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沙门氏菌分离和鉴定培养基

目前使用经典的培养方法来鉴定沙门氏菌(一种强致病性食源性致病菌)的方法

沙门氏菌污染是全球食源性疾病的第二大成因。控制沙门氏菌的暴发是食品监管机构、餐馆和整个食品工业的一项重要任务。

沙门氏菌家族包括 2,300 多种血清型的细菌,但其中有两种类型,即肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏杆菌,约占所有人类感染的一半。大多数沙门氏菌的暴发可以追溯到乳制品、家禽和肉制品,但沙门氏菌几乎可以在任何食物上生长。鸡、鸡蛋及其衍生产品的风险特别高。

沙门氏菌

图 1.沙门氏菌

食品工业中的微生物控制在预防沙门氏菌暴发中起着关键作用。用于鉴定沙门氏菌的试验和培养基利用了沙门氏菌在生理学或生物化学上与其他属肠杆菌科不同的独特性质。例如,来自沙门氏菌属的细菌多为兼性厌氧菌、氧化酶阴性、过氧化氢酶阳性和革兰氏阴性杆菌。大多数菌株都能运动并发酵葡萄糖,同时产酸和产气。目前用于区分和鉴定沙门氏菌的培养基仍然基于 pH 指示剂指示的碳水化合物发酵的检测(关于碳水化合物发酵能力,另见表 1 )、蛋白水解活性、硫化氢产量和选择性的检测。大多数现代培养基也结合了一些此类检测系统,使培养基更可靠。最常见的选择性培养基和差异培养基的列表见表 2

发酵货号
碳水化合物水合氯醛圆盘
阿东糖醇--55876
阿拉伯糖+/-+/-80372
纤维二糖--56481
右旋糖++/-63367
半乳糖醇+/-+/-73044
果糖+/-+/-53901
半乳糖++/-89608
肌醇+/-+/-89614
乳糖--28816
麦芽糖++/-77653
甘露醇++/-94438
甘露糖+/-+/-94445
蜜二糖++93196
棉子糖--94226
鼠李糖+/-+/-93999
水杨苷--92971
山梨醇++/-93998
蔗糖--94309
海藻糖++/-92961
木糖++/-07411
表1.沙门氏菌的典型碳水化合物发酵能力
品牌货号名称
Sigma-AldrichA0715Andrade 蛋白胨水
Sigma-Aldrich28943Andrade 蛋白胨水,Vegitone
Sigma-Aldrich95388亚硫酸铋琼脂
Sigma-Aldrich15835BPL琼脂
Sigma-Aldrich70134改良亮绿琼脂
Sigma-Aldrich16026亮绿酚红乳糖蔗糖琼脂
Sigma-Aldrich36408溴甲酚紫肉汤
Sigma-Aldrich22520中国蓝乳糖琼脂
Sigma-Aldrich55420氯化琼脂
Sigma-Aldrich70135DCLS琼脂
Sigma-Aldrich90035DCLS 琼脂 2 号
Sigma-AldrichD2935脱羧酶肉汤基质,Moeller
Sigma-AldrichD7809脱氧胆酸盐枸橼酸盐琼脂
Sigma-AldrichE5399内琼脂
Sigma-Aldrich70137内琼脂
Sigma-Aldrich16447葡萄糖溴甲酚紫琼脂
Sigma-Aldrich51490海克通肠道菌琼脂
Sigma-Aldrich60787克利格勒琼脂
Sigma-Aldrich61792莱夫森琼脂
Sigma-Aldrich66304赖氨酸脱羧酶肉汤
Sigma-Aldrich62915赖氨酸铁琼脂
Sigma-Aldrich70143麦康凯琼脂 1 号
Sigma-Aldrich19352麦康凯琼脂 1 号,Vegitone
Sigma-AldrichM8302, 94216麦康凯琼脂,结晶紫,氯化钠和 0.15% 胆盐
Sigma-Aldrich70144麦康基肉汤
Sigma-Aldrich75717, 16377紫色麦康凯肉汤
Sigma-Aldrich63014麦康凯马克杯琼脂
Sigma-Aldrich51405麦康凯琼脂(无盐)
Sigma-Aldrich69965莫塞尔肉汤
Sigma-Aldrich43052Muller-Kauffmann四硫酸盐肉汤,碱 (ISO)
Sigma-Aldrich75315OF试验营养琼脂
Sigma-Aldrich81648Pril® 甘露醇琼脂
Sigma-Aldrich04584增菌肉汤,符合DIN EN ISO 6579:2002
Sigma-Aldrich17173改良增菌肉汤
Sigma-AldrichR0773增菌培养基
Sigma-Aldrich92322改良增菌肉汤培养基(碱性),半固态
Sigma-Aldrich84368Önöz 沙门氏菌琼脂
Sigma-Aldrich84370沙门氏菌浓缩肉汤
Sigma-Aldrich70153亚硒酸盐肉汤(碱性)
Sigma-Aldrich84922亚硒酸盐胱氨酸肉汤
Sigma-Aldrich85438SIM 培养基
Sigma-Aldrich85463辛蒙斯柠檬酸盐琼脂
Sigma-Aldrich85640SS-琼脂
Sigma-Aldrich86352TBG 肉汤
Sigma-Aldrich88151连四硫酸盐肉汤
Sigma-Aldrich88148Muller-Kauffmann四硫酸盐富集肉汤
Sigma-Aldrich44940三糖铁琼脂
Sigma-Aldrich51463尿素肉汤
Sigma-Aldrich42376紫红色胆汁琼脂,Vegitone
Sigma-Aldrich70189, 79873紫红色胆汁葡萄糖琼脂
Sigma-Aldrich17213不含乳糖的紫红色胆汁葡萄糖琼脂
Sigma-Aldrich53605不含乳糖的紫红色胆汁葡萄糖琼脂,Vegitone
Sigma-Aldrich41270紫红色胆汁乳糖葡萄糖琼脂
Sigma-Aldrich95273VRB 杯琼脂
Sigma-Aldrich95586XLD琼脂
Sigma-Aldrich76721XLT4 琼脂(碱)
表2.沙门氏菌选择性和差异性培养基(列表不完整。有关详细信息,请前往 sigma-aldrich.com/salmonella)

此外,我们目前的技术还可提供显色培养基,可检测到沙门氏菌的一种特征性酶,从而提高鉴定可靠性和速度。这些反应基于导致可见颜色变化的发色底物的裂解(参见表 3)。

品牌货号名称
Sigma-Aldrich00563HiCrome™MM 琼脂
Sigma-Aldrich90918改良HiCrome™ RajHans培养基
Sigma-Aldrich78419HiCrome™ 沙门氏菌琼脂
Sigma-Aldrich05538改良HiCrome™ 沙门氏菌琼脂
Sigma-Aldrich84369沙门菌显色琼脂
Sigma-Aldrich01993沙门菌显色琼脂套装
表3.沙门氏菌显色培养基
改良HiCrome™ 沙门氏菌琼脂

图 2.改良HiCrome™ 沙门氏菌琼脂

沙门氏菌等微生物的产硫化氢检测

碳水化合物介质中大量细菌能利用硫氨基酸产生少量 H2S。与醋酸铅结合时,H2S 会产生黑色沉淀,在纸条上产生可见的黑色反应。醋酸铅法非常灵敏,可以检测痕量的硫化氢。

用试纸测试:在蛋白胨水(货号70179)之中接种可疑有机体。在接种培养基上方的塞子和管内壁之间插入醋酸铅纸条,在 35℃ 下培养 18-24 小时。阳性反应表现为条带下部发黑。在出现阴性反应的情况下,不应出现黑化现象(参见图 3)。

测试微生物

图 2.1.测试微生物测试微生物

硫化氢测试条

图 3.硫化氢测试条

基于rRNA检测原理的快速试纸

图 4.基于rRNA检测原理的快速试纸

材料
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