開始前的注意事項
- 確保細胞健康且數量充足。
- 以溶液形式提供的纖維連接素產品，如果保持無菌，可在 2 - 8 °C 下保存至少一年。
- 將以凍乾粉末形式提供的纖維連接素產品置於合適的溶劑中。在 37 °C 下至少溶解 30 分鐘。可能會殘留少量未溶解的物質。這不會影響產品性能。
- 應避免渦旋或過度攪動纖維連接素溶液。
- 在密閉的無菌容器或無菌密封袋中，纖維連接素塗覆的培養皿可在2-8 °C下保存2-4周。
- 表面覆蓋濃度可能因培養的細胞而異。建議進行方案優化，以確定細胞的實際包被濃度。建議濃度列於表 1。
- 塗佈後請勿使培養板/蓋玻片過度乾燥，因為這會影響細胞的附著。
- 方案中的所有步骤都需要在无菌条件下进行。
用于培养皿的纤维连接蛋白包衣方案
- 稀释纤维连接蛋白至所需浓度。最佳附著條件取決於細胞類型和應用。典型的塗佈濃度為 1 - 5 ug/cm2。
- 以最小的容量塗佈培養皿表面。
- 一旦塗佈整個區域，移除多餘的溶液。
- 在室溫下晾乾至少 45 分鐘後，再導入細胞和培養基。
纖維連結素蛋白水解片段
纖維連結素片段是使用蛋白水解酶從血漿纖維連結素中獲得的。這些片段是纖維連結素分子內區域圖的有用工具，這些區域負責與膠原的特異性結合以及其他生物相關功能。
常見問題 (FAQ)
1.纖連蛋白產品的純度是多少？
我們不確定纖連蛋白溶液的純度。我們會運行 SDS PAGE 凝膠，並將 120kDa 的一條主要纖維連蛋白帶與過往批次進行比較，以確保品質一致。我們所有的纖維連接素粉末的純度都≥95%。
2.稀釋纖維連接素的最佳溶劑是什麼？
表 1
3.纖維連接素可以保存多久？纖維連接素可儲存多久？
以溶液形式提供的纖維連接素產品，只要是無菌的，可在 2 - 8 °C 下儲存一年。稀释后未使用的纤连蛋白可在 2 - 8 °C 下保存 1 周。纖維連接素塗層板可在 2 - 8 °C 下保存 4 周，但必須密封良好，以防止污染和/或纖維連接素乾燥。如果包被材料表面變色或出現裂縫，請勿使用本產品
4.纖維連接素的最佳包被濃度是多少？
表 1中建議了我們纖維連接素的包被濃度。但是，建議您優化適合您細胞的濃度。
5.研究幹細胞分化的最佳 ECM 蛋白是什麼？
雖然層壓蛋白和纖維連接素是廣泛使用的 ECM 蛋白，但您的細胞需要哪一種蛋白，應透過測試實驗來決定。幹細胞在不同的分化階段，表面會表達不同的整合素。ECM 蛋白的選擇取決於您有興趣研究的分化階段。
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