Cultrex^® 基底膜萃取物，2 型，PathClear^® 規範

產品說明

基底膜是專門細胞外基質的連續薄片，形成內皮細胞、上皮細胞、肌肉細胞或神經細胞與其鄰近基質之間的介面。基底膜會在發育和傷口癒合期間降解和再生。它們不僅支撐細胞和細胞層，也在組織組織中扮演重要角色，影響細胞的黏附、移動、增殖和分化。

Cultrex^®基底膜萃取物 (BME) 是一種從 Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 腫瘤純化的可溶性基底膜。萃取物在 37 ⁰C下凝膠，形成重組的基底膜。

BME可在多種細胞培養條件下，用於維持原代內皮細胞、上皮細胞、平滑肌細胞和幹細胞的生長或促進其分化。BME 也可用於細胞附著、神經突發生長、血管生成、體外細胞侵襲及體內腫瘤性檢測。最近，我們又開發了兩種 Cultrex^® BME 配方，分別稱為 Cultrex^® BME Type 2 和 Cultrex^® BME Type 3。Cultrex^® BME Type 2 提供專利配方，與我們原本的 BME 相比，抗張強度更高；而 Cultrex^® BME Type 3 則符合體內實體腫瘤的生理環境，建議用於異種移植物和其他體內應用。

規格

1. 濃度：12 - 18 mg/mL
2. 來源：小鼠 Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 腫瘤
3. 儲存緩衝液：Dulbecco's Modified Eagle's medium without phenol red (Product No. D5030), with 10 μg/mL gentamicin sulfate (Product No. G1264)

注意事項及限制

1. 僅供研究使用。不適用於診斷程序。
2. 這些產品的物理、化學和毒理特性可能尚未完全研究清楚；因此，我們建議在使用這些化學試劑時，應戴上手套、穿著白大褂，並戴上眼睛保護套。

材料合格性

1. 功能測試
   管形成測試 - BME 可促進人類 (HBMVEC; HUVEC) 或小鼠 (SVEC4-10) 內皮細胞形成毛細管狀結構。
2. 穩定性測試
   1. PathClear^®-經PCR測試支原體陰性；通常包含在小鼠抗體產生（MAP）測試中的17種細菌和病毒品種，加上包括LDEV在內的13種額外的小鼠傳染性病原體，總共31種生物和病毒
   3. 經LAL檢測，內毒素濃度≤8 EU/mL<
3. 凝膠化
   BME 在 37 ⁰C 下可於 30 分鐘內凝膠化，並在 37 ⁰C 的培養液中維持凝膠化狀態至少 14 天。

Name	Buffer	Tensile Strength	Concentration	應用
Cultrex® BME, PathClear	DMEM	中型	12 - 18 mg/mL	xenograft/tumorgraft, 2D cell culture, 3D culture spheroids/organoids, stem cell
Cultrex® ；BME, Type 2, PathClear®	DMEM	高	12 - 18 mg/mL<	Cultrex® BME, Type 3, PathClear®	RPMI1640	high	12 - 18 mg/mL	細胞移植/腫瘤移植

儲存與穩定性

本產品儲存於 -20 ⁰C手動解凍冷藏室時，自出貨日起至少可穩定保存 3 個月。為達到最佳穩定性，請儲存於 -80 ⁰C。

包衣程序

Cultrex^® BME 在 2-8 ⁰C 解凍過夜。冰箱的溫度可能會有所不同，因此建議在解凍過程中將 BME 放在冰箱的冰上。解凍後的 BME 在 15 ⁰C以上的溫度下會迅速凝固；當使用萃取液時，請將它放在冰上以防止過早膠化。

Cultrex^® BME 有許多應用，需要不同的厚度和濃度。一般而言，蛋白濃度≥ 10 mg/mL 的 BME 可用於原代細胞的分化研究。有些應用，如內皮細胞形成毛細管狀結構（Tube Formation Assay）、大鼠主動脈組織分化為毛細管狀結構（Aortic Ring Assay）、上皮器官形成或腫瘤器官形成，則需要使用較厚的凝膠。有些應用，例如原代細胞的繁殖，需要薄層塗佈而非厚凝膠；因此，應使用薄層法。

厚凝膠法

1. 如上所述解凍 BME。
2. 用移液管緩慢地上下移動溶液來混合 BME；小心不要引入氣泡。
3. 用移液管每 cm² 移 200-300 μL 到生長表面。
4. 將塗層物件置於 37 °C，放置 30 分鐘。
5. 塗層物件即可使用。

薄層法（非膠凝）

1. 如上所述解凍 BME。
2. 用移液管緩慢地上下移動溶液來混合 BME；小心不要引入氣泡。
3. 在冷的無血清培養基中稀釋 BME 至所需濃度。可能需要根據經驗決定您應用的最佳塗佈濃度。蛋白濃度為 150 μg/mL 是原代細胞繁殖的建議起始濃度。
4. 加入足量的溶液以覆蓋生長表面的整個區域。建議每 cm² 300 μL 的用量。
5. 在室溫下培養鍍膜物體一小時。
6. 噴霧鍍膜溶液並立即平板細胞。不要讓鍍膜表面乾燥。

法律資訊

Cultrex 和 PathClear 是 Trevigen, Inc.

的註冊商標。

參考資料

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