用於 GC 優化的新順式/反式 FAME 標準

Vicki Yearick

AnalytiX Volume 9 Article 2

用氣相色譜法測定食品中反式脂肪酸成分的 AOCS 和 AOAC 方法要求使用高極性的氰基硅氧烷毛細管色譜柱，以提供眾多幾何（順式和反式）和位置異構體的最佳峰分辨率。由於這些相具有高極性，GC 系統中的細微變化會改變順式和反式位置異構體的色譜分離。

AOCS方法Ce 1h-05建議使用特性良好的脂肪酸甲酯（FAMEs）混合物，涵蓋調查的脂肪酸範圍，以監測隨時間變化的色譜柱性能。Sigma-Aldrich 的新型 cis/trans FAME 色谱柱性能混合物是監測這些變化的絕佳選擇。此定性混合物專門設計用於根據 AOCS 方法 Ce 1h-5 和 AOAC 方法 AOAC 996.06 優化和監測性能變化。

由於某些順式/反式定位的 FAME 難以分離，且可能無法達到基線解析度，因此定期使用 Sigma-Aldrich FAME 色譜柱性能混合物對達到所需的色譜柱性能極為重要。為了達到 C18:1 cis/trans 異構體之間的最佳解析度，可能需要對樣品大小、樣品濃度或烘箱溫度進行微小的改變。一旦建立了色谱柱的最佳解析度，每周对混合液进行分析就可以监测色谱柱的性能。

Cat.編號：	僅供定性識別。
olumn	：SP™-2560 熔融石英毛細管柱 (24056)，100 m x 0.25 mm 內徑 x 0.2 μm 厚度
烤箱	：180 °C (等溫)
inj.	: 250 °C, split-100:1, 1 μL
det.	：FID，250 °C
載氣	：氦氣，1 mL/min，180 °C

圖 1. Cis/Trans FAME 色谱柱性能混合物；2.5 mg/mL in Methylene Chloride。

圖 2. (28668-U, 23348-U)

分析師注入混合液，並識別圖 1中標為 "1 「和 」2 "的峰。然後使用 圖 2 中所示的公式計算這些峰之間的解析度。在初次安裝新的毛細管色譜柱時，必須執行混合，以確保建立最佳解析度的條件。兩個峰之間的最佳解析度定義為 「基線 」解析度。當使用 圖 2 中的公式計算出的 R 值大約為 1.5 或更大時，即可達到完全基線解析度。Figure 1 中所示的色谱圖示例說明了計算解析度值時所需的測量 - 特別是峰寬和保留時間。如圖 1 所示，在正常測試條件下，峰 1 和峰 2 的基線解析度將無法達到。最小可接受解析度值將在 AOAC 方法 Ce 1h-05 未來的修訂中說明。

目前，沒有任何色譜柱能完全解析所有 C18:1 cis/ trans 位置異構體。通过使用顺式/反式 FAME 色谱柱性能混合物，分析师可以在检测复杂混合物之前优化色谱柱性能。定期使用還可監測色譜柱降解情況，並確認何時更換毛細管色譜柱。

參考資料

1. AOCS Official Method Ce 1h-0. Determination of cis-, trans-, Saturated Monosaturated and Polysaturated Fatty Acids in vegetable or Non-ruminant Animal Oils and fats by Capillary GLC, 2005.

2. AOAC Official Method Ce 996.06. Fat (Total, Saturated, and Unsaturated) in Food, Hydrolytic Extraction Gas Chromatographic Method, 2001.