D4263

脱氧核糖核酸酶 I 来源于牛胰腺

Standardized vial containing 2,000 Kunitz units of DNase I (D4527), vial of ≥0.25 mg total protein

• 别名: DNase I, 脱氧核糖核酸 5′-寡核苷酸-水解酶
• CAS号: 9003-98-9
• EC 号: 3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)
• EC 号: 232-667-0
• MDL编号: MFCD00130918
• UNSPSC代码: 12352204
• NACRES: NA.54

属性

• 生物来源: bovine pancreas
• 表单: powder
• 比活: 1700—2300 U/vial
• 分子量: ~31 kDa
• 纯化方式: chromatography
• 包装: vial of ≥0.25 mg total protein
• 技术: DNA extraction: suitable
• 溶解性: 0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear
• 适用性: suitable for molecular biology
• 应用: diagnostic assay manufacturing; diagnostic assay manufacturing
• 储存温度: −20°C

说明

应用

DNA酶I被用来产生DNA缺口，作为将带标记的碱基整合到DNA中的第一步。在MMTV-Wnt-1小鼠乳腺肿瘤肿瘤干细胞的分离和分子表征过程中，Sigma的DNAse I与其他酶一起被用于肿瘤的收集和分离。[1]

已有研究关于牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I用于根据哺乳动物的脱氧核糖核酸酶I组织浓度的不同将其分为三种类型。牛胰腺脱氧核糖核酸酶I也被用于比较从牛、羊和猪胰腺中分离的脱氧核糖核酸酶的三种主要结构的研究。

用于从蛋白质样品中除去 DNA。

生化/生理作用

DNase I是一种核酸内切酶，作用于嘧啶附近的磷酸二酯键，产生末端为5-磷酸的多核苷酸。在Mg²⁺存在时，DNAse I对每条DNA链进行独立的裂解，裂解位点是随机的。在Mn²⁺存在下，两条DNA链几乎在同一位点被裂解。[2]发现其最佳pH值为7和8。二价阳离子，如Mn²⁺、Ca2+^{、Co2+和Zn2+ 是该酶的激活剂。[3]浓度为5mM的Ca2+ 可以稳定酶的蛋白水解消化。牛胰腺DNA酶I由A、B、C、D四种色谱可分辨组分组成，摩尔比分别为4:1:1。仅发现少量的D。[4]2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠(SDS)[5] 和肌动蛋白[6] 是已知的抑制该酶活性的物质。}

特点和优势

高效去除DNA：牛胰腺脱氧核糖核酸酶I是一种有效的核酸内切酶，可随机切割双链DNA，因而成为从蛋白质样品中去除DNA的可靠选择。

多用途应用：这种酶可用于对DNA切口，将标记碱基掺入DNA中，以及分离和分子表征小鼠乳腺肿瘤中的癌症干细胞。它还可用于对从牛、绵羊和猪胰腺分离的脱氧核糖核酸酶进行比较研究。

稳定性：此酶可在60 °C、pH 5-7条件下保持活性长达5小时，并可在−20 °C下储存长达一周且活性损失极小。这一稳定性使其成为高性价比便捷之选。

单位定义

一个Kunitz单位可以DNA、I型或III型作为底物，在25°C的pH 5.0条件下每分钟每毫升产生0.001的ΔA₂₆₀ 。

制备说明

该酶粉可在pH值为4.0-9.0的水中或任何缓冲液中进行复溶，磷酸盐缓冲液除外。应避免钙螯合剂的存在。在0.15 M NaCl中加入10 mg/mL DNAse I溶液，在 −20°C的温度下保存一周，其活性可能会降低10%。同样的溶液分装储存在2-8°C中，其活性可降低约20%。它在60°C下，pH值5到7之间可保持活性长达5小时，在68°C时在<10分钟内失去活性。在醋酸盐缓冲液(pH 5.0)和tris缓冲液(pH 7.2)中，当浓度为1mg/mL时，其活性以6%/小时的速度丧失。

分析说明

由缩二脲测定的蛋白质。

安全信息

• 象形图: GHS08
• 警示用语：: Danger
• 危险声明: H334
• 预防措施声明: P261 - P284 - P501
• 危险分类: Resp. Sens. 1
• 储存分类代码: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• 闪点(°F): Not applicable
• 闪点(°C): Not applicable
• 个人防护装备: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)