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首頁DNA & RNA 純化高純度技術與矽吸附套件

高純度技術與矽吸附套件

羅氏公司開發的高純度和矽膠吸附試劑盒取決於核酸在碘化鈉(NaI)、硫氰酸胍或鹽酸胍等混沌鹽存在下吸附到矽膠(玻璃)上的傾向[Melzak et al.(1996), J. Colloid Interface Sci. (USA) 181, 635-644]。這種趨勢是由 Vogelstein 和 Gillespie 發現的 [Vogelstein, B. and Gillespie, D. (1979),  Proc.Natl.Sci.USA 76,615-619],他們發現在飽和 NaI 的存在下,DNA 片段會吸附在燧石玻璃粉上。

不同類型的核酸會依據周圍溶液的離子強度和 pH 值,或多或少緊密地吸附在玻璃上。使用低鹽緩衝液或水從玻璃上洗脫核酸。在每種試劑盒中,此方法都經過優化,以製備特定類型的核酸。在每種高純度試劑盒中,步驟基本相同,只需要幾分鐘。使用這些試劑盒製備的核酸可直接用於各種下游應用。

旋轉柱原理

圖 1. 旋轉柱原理

High Pure Kits

High Pure kits(e.g.,High Pure PCR Template Preparation Kit,Product No. 11796828001;High Pure PCR Cleanup Micro Kit,Product No.4983955001)使用固定在特殊塑料濾管中的玻璃纖維絨毛。

二氧化矽吸附套件

與High Pure套件一樣, 琼脂糖凝膠DNA萃取套件(產品編號.11696505001)使用矽珠來吸附 DNA。

本套件使用類似 High Pure 套件的步驟,從起始材料中純化 DNA。核酸在混沌鹽的存在下被吸附到矽膠上,離心(當核酸被吸附到矽膠珠上),廣泛清洗以去除雜質,然後用低鹽緩衝液從矽膠珠上釋放出來。分離出的 DNA 純度高,可直接用於標記、測序、結合與轉換,以及其他需要濃縮 DNA 的程序。

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