siehe Abbildungen).
Immunpräzipitation: 4 μg einer früheren Charge dieses Antikörpers immunpräzipitierten E2F-1 aus HeLa-Zellkernextrakt.
EMSA (Electrophoretic Mobility Shift Assay): Eine frühere Charge dieses Antikörpers erzeugt einen Gel-Shift des E2F-1/DP-1/DNA-Komplexes.
Daten einer repräsentativen Charge.
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1 x 10E6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 1 µl normalem Maus-IgG oder 1 µl Anti-E2F-1 und dem Magna ChIP G Kit (Katalognr. 17-611) unterzogen.
Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit E2F-1 assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern, humanem CDC2-Promotor als positive Stelle und einer intergenischen Region nahe des humanen CALML5 als negative Stelle verifiziert. (Siehe Abbildungen). Die Daten werden als prozentuale Eingabe jeder IP-Probe relativ zur Chromatin-Eingabe für jedes Amplikon und jede ChIP-Probe wie angegeben dargestellt.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP G (Katalognr. 17-409) oder EZ-ChIP (Katalognr. 17-371).
Western-Blot-Analyse:
Daten einer repräsentativen Charge.
HeLa-Zellkernextrakt wurde durch Elektrophorese aufgelöst, auf eine PVDF-Membran übertragen und mit Anti-E2F-1 (1,0 µg/ml) untersucht.
Proteine wurden mit einem an HRP konjugierten Anti-Maus-Sekundärantikörper der Ziege und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem veranschaulicht.
Der Pfeil zeigt E2F-1 (~55 kDa) (siehe Abbildungen).
Immunpräzipitation: 4 μg einer früheren Charge dieses Antikörpers immunpräzipitierten E2F-1 aus HeLa-Zellkernextrakt.
EMSA (Electrophoretic Mobility Shift Assay): Eine frühere Charge dieses Antikörpers erzeugt einen Gel-Shift des E2F-1/DP-1/DNA-Komplexes.
Dieses Set aus ChIP-validiertem ChIPAb+-E2F-1-Antikörper und Primer enthält praktischerweise den Antikörper und die spezifischen Kontroll-PCR-Primer.
Qualität
Chromatin-Immunpräzipitation:
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1 x 10E6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 1 µl normalem Maus-IgG oder 1 µl Anti-E2F-1 und dem Magna ChIP® G Kit (Katalognr. 17-611) unterzogen.
Die erfolgreiche Immunpräzipitation von E2F-1-assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern, humaner CDC2-Promotor verifiziert (siehe Abbildungen).
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP G (Katalognr. 17-409) oder EZ-ChIP (Katalognr- 17-371).
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1 x 10E6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 1 µl normalem Maus-IgG oder 1 µl Anti-E2F-1 und dem Magna ChIP® G Kit (Katalognr. 17-611) unterzogen.
Die erfolgreiche Immunpräzipitation von E2F-1-assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern, humaner CDC2-Promotor verifiziert (siehe Abbildungen).
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP G (Katalognr. 17-409) oder EZ-ChIP (Katalognr- 17-371).
Zielbeschreibung
~ 55 kDa
Physikalische Form
Anti-E2F-1 (Maus, monoklonal). Ein Fläschchen mit 25 µg mit Protein G aufgereinigtem monoklonalem, gemischtem IgG in 25 µl Puffer mit 0,1 mol/l Tris-Glycin, pH-Wert 7,4, 0,15 mol/l NaCl, 0,05 % Natriumazid. Gefrorene Lösung. Bei -20 °C aufbewahren.
Normales Maus-IgG. Ein Fläschchen mit 25 µg aufgereinigtem IgG in 25 µl Lagerpuffer mit 0,1 % Natriumazid. Bei -20 °C aufbewahren.
ChIP-Primer, CDC2-Promotor. Ein Fläschchen mit 75 μl von 5 μmol/l jedes Primers, spezifisch für den humanen CDC2-Promotor. Bei -20 °C aufbewahren.
FÜR: CGC CCT TTC CTC TTT CTT TC
REV: ATC GGG TAG CCC GTA GAC TT
Normales Maus-IgG. Ein Fläschchen mit 25 µg aufgereinigtem IgG in 25 µl Lagerpuffer mit 0,1 % Natriumazid. Bei -20 °C aufbewahren.
ChIP-Primer, CDC2-Promotor. Ein Fläschchen mit 75 μl von 5 μmol/l jedes Primers, spezifisch für den humanen CDC2-Promotor. Bei -20 °C aufbewahren.
FÜR: CGC CCT TTC CTC TTT CTT TC
REV: ATC GGG TAG CCC GTA GAC TT
Format: Aufgereinigt
Hinweis zur Analyse
Kontrolle
Einschließlich normales Maus-IgG als Negativkontrolle und für den humanen CDC2-Promotor spezifische Primer.
Einschließlich normales Maus-IgG als Negativkontrolle und für den humanen CDC2-Promotor spezifische Primer.
Rechtliche Hinweise
MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Lagerklassenschlüssel
10 - Combustible liquids
Analysenzertifikate (COA)
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