首頁代謝組學研究木瓜蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、特性與產品

木瓜蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、特性與產品

E.C. 3.4.22.2

木瓜 (Carica papaya)

木瓜蛋白酶是肽酶 C1 家族的半胱氨酸蛋白酶。木瓜蛋白酶由一條多肽鏈組成，鏈上有三個二硫橋和一個酶活性所必需的巯基。

分子量：23,406 Da（氨基酸序列）¹⁶
活性的最佳 pH 值：6.0-7.0
活性最適溫度：65 °C²²
pI：8.75 ¹⁷; 9.55 ¹⁸ 光譜特性：
λ_max：278 nm ¹⁹
消光係數, E^1% = 25 ¹⁹
消光係數, EmM = 57.6 (at 280 nm) ²⁰

單位定義：在 pH 6.2、25 °C 的條件下，一個單位每分鐘會水解 1.0 µmole 的 N-α-苯甲酰基-L-精氨酸乙酯 (BAEE)。

圖 1.木瓜蛋白酶的結構。

木瓜蛋白酶會比胰蛋白酶更廣泛地消化大部分蛋白質底物。木瓜蛋白酶具有廣泛的特異性，可以裂解基本氨基酸、亮氨酸或甘氨酸的肽鍵。它也能水解酯類和醯胺類。木瓜蛋白酶偏好 P2 位上帶有大型疏水側鏈的胺基酸。它不接受 P1' 位置上的 Val。¹

圖 2.表示胃蛋白酶和木瓜蛋白酶的裂解。

蛋白胨可溶於 10 mg/mL 的水。使用前，通常會立即將該酵素稀釋在含有 ~5 mM L-半胱氨酸的緩衝液中。活化/穩定劑包括 EDTA、半胱氨酸和二巯基丙醇。²¹

雖然木瓜蛋白酶溶液具有良好的溫度穩定性，但溶液的穩定性取決於 pH 值。木瓜蛋白酶溶液在酸性條件下不穩定，即 pH 值低於 2.8 時，活性會顯著降低。對於溶液中的活性酵素，其活性每天大約會損失 1-2%，這可能是自溶和/或氧化的結果。

在分離過程中得到的一種常見的木瓜蛋白酶非活性形式是蛋白質活性位點巯基與游離半胱氨酸之間形成的混合二硫化物。²³

木瓜蛋白酶溶液對幾種變性劑都很穩定，即、在 70% 甲醇和 8 M 尿素溶液中重結晶後，仍可維持全部活性。然而，當木瓜蛋白酶暴露於 10% 三氯醋酸或 6 M 鹽酸胍時，其活性會顯著降低。