冷凍和解凍 FBS 及其他血清

部分概述

• 如何凍結和解凍血清以保障其穩定性
• 以安全的冷藏和儲存方式保護解凍的 FBS 和其他血清
  

確保 FBS 和血清穩定性和性能的最佳做法

動物血清 ；是培養細胞的理想營養來源，因為它含有蛋白質、脂質、鹽類、維生素、礦物質、氨基酸和其他生長所需的成分。如果儲存和處理正確，血清的性能特性可以維持多年。不當儲存和/或解凍血清產品不僅會降低其即時和長期穩定性，還會降低其有效性。

促進生長的數據表明，如果儲存正確，血清在整個保質期內都能保持其支援生長的特性。下表包含 胎牛血清 (FBS) 5 年期的穩定性數據。為了確保穩定性，血清必須適當儲存和處理。

SERA 的長期儲存：測試結果

Multiple Passage 是對照生長的百分比，而 Plating Efficiency (PE) 和 Cloning Efficiency (CE) 是 PE 和 CE 的百分比。

產品	測試	第 0 年	第 1 年	第 2 年	第 3 年	第5年
輻照FBS	多重傳輸	110	104	116	126	93	90
	裝瓶效率	61	36	51	35	40	50
	克隆效率	35	43	31	21	25	23
FBS	多次通過	113	103	99	95	103	102
	59	58	57	74	32	42
	49	56	42	47	28	30

如何冷凍和解凍 FBS 及其他血清以保護其穩定性

為有效保存動物血清的完整性，應將其冷凍避光保存。建議的儲存溫度為 -10 至 -40 °C。在低於 -40 °C 的溫度下，儲存瓶可能會變脆，增加破損的風險。

應避免多次解凍/冷凍循環，因為這會加速血清營養素的降解，並可能誘發不溶性沉澱物的形成。因此，血清絕對不能儲存於無霜冷凍櫃中。這些設備偶爾會自我加溫以防止內部冰塊沉澱，因此不利於冷凍血清產品的清晰度和穩定性。

FBS和其他血清的建議解凍程序

• 將血清瓶從冷凍庫中取出，讓它們適應室溫約10分鐘。更高的溫度會使耐熱營養素降解。如果使用水浴，不要將瓶子浸入超過血清含量的水平，以防止瓶蓋被浸入。
• 每隔 10 - 15 分鐘輕輕旋轉或搖晃瓶子，直到血清完全解凍為止。

解凍血清 (FBS) 時避免冷凍沉澱物

用於解凍血清的方法對於血清的最佳性能至關重要。適當解凍的關鍵在於定期攪拌。如果一瓶血清在解凍過程中沒有定期搖晃或旋轉，鹽分和蛋白質梯度就會在整個液體部分形成。這些梯度中含有高濃度的鹽分、蛋白質和脂質，可能會形成結晶或絮凝沉澱物。這些冷凍沉澱物對細胞培養物無毒，但會影響 FBS 或其他動物血清的外觀和成分的一致性。

偶爾出現稀疏的冷凍沉澱物並不少見，即使在使用建議程序解凍的血清中也是如此。

如果血清解凍不當，可能會形成更多的冷凍沉澱物，而且通常是不溶的。不建議過濾血清以去除冷凍沉澱物，因為這可能會造成營養素的意外流失，例如 生長因子、有細胞分裂原和其他蛋白質。

以安全的冷藏和儲存方式保護解凍的 FBS 和其他血清

迅速使用解凍的血清。液體 FBS 和其他血清可冷藏 (2 至 8 °C) 儲存長達四周。為避免解凍/冷凍循環或冷藏超過四周後丟棄未使用的血清，建議在無菌培養條件下，立即將不需要的血清分裝成適合應用的小等分，並重新冷凍以保護穩定性，以備日後使用。