限制性酵素消化程序

我們的限制性酵素系列經過優化，可使用五種獨特的緩衝液進行消化。使用單一限制性酵素消化 DNA 時，請使用酵素隨附的緩衝液。

使用單一限制性酵素消化DNA的步驟

1. 依圖示順序將元件加入乾淨的試管中：
        1 µL DNA（濃度 1 µg/µL)
         1 µL 限制酶
        16 µL 無菌水
   
2. 在消化溫度（通常為 37 °C）下培養反應 1 小時。
3. 透過加熱滅活（65 °C，15 分鐘）或加入 10 mM 終極濃度 EDTA 來停止消化。
4. 消化後的 DNA 即可用於研究應用。

當同時使用兩種限制性酵素時，首先使用 限制性酵素緩衝液參考中的表格檢查每種緩衝液中的酵素活性。如果它們在同一緩衝液中都有 100% 的活性，您就可以使用該緩衝液進行雙重消化協議。另外，也可以從常見的雙重消化圖表中確定最佳緩衝液。在某些情況下，由於緩衝液不相容（成分或溫度），建議進行順序消化。

使用兩種限制性酵素消化DNA的步驟

1. 依圖示順序將組份加入乾淨的試管中：
        1 µL DNA（濃度 1 µg/µL)
       ；每種限制性酵素 1 µL
        15 µL 無菌水
   
2. 在消化溫度（通常為 37 °C）下培養反應 1 小時。
3. 透過加熱滅活（65°C 15 分鐘）或加入 10 mM 終極濃度 EDTA 來停止消化。
4. 消化後的 DNA 即可用於研究應用。

DNA順序消化的步驟

1. 依圖示順序將組份加入乾淨的試管中：
        1 µL DNA（濃度 1 µg/µL)
         1 µL 限制酶
        16 µL 無菌水
   
2. 在消化溫度（通常為 37 °C）下培養反應 1 小時。
3. 通過加熱滅活（65 °C，15 分鐘）或加入 10 mM 終極濃度 EDTA 停止消化。
4. 使用純化試劑盒回收 DNA：重新懸浮和稀釋 DNA 至 1 µg/µL。
5. 按照步驟 1 準備第二次消化。繼續完成步驟 3.
6. 消化後的 DNA 即可用於研究應用。