D4513

脱氧核糖核酸酶 I 来源于牛胰腺

Type II-S, lyophilized powder, Protein ≥80 %, ≥2,000 units/mg protein

• 别名: DNase I, 脱氧核糖核酸 5′-寡核苷酸-水解酶
• CAS号: 9003-98-9
• EC 号: 3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)
• EC 号: 232-667-0
• MDL编号: MFCD00130918
• UNSPSC代码: 12352204
• NACRES: NA.54

属性

• 生物来源: bovine pancreas
• 无菌性: sterile-filtered
• 类型: Type II-S
• 表单: lyophilized powder
• 比活: ≥2,000 units/mg protein
• 分子量: ~31 kDa
• 纯化方式: chromatography
• 组成: Protein, ≥80%
• 包装: vial of ≥10.0 mg protein
• 技术: DNA purification: suitable
• 杂质: endotoxin, tested
• 溶解性: 0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear(lit.)
• 适用性: suitable for molecular biology
• 应用: diagnostic assay manufacturing; diagnostic assay manufacturing
• 异质活性: Chymotrypsin ≤0.01%; Protease ≤0.005%; RNase ≤0.01%
• 储存温度: −20°C

说明

应用

Sigma公司的DNAse I与人类尿液来源的白细胞介素1抑制剂相比，具有水解[¹⁴C]DNA [¹⁴C]的能力。[1]它也被用来切割139个碱基对Hind III/Nci I限制性片段，以研究该酶用于足迹实验的稳定性。DNase I被广泛用作研究药物和蛋白质与DNA结合的印迹剂。[2]

已有研究采用牛胰腺脱氧核糖核酸酶I，研究了从牛胰腺中提取高活性RNase、DNase、胆固醇酯酶和胰蛋白酶的一个新途径。牛胰腺脱氧核糖核酸酶I也被用于研究鲤鱼肝脏DNase的分离和进一步的特性。

用于从蛋白质样品中除去 DNA。

生化/生理作用

DNase I是一种核酸内切酶，作用于嘧啶附近的磷酸二酯键，产生末端为5-磷酸的多核苷酸。在Mg²⁺存在时，DNAse I对每条DNA链进行独立的裂解，裂解位点是随机的。在Mn²⁺存在下，两条DNA链几乎在同一位点被裂解。[3]其最佳pH值在7到8之间。二价阳离子，如Mn²⁺、Ca2+^{、Co2+和Zn2+是该酶的激活剂。[4]浓度为5mM的Ca2+ 可以稳定酶的蛋白水解消化。牛胰腺DNA酶I由A、B、C、D四种色谱可分辨组分组成，摩尔比分别为4:1:1。仅发现少量的D。[5]2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠(SDS)[6] 和肌动蛋白[7] 是已知的抑制该酶活性的物质。}

单位定义

以I型或III型DNA作为底物时，在pH 5.0、37°C条件下，一单位Kunitz 每分钟可生成0.001/mL的ΔA₂₆₀。（1单位 = 1 Kunitz单位）

外形

含氯化钙的冻干粉

制备说明

该酶粉可在pH值为4.0-9.0的水中或任何缓冲液中进行复溶，磷酸盐缓冲液除外。应避免钙螯合剂的存在。在0.15 M NaCl中加入10 mg/mL DNAse I溶液，在 −20°C的温度下保存一周，其活性可能会降低10%。同样的溶液分装储存在2-8°C中，其活性可降低约20%。它在60°C下，pH值5到7之间可保持活性长达5小时，在68°C时在<10分钟内失去活性。在醋酸盐缓冲液(pH 5.0)和tris缓冲液(pH 7.2)中，当浓度为1mg/mL时，其活性以6%/小时的速度丧失。

分析说明

双缩脲法测定蛋白质。

其他说明

2024年CiteAb奖——成功的帕金森研究供应商(2024 CiteAb Award Winner for Supplier Succeeding in Parkinson′s Research)

安全信息

• 象形图: GHS08
• 警示用语：: Danger
• 危险声明: H334
• 预防措施声明: P261 - P284 - P501
• 危险分类: Resp. Sens. 1
• 储存分类代码: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• 闪点(°F): Not applicable
• 闪点(°C): Not applicable
• 个人防护装备: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)