細菌基因組 Miniprep 試劑盒

用於從多種培養細菌中純化基因組 DNA

我們的 GenElute 細菌基因組試劑盒提供了一種簡單方便的技術，可從革蘭氏陰性菌（圖1）和革蘭陽性細菌（圖2）中分離出高品質的DNA。本試劑盒結合了矽基系統與微旋格式的優點，不需要使用昂貴的樹脂和有害的有機化合物。首先用適當的酵素培養細菌，以確保有效的細胞裂解及 DNA 從細胞中釋放出來。

快速瀏覽

NA2100, NA2110, NA2120

程序

首先用適當的酵素培養細菌，以確保有效的細胞裂解及 DNA 從細胞中釋放。然後在含混沌鹽的溶液中裂解細菌。DNA 會與矽基膜結合，剩餘的裂解液會透過離心機移除。洗滌去除雜質後，DNA 用緩衝液洗脫至收集管中。洗出的 DNA 長度可達 50 kb（圖 3），適合下游應用，例如限制性內切酶挖掘、PCR 和 Southern 印記。

GenElute 細菌基因組 DNA 試劑組包含純化革蘭氏陰性細菌基因組 DNA 所需的所有試劑 (圖 3)。然而溶菌酶（產品編號 L7651）必須另外購買，對於大多數的革蘭陽性細菌而言，需要溶菌酶來徹底裂解厚厚的肽聚糖細胞壁。每套 GenElute 試劑組均提供革蘭陽性溶菌酶溶液，作為製備溶菌酶儲備液的稀釋劑。

特點和優點

• 提供革蘭陽性和革蘭陰性細菌的方案
• 純化的 DNA 的 A260/A280 比率介於 1.6 和 1.9
• 典型的 DNA 產量為 15 µg-20 µg（見表 1）
• 提供溶菌酶稀釋液和 RNase A 溶液以增加便利性

儲存：室溫
R: 22-36/37/38-42 S: 26-36

訂購資訊

Product No.	名稱	每個套件的認證	技術 手冊 .pdf	簡短 協議 .pdf
NA2100	GenElute細菌基因組DNA試劑盒	X	X
NA2110	GenElute 細菌基因體 DNA 試劑盒	70	X	X
NA2120	GenElute細菌基因組DNA試劑盒	350	X	X

應用

純化的 DNA 適合下游應用，例如限制性內切酶消化、PCR 和 Southern Blot。

樣品資料

使用GenElute細菌基因組DNA試劑盒的典型DNA產量。

來源	隔夜培養物的數量	每毫升隔夜培養物的OD600 *	典型DNA產量（RNase處理）**
Escherichia coli, ATCC# 11775	特瑞福肉湯 (產品編號.T9179)	0.8 ml	12.5	20 µg
Escherichia coli, ATCC# 11775	LB broth (Product No.L7658)	1.5 ml	5	20 µg
Escherichia coli, DH10B	LB肉湯 (產品編號.L7658)	1.0 ml	5	15 µg
Pseudomonas fluorescens, ATCC#13525	泰瑞肉汤 (Product No.T9179)	0.8 ml	16	25 µg
Pseudomonas fluorescens, ATCC# 13525	營養肉湯 (產品編號.N7519)	1.5 ml	2	20 µg
Bacillus subtilis, ATCC#6051	Todd Hewitt肉湯 (產品編號.T1438)	1.5 ml	6	25 µg
Streptococcus mutans, ATCC#35668	Todd Hewitt肉湯 (產品編號.T1438)	1.5 ml	1.3	15 µg***
表皮葡萄球菌 ATCC# 14990	營養肉湯 (產品編號.N7519)	1.5 ml	2	8 µg****

* Values adjusted for dilution factor.

**** Based on performing two 200 µl elutions.

**** Lysozyme Solution was supplemented with 250 units/ml of Mutanolysin （Product No.M9901).

**** Lysozyme Solution was supplemented with 200 units/ml of Lysostaphin (Product No. L7386).

革蘭(-)細菌基因組 DNA 分離試劑盒的比較。

圖 1. 使用 GenElute 細菌基因組 DNA 試劑盒與其他供應商所製備試劑盒分離的革蘭陰性細菌基因組 DNA 的瓊脂糖凝膠分析。等比例的 DNA 在 1%, 1X TBE 琼脂糖凝膠上解析。使用 Lambda Hind III ladder (產品編號 D9780)作為大小標準 (M)。

革蘭(+)細菌基因組 DNA 分離試劑盒的比較。

圖 2. 使用 GenElute 細菌基因組 DNA 試劑盒與其他供應商所製備試劑盒分離出來的革蘭(+)細菌基因組 DNA 的瓊脂質凝膠分析。等比例的 DNA 在 1%、1X TBE 瓊脂質凝膠上解析。使用 Lambda Hind III ladder (產品編號 D9780)作為大小標準。

脈衝場凝膠電泳 (PFGE) 細菌 DNA。

圖 3. 使用 GenElute Bacterial Genomic DNA 套件從多種細菌中分離出純化的基因組 DNA。使用 BioRad CHEF DRII 系統，在 0.5X TBE 中的 1%瓊脂糖凝膠上解析各細菌樣本的 1 µg 等分 DNA，150 伏特下 16 小時。初始脈衝時間為 2 秒，最終脈衝時間為 13 秒，起始比率為 1.0，泵速設定為 70，PFGE 在 4 °C 下進行。標記 (M) 代表 0.1-200 kb Pulse 標記 (產品編號 D2291)。

與渦旋相比，上下移動混合物可使溶菌酶更容易溶解。這也減少了渦旋可能
產生的泡沫。